Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Bu rapor, farelerde miyokard enfarktüsünün indüksiyonu için benzersiz bir yaklaşım sunmaktadır. Mevcut yöntem kolaydır, zaman kazandırır ve çoğu laboratuvarda kolayca bulunan cerrahi tüpleri ve ekipmanları kullanır. Miyokard enfarktüsü modellerinin oluşturulması, MI sonrası yeniden şekillenmenin geçmiş mekanizmalarını ve yeni terapötiklerin varyasyonunu araştırmak için bir öncül sağlar.

Tüy dökücü kremi fare göğsüne uygulayın ve bir dakika bekleyin. Ardından tüy dökücü kremi ve saçı ıslak gazlı bezle nazikçe silin. Fareyi sırtüstü pozisyonda bir ameliyat platformuna sabitleyin.

Cerrahi alanı metinde anlatıldığı gibi dezenfekte edin. Ardından dezenfekte edilmiş alanın etrafına steril bir örtü yerleştirin. Ksifoid ve koltuk altını birbirine bağlayan çizgi boyunca 0,5 santimetrelik bir cilt kesimi yapın ve pektoral majör ve pektoral minör kasları forseps kullanarak kör bir şekilde ayırın.

Mikro Sivrisinek hemostatı kullanarak dördüncü interkostal boşluğu açın. Sol elin işaret parmağı ile kalbi dördüncü interkostal boşluğa doğru iterek dışsallaştırın. Kalbi sol elinizle sabitleyin ve sol ön inen dalı orijinden üç milimetre uzakta 6/0'lık bir dikişle bağlayın.

Kalbi hızlı bir şekilde göğüs boşluğuna geri yerleştirin. Göğüs boşluğuna hafifçe bastırarak havayı göğüs boşluğundan boşaltın. Ameliyat sonrası ağrı yönetimi için, ameliyattan sonra yetmiş iki saate kadar her dört ila altı saatte bir deri altına buprenorfin enjekte edin.

Anesteziden kurtulmak için fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin. Ötenazi yapılan fareyi sırtüstü pozisyonda ameliyat platformuna sabitleyin. Üst karın bölgesinde yaklaşık üç ila dört santimetrelik bir ventral kesi yapın.

Kaburgaları göğüs boşluğunun her iki tarafından kesin ve ardından diyaframı çıkarın. İntraventriküler enjeksiyon yoluyla kalbi 10 mililitre soğuk dört santigrat derece 1X PBS ile perfüze edin. Daha sonra aort kökünü keserek kalbi toplayın ve hemen eksi 80 santigrat derecede saklayın.

Donmuş kalbi jilet kullanarak buz üzerinde bir milimetre kalınlığında bölümler halinde dilimleyin. Hazırlanan kalp dilimlerini, 10 ila 15 dakika boyunca 37 santigrat derecede bir 1X PBS içinde çözülmüş% 1 TTC çözeltisinde inkübe edin. Ardından bir dijital kamera kullanarak dilimlerin fotoğrafını çekin.

Koroner arter ligasyonunu takiben, TTC boyama analizi, miyokard enfarktüsünün başarılı bir şekilde indüklendiğini ve MI sonrası skar boyutunda zamansal değişiklikler olduğunu gösterdi. Sağkalım analizi sonuçları, erkek ve dişi C57BL / 6J farelerinde MI'dan sonraki yedi gün içinde açık mortalite gösterdi. Ventriküler rüptür, MI sonrası ölümün yaygın bir nedeniydi.

MI sonrası ekokardiyografik değerlendirme, kontraktil disfonksiyon ve ventriküler yeniden şekillenmenin başarılı bir şekilde indüklendiğini gösterdi. Kalbi dışsallaştırmaya çalışırken, önce göğüs boşluğuna basmayın ve direncimizi takip ederek, ağırlıklı övgüye karşı yönü ayarlama ihtiyacını gösterir. Bu prosedürü takiben, kalp hastalığı konularında gen terapilerinin veya hücre tedavilerinin etkinliğini test etmek için viral vektörlerin veya hücrelerin intramiyokardiyal enjeksiyonu yapılabilir.