Saflaştırılmamış Rekombinant Adeno İlişkili Viral Vektörler Kullanılarak Kültürlenmiş Hücrelerde Transgen Ekspresyonu

Gen terapisi, DNA'yı hücrelere sokmak için viral bir kapsid kullanır ve daha sonra hücreler bu DNA'yı tam olarak anlaşılmayan mekanizmalar aracılığıyla işler. Hücrenin AAV'nin DNA'yı nasıl işlediğini inceleyerek, AAV gen terapilerinin güvenliğini, etkinliğini ve uzun ömürlülüğünü artırmayı umuyoruz. AAV DNA işlemeyi doku veya organizma düzeyinde incelemek oldukça zordu.

Süper çözünürlüklü mikroskopi ile AAV görselleştirme için hücre kültürü transdüksiyon protokolleri geliştirirken, hücre kültüründe saflaştırılmamış AAV preparatlarının üretilmesinin ve kullanılmasının basitliğinin iyi bilinmediğini gördük. Geçici ifade için bu basit yöntem, birçok alandaki araştırmacılar için avantajlı olabilir. Ham AAV preparatları oluşturmak oldukça basittir ve uzun raf ömrüne sahip F4C'ye sahiptirler ve bu da çok sayıda deneyde kullanılmalarına izin verir.

Bunları uygulamak basittir, bu da onları standart transfeksiyon reaktiflerine zaman ve maliyet açısından etkin bir alternatif haline getirir. Genellikle AAV ham preparatları, transfeksiyondan daha verimli ve daha az toksiktir. Vektrolojinin üretim ve transdüksiyon olmak üzere iki kolu vardır ve her ikisi de tamamen konakçı hücresel makinelere bağlıdır.

Gelecekteki araştırmamız, bu süreçlerde yer alan hücresel makineleri ve bunları manipüle etmenin yollarını belirlemeyi amaçlamaktadır, böylece üretim ve iletim verimliliğini artırabiliriz. Vektrolojinin her iki kolunu da destekleyen temel biyolojiyi anlamak, gen terapilerinin başarısı için hayati önem taşır.