Bu çalışma RISystem AG, İsviçre&#39;nin Davos tarafından desteklenmiştir.

Tüm işlemler IACUC onaylı ve kurumsal ilkelerine uygun (Landesamt für Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher Dienst, Saarbrücken, Almanya) izledi. Ağrı ve enfeksiyon önleme deneyleri yapılacak ülkenin ve kurumun ilgili kurallar ile uyum içinde olmalıdır. İmplantlar ve Cerrahi Aletler hazırlanması 1. <ol><li> mikrocerrahi alet kutusundan bir neşter bıçak (boyut 15), küçük hazırlık makas, ince forseps, soyunma forseps, küçük kerpeten, 24 ayar (G) ve 27 G iğne olmayan bir rezorbe 5-0 sütür, ve bir iğne tutucu seçin . </li><li> Intramedüller çivi, kilitli iğne, özel amaçlı cihaz, Gigli gördüm, Gigli için şablon gördüm, merkezleme matkap ucu (1 mm çapında), matkap ucu (0.3 mm çapında), ve el matkabı ambalajından (Şekil 2;) Malzeme listesine bakınız. NOT: intramedullary tırnak (0.8 mm çap, 15.7 mm uzunluk) femur içine retrograd implantasyon tıbbi kalite paslanmaz çelikten yapılmış bir intramedüller kilitli çivi olduğunu. Tırnak bir yakın ipliği (4 mm uzunluk) ve eksenel ve dönel stabilite elde etmek için birbirine pimlerin sokulması (0.3 mm çap) için iki delik (Şekil 1) yer alır. </li><li> (130 ° C, 25 dk buhar sterilizasyonu) 5 dakika boyunca bir dezenfekte edici solüsyon (örneğin,% 96 alkol) için implantlar ve tüm cerrahi aletler Açığa veya sterilize. Dezenfeksiyon veya Sterilizasyon sonrasında, steril bir operasyon bez üzerine aletleri yerleştirin. Küçük hayvan operasyon masasına doğrudan bitişik steril çalışma bez yerleştirin. </li></ol> 2. Hayvanlar, Anestezi ve Analjezi <ol><li> çalışma ve ele alınması soru için gerekli farelerin suşu, yaş ve cinsiyet seçin. Not: 14-haftalık erkek CD-1 fareler, bu çalışmada 12 için kullanıldı. tırnak impla için35 gr - ntation, hayvanların ideal vücut ağırlığı 25&#39;tir. </li><li> 15 mg / kg ksilazin 75 mg / kg ketamin intraperitoneal enjeksiyonu ile farelere anestezi. ayak tutam tarafından anesthetization onaylayın. anestezi sırasında kurumasını hayvanların gözleri korumak için göz yağ sürün. Anestezi indüksiyonu sonrasında, vücut sıcaklığını sabit tutmak için bir ısı lambası altında fare yerleştirin. </li><li> Ameliyat sonrası 3 kadar ameliyat öncesi gün 1 analjezi için içme suyu (2.5 mg / 100 mi) içindeki tramadol hidroklorür uygulanır. </li></ol> 3. Cerrahi Prosedür ve Tırnak İmplantasyon <ol><li> Ameliyattan önce, tüm sağ arka bacak tıraş ve tüy dökücü krem ​​uygulayın. 5 dakika sonra, krem ​​ve suyla bacak temizleyin. (130 ° C, 25 dk buhar sterilizasyonu) bir dezenfekte edici solüsyon (örneğin,% 96 alkol) için implantlar ve tüm cerrahi aletler Açığa veya sterilize. </li><li> aseptik koşullar altında, ön anlaşması yerKüçük hayvan operasyon masasında sırtüstü pozisyonda se. Diz kondillerin bir anterior yaklaşım sağlamak için sağ diz bükün. neşter bıçak kullanarak sağ diz 5 mm medial parapatellar insizyon gerçekleştirin. </li><li> ince forseps ile patellar ligament kaldırın ve neşter bıçağı ile dikkatlice ligaman seferber. Ardından, femur interkondiler çentik ortaya çıkarmak için neşter bıçağı ile yanal patellayı kaydırır. </li><li> kemik iliği boşluğuna ulaşana kadar delerek interkondiler çentik açın. <ol><li> matkap merkezleme 1 mm ile femur eksenine offset 45º ile sondaj başlayın. Yavaş yavaş o femur kemik eksenini paralel kadar sondaj esnasında matkabın yönünü değiştirmek. kemik iliği boşluğuna ulaşılırsa sondaj durdurun. </li></ol></li><li> interkondiler çentik at kemiği açtıktan sonra, femur tüm uzunluğu boyunca intramedüller boşluğuna 24 G iğne takın. INTRAME delmekelle 24 G iğne döner hareketleri ile femur dullary boşluğu. 24 G iğne çıkarın ve intramedüller boşluğuna ince 27 G iğne takın. proksimale büyük trokanter femur kortikal kemiğe perfore ileri iğne itin. </li><li> Femur 27 G iğne çıkarın. çivinin distal uç kondillerin seviyesine ulaşıncaya kadar el matkabı kullanarak, sürekli dönme ve eksenel basınç altında interkondiler çentik ile intramedüller çivi implant. Not: tırnağın uzak ucu küçük bir işareti tespit edilebilir. </li><li> sol lateral pozisyonda fare yerleştirin. cerrahi femur orta cisim ortaya koymak için kalça eklemine diz ekleminin lateral femur cisim kısmı boyunca neşter bıçak kullanarak bir uzunlamasına deri kesisi gerçekleştirin. </li><li> Küçük hazırlanması makas kullanarak, fasya bölünmüş ve yan taraftan femur ekseni yönünde kasları yayıldı.femur cisim parçası açığa çıkana kadar kasları yayıldı. siyatik siniri korumak. <ol><li> soyunma forseps ile kemik zayıflatarak femur tüm çevresi hazırlayın. Ardından, giyinme forseps yayarak kasları geri çekin ve femur maruz kalmaktadır. </li></ol></li><li> çivinin uzak ucuna hedefleme cihazı monte edin. o tırnağın adaptör flanşı verdiği kadar cihazı ilerlemek ve femur anterolateral konumda amaçlayan cihazı açın. </li><li> Bir proksimal ve distal kilitleme pimi ile çivi kilitlenebilir. <ol><li> Proksimal kilitleme pimi ile başlayın. </li><li> El matkap içine ortalama matkap ucu (1 mm çapında) yerleştirin. yakın kilitleme deliği pozisyonunda kemik havşa. Not Havşa olarak, küçük bir kavite kemiği ile delmeden bakan kortikal kemik oluşturulur. Bu boşluğu, geliştirilmiş merkezleme ve ince matkap kılavuz (0.3 mm çap) sağlardaha sonra kullanılan. </li><li> El matkap içine matkap ucu (0.3 mm çap) yerleştirin. amaçlayan cihazı kullanılarak, kaplama ve kaçırdı kortikal kemiğin (bikortikal) hem aracılığıyla delik açın. amaçlayan cihaz üzerinden ilk kilitleme pimini takın. en kısa sürede birbirine tork elde edilir kapalı olarak birbirine pim tahrik mili makası. </li><li> Distal kilitleme pimi için bu yordamı yineleyin. </li></ol></li><li> diafiz osteotomiyi gerçekleştirin. <ol><li> İki birbirine pimleri arasındaki yan tarafında amaçlayan cihaza testere kılavuzunu takın. Gigli tuzlu su ile sürekli sulanan gördüm ile Ardından, kemik gördüm. osteotomi tamamlandıktan sonra, kemiğe yakın bir ucunda kesim hattını. yumuşak dokuya zarar vermemek için dikkatli testereyi çıkarın. </li></ol></li><li> işaretli hattında intramedüller çivi kalan milini off klibi, küçük kerpeten ile, nişan cihazını çıkarın ve. </li><li> lat kas katmanları kapatıneral femur site ve tek dikişlerle deri kapatılması gerçekleştirin. diz ön yerinde, Patellayı yeniden konumlandırmak ve tek sütür ile kaslara patella tendonu sabitleyin. yanı sıra bu yarayı kapatmak için tek dikişlerle kullanın. </li><li> Anestezi kurtarmak kadar ısı lambası altında hayvanların tutun. Onlar ventral yatma muhafaza edilmesi için yeterli bilinci yerine kadar sahipsiz hayvanları bırakmayın. hayvan barınağında tek kafeslere hayvanların dönün. </li><li> Her gün özenle hayvanları izleyin. İlk üç gün boyunca postoperatif analjezi koruyun. Ameliyat sonrası 4. günde, hayvanlar hala acı kanıt gösterebilir, eğer seslendirme, huzursuzluk, hareketlilik olmaması, damat başarısızlık, anormal duruş ve çevresi normal ilgi eksikliği ile gösterildiği gibi, analjezi devam edin. hayvanlar ağrı serbest zaman analjezi sonlandırın. </li></ol>

<ol>
	<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+bone+healing+models:+standards,+tips,+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting.">Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li><li>Claes, L., Augat, P., Suger, G., Wilke, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+size+and+stability+of+the+osteotomy+gap+on+the+success+of+fracture+healing.">Influence of size and stability of the osteotomy gap on the success of fracture healing.</a> J Orthop Res. 15 (4), 577-584 (1997).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+healing+process+in+non-stabilized+and+stabilized+femur+fractures+in+mice.">Characterization of the healing process in non-stabilized and stabilized femur fractures in mice.</a> Arch Orthop Trauma Surg. 136 (2), 203-211 (2016).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+analysis+of+rotational+stiffness+of+different+osteosynthesis+techniques+in+mouse+femur+fracture.">Ex vivo analysis of rotational stiffness of different osteosynthesis techniques in mouse femur fracture.</a> J Orthop Res. 27 (9), 1152-1156 (2009).</li><li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+stable+closed+femoral+fracture+model+in+mice.">Development of a stable closed femoral fracture model in mice.</a> J Surg Res. 153 (1), 71-75 (2009).</li><li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+LockingMouseNail-a+new+implant+for+standardized+stable+osteosynthesis+in+mice.">The LockingMouseNail-a new implant for standardized stable osteosynthesis in mice.</a> J Surg Res. 169 (2), 220-226 (2011).</li><li>Cheung, K. M., Kaluarachi, K., Andrew, G., Lu, W., Chan, D., Cheah, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+externally+fixed+femoral+fracture+model+for+mice.">An externally fixed femoral fracture model for mice.</a> J Orthop Res. 21 (4), 685-690 (2003).</li><li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+technique+for+internal+fixation+of+femoral+fractures+in+mice:+impact+of+stability+on+fracture+healing.">A new technique for internal fixation of femoral fractures in mice: impact of stability on fracture healing.</a> J Biomech. 41 (8), 1689-1696 (2008).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+internal+locking+plate+to+study+intramembranous+bone+healing+in+a+mouse+femur+fracture+model.">An internal locking plate to study intramembranous bone healing in a mouse femur fracture model.</a> J Orthop Res. 28 (3), 397-402 (2010).</li><li>Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+for+intramembranous+ossification+during+fracture+healing.">A model for intramembranous ossification during fracture healing.</a> J Orthop Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).</li><li>Hiltunen, A., Vuorio, E., Aro, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+experimental+fracture+in+the+mouse+tibia.">A standardized experimental fracture in the mouse tibia.</a> J Orthop Res. 11 (2), 305-312 (1993).</li><li>Manigrasso, M. B., O'Connor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+closed+femur+fracture+model+in+mice.">Characterization of a closed femur fracture model in mice.</a> J Orthop Trauma. 18 (10), 687-695 (2004).</li><li>Lovati, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetic+mouse+model+of+orthopaedic+implant-related+Staphylococcus+aureus+infection.">Diabetic mouse model of orthopaedic implant-related Staphylococcus aureus infection.</a> PLoS One. 8 (6), e67628 (2013).</li><li>Slade Shantz, J. A., Yu, Y. Y., Andres, W., Miclau, T., Marcucio, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+macrophage+activity+during+fracture+repair+has+differential+effects+in+young+adult+and+elderly+mice.">Modulation of macrophage activity during fracture repair has differential effects in young adult and elderly mice.</a> J Orthop Trauma. 28, 10-14 (2014).</li><li>Claes, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+mechanical+factors+on+the+fracture+healing+process.">Effects of mechanical factors on the fracture healing process.</a> Clin Orthop Relat Res. 355 (Suppl), 132-147 (1998).</li><li>Gr&#246;ngr&#246;ft, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fixation+compliance+in+a+mouse+osteotomy+model+induces+two+different+processes+of+bone+healing+but+does+not+lead+to+delayed+union.">Fixation compliance in a mouse osteotomy model induces two different processes of bone healing but does not lead to delayed union.</a> J Biomech. 18 (13), 2089-2096 (2009).</li><li>Glatt, V., Matthys, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adjustable+stiffness,+external+fixator+for+the+rat+femur+osteotomy+and+segmental+bone+defect+models.">Adjustable stiffness, external fixator for the rat femur osteotomy and segmental bone defect models.</a> J Vis Exp. (9), e51558 (2014).</li><li>Manassero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+murine+femoral+segmental+critical-sized+defect+model+stabilized+by+plate+osteosynthesis+for+bone+tissue+engineering+purposes.">A novel murine femoral segmental critical-sized defect model stabilized by plate osteosynthesis for bone tissue engineering purposes.</a> Tissue Eng Part C Methods. 19 (4), 271-280 (2013).</li></ol>

Romano Matthys is an employee of RISystem AG, Davos, Switzerland, which produces the implants and implant-specific instruments. The other authors have no conflicts of interest.

Cerrahi tekniğin en kritik adımlar çivi, nişan alma aleti ve pimleri doğru konumlandırma vardır. Tırnak kondilin seviyesinde diz eklemine çivinin bir çıkıntı diz (Şekil 3 A) hareketini kısıtlayabilir için, tırnağın uzak ucunda belirgin girinti tamamen yerleştirilmiş olması gerekir. Bu nedenle, femur boyutu ve buna bağlı olarak, hayvan vücut ağırlığına, dikkate alınmalıdır. Cerrah ayrıca tırnağın adaptör flanş bağlama amaçlayan cihazın nihai pozisyonuna özel dikkat etmelidir. Bu osteotomisi özdeş bir orta cisim pozisyonunda her zaman olduğunu garanti eder. Son olarak, kilitleme pimleri gözlem süresi (Şekil 3 B) esnasında pim çıkık bilmek tam bicortically eklenmesi gerekir. Bu nedenle, pim dönme hareketleri ve sürekli eksenel yük kullanarak femur takılmalıdır. pim tahrik mili makaslaren kısa sürede birbirine tork elde edilir olarak kapatır. hayvanlar çalışma protokolüne dahil edilmeden önce çivi ve pim son pozisyon radyografi ile teyit edilmesi gerekir. Deney sonunda, kemik hasat sırasında en kritik adım çivi birbirine pimleri çıkarılmasıdır. Oldukça sık, pim uçları yeni oluşan kemik dokusu ile kaplıdır. Aslında, bu kemik dokusu pim çıkarılabilir kadar rezeke edilmesi gerekir. Femur herhangi bir hasar iyileşti kemik biyomekanik özelliklerini etkileyebilir çünkü bu, çok dikkatli yapılmalıdır. Bazı durumlarda, pim daha kolay femur sırt tarafında çıkartılabilir. tırnak kendisi basit bir iğne tutucu kullanarak herhangi bir sorun olmadan kaldırılabilir. prosedüre modifikasyonlar yapılamaz bu yüzden, cerrahi prosedür için alet ve implantları, yüksek düzeyde spesifik olan. Prosedür com gelişebilir dakomplikasyonların, bizim elimizde, onlar (yani,% 2&#39;nin altındadır) nadirdir. Örneğin, işlem sırasında yanal kaydırılır patellar ligaman, delinebilir. Bu tırnak implantasyon sonrası bağın dikiş atmayı gerektirir. 24 G iğne ve femur oyma yerleştirilmesi sırasında, kondiller patlayabilir. Gigli ile pim ekleme ve osteotomi gördüm sırasında femur kemik orta cisim bölgede kırılabilir. İşte bu komplikasyonlar açısından sorun giderme imkanı, bu yüzden bu hayvanlar standart deney için kullanılamaz. tekniğin bir sınırlama farklı hayvan boyutları ve bu şekilde, femora, implantlar farklı boyutlarda gerektirmeleridir. Implant kullanımı ile ilgili bir başka sınırlama in vivo mikro BT nedeniyle görüntü kalitesini etkiler implant materyali (tıbbi kalite paslanmaz çelik), için neredeyse imkansız iyileşme sürecinde osteotomi analizleri olmasıdır. İn vivoKemik iyileştirme çalışmaları açık ya da kapalı modeller kullanılarak gerçekleştirilebilir. Çalışmaların çoğunda, femur şifa veya kaval kemiği analiz edilir. Bu son on yıl boyunca fareler için geliştirilmiş teknikler ve model için de geçerlidir. Bunlar sert veya daha az rijit tespit sağlayabilir açık 7-10 modelleri yanı sıra kapalı 5,11,12 yaklaşımları içerir. ilgi, farelerde yapılan çalışmalar, basit intramedüller pimi kullanılır. Böyle basit bir pim büyük nasır oluşumu ile ilişkili olduğu stabilize kırıkların iyileşmesi rağmen, teknik dezavantajları önemli sayıda taşıyordu. Bunlar pim çıkığı ve eksenel ve dönme istikrar yetmezliği nedeniyle heterojen bir iyileşme yanıtı. Bu dezavantajlar, deneysel sonuçlar, kemik iyileşmesinin analiz niyetinde Son zamanlarda yapılan çalışmalar, etkilediği bilinmektedir, ancak, yine de, kırık bir iğne 13, sadece kararlı ya da stabilize bırakıldığı murin modelleri kullanmak <s&gt; 14 kadar. Belirgin iyileşme sırasında mekaniği iyileşme 15 sürecini etkileyen çünkü Böylece, klinik uygulamada kullanılan kıyaslanabilir istikrarlı osteosentez teknikleri, aynı zamanda farelerde kullanılması gerektiğini hissediyorum. Basit intramedüller pimin edilene göre kilitleme tırnağı intramedüller maliyeti önemli ölçüde daha yüksektir. Ancak, pim çıkığı riskini taşımaktadır ve eksenel ve rotasyonel stabiliteyi sağlamaz. Bu sonuçların kalitesini etkileyen ve çalışma için hayvanların daha fazla sayıda gerektirir olabilir. Bunun aksine, kilitleme tırnağı intramedüler sonuçlar daha az değişiklik ile sonuçlanır standardizasyon yüksek derecede osteotomi kemik defektlerinin stabilizasyon sağlar. Bu hayvanlara gerekli sayısında bir azalmaya neden olur. Yaygın olarak kullanılan pimin eksenel ve dönüş instabilite üstesinden gelmek için, çok sayıda implant son yıllarda tanıtılmıştır.Bunlar özellikle modifiye uzak baş ve proksimal parçacığı 5 ile kırık sıkıştırma indükler intramedüller vidası bulunmaktadır. vida implant için gerekli olan cerrahi teknik, basit ve intramedüller çivi daha az invaziv olduğunu. Ancak, vida çivi 4 ile karşılaştırıldığında daha düşük dönme sertliği gösterir. eksenel stabilite, kemik kırığı boyunca kemik parçalarının eksensel sıkıştırma ile elde edilir, çünkü Ayrıca, hatalı iyileşme bir modeli olarak kullanılamaz. Rijit tespit için kullanılabilecek iç kilitleme plakası, intramembranous kemikleşme 9 hakim olduğu kemik iyileşmesi ile sonuçlanır. iyileşme bu tür küçük yara dokusu oluşumu ile bağlantılı olduğu için, bu model, biyokimyasal ve moleküler analiz için kalus dokusundan daha büyük miktarlarda ihtiyaç deneylerde tercih edilmeyebilir. ilgi, iç kilitleme plakası da d edilebilirdaha esnek sabitleme tekniği 16 esigned. bu esnek plaka kullanarak, kemik iyileşmesi endokondral kemikleşme hakim ve böylece yara dokusunun büyük miktarlarda ortaya çıkar. Ancak, kallus oluşumu sitesi karşısında plaka yerleştirme ağırlıklı olarak meydana gelen heterojen olduğunu. kilitleme plakası da kemik defektlerinin stabilizasyonu için izin verir. Bununla birlikte, boşluk boyutu sınırlıdır ve güvenilir olmayan bir birliği oluşumu 6 ile sonuçlanmaz. fareler için eksternal fiksatör kemik defekti iyileşmesini analiz etmek için tırnak iyi tanımlanmış bir alternatif sunuyor. Burada tanıtılan çivi ile karşılaştırıldığında eksternal fiksatör en büyük avantajı kemik iyileşmesi 17 sırasında in vivo implant sertliği doğrulamak için olasılığıdır. Ancak, dıştan uygulanan tespit bileşenlerine pim enfeksiyonları ve normal fiziksel aktivite değişiklikleri de dikkate alınmalıdır. özel ilgi, ne internal kilitleme plakası ne eksternal fiksatör kemik defekti iyileşmesinde analiz edilebilir ayrı kemik yerine kullanılan ve doku mühendisliği yapılarının, standardize fiksasyonu sağlar. Bu iki teknik kullanıldığında, kemik yerine ya da doku mühendisliği yapıları genellikle ek tespit 18. gerektirir kusur içine yerleştirilmelidir. Buna karşılık, tırnak kullanımı yeterli konumlandırma ve tespit (Şekil 6) sağlayan, çivi üzerinde kemik yerine yerleştirilmesini sağlar. Burada tanıtılan intramedüller kilitleme tırnağı klinik uygulamada travma hastalarının tedavisinde kullanılan çivi ile karşılaştırılabilir. Buna göre, tırnak normalden kusurlu kadar fare kemik iyileşmesi araştırma geniş bir yelpazede kullanılabileceğini hissediyorum.

Kemik iyileşmesi biyolojisi, hücre ve küremsi kültürleri kullanılarak, in vitro incelenmiştir olabilir, ama aynı zamanda, hayvan çalışmaları kullanılarak yaklaşımları in vivo gerektirir. Büyük hayvan deneyleri hala klinik öncesi test önemli bir rol oynasa da, ürün veya hipotezlerin erken evre testi son 10 yıl içinde değişti ve günümüzde genellikle küçük hayvan modellerinde 1 yapılır. Bu anahtar, çeşitli nedenlerle uygulandı. Üretimi ve fareler ve sıçanlar bakımı daha ucuz domuz, koyun ile karşılaştırılmaktadır. Buna ek olarak, küçük hayvanlar kronik deneyler büyük serilerin performansını kolaylaştırmak her ikisi de kısa üreme süreleri ve daha kısa normal iyileşme dönemleri var. Son olarak, gen hedefli hayvan ve özel antikorların mevcudiyeti kemik iyileşmesi moleküler mekanizmaların analizi sağlar. Daha önce büyük hayvan modellerinde osteosentez tekniklerinin kullanıldığı Bununla birlikte, asgari variat ile tercüme edilebilir<html> insan ya da veterinerlik klinik hasta bakım, küçük boyutlu sıçan ve farelerde gelişimi ve osteosentez tekniklerinin uygulanmasında kullanılan benzer prosedürlere iyon zor olduğu ortaya çıktı. İyi biyomekanik ortam anlamlı süreci 2 şifa kemik etkiler bilinmektedir. İnsanlarda kırık iyileşmesi bilindiği gibi, küçük hareketlerini daha az rijit fiksasyon sonra rijit fiksasyon ve endokondral kemikleşme sonra intramembranous kemikleşme de dahil olmak üzere şifa farklı modları, kırık stabilizasyonu sonucu farklılıklar. Tam eksenel veya dönel instabilite iyileşme süreci geciktirebilir veya non-birlikleri 3 neden olabilir. Dolayısıyla, farelerde ve sıçanlarda sofistike implant sistemleri ve osteosentez teknikleri geliştirmek için gerekli olduğunu hissediyorum. Bu şekilde, biyomekanik koşullar iyileşme sürecini analiz ederken geçerli sonuçlar garanti uygun standardize edilebilir. e_content &quot;&gt; son derece gelişmiş murin sabitleyici önemli bir bölümü, son birkaç yıl içinde ortaya olmasına karşın, en yaygın olarak kullanılan bir teknik yine de basit intramedüller pimdir. Bu tekniğin başlıca dezavantajı, dönme ve eksenel olmaması kararlılık 4.. rotasyonel ve eksenel istikrarı geliştirmek için, bir intramedüller vida farelerde 5 femur kırıkları stabilize etmek için kullanılmaya başlandı. Ancak, vida ile tespit dolayı kemik parçaları arasında temas ve sıkıştırma ihtiyacını kemik kusurlu iyileşmesini analiz etmek için kullanılamaz rotasyonel istikrarı korumak için sipariş. Çivi kilitleme intramedüller yüksek eksenel ve basit pin ve intramedüller vida 4 ile karşılaştırıldığında rotasyonel stabiliteyi sunuyor. Çünkü Gigli için kılavuzun mümkün bir yüksek tekrarlanabilir femur osteotomisi, gördüm ve tanımlanmış boşluk boyutları oluşturma yeteneği, hem normal hem de bon analizi için izin verire iyileşmesi ve kemik arızalı iyileşmesi 6. Nedeniyle birbirine pimlerin sokulması için, çivi kilitleme intramedüller tüm ağırlığını taşıyan bile, tüm iyileşme sürecinde sürekli bir boşluk boyutu garanti eder. Burada, tasarım ve intramedüller kilitleme çivi uygulaması hakkında rapor, hem de avantajları ve normal ve gecikmiş kemik iyileşmesi üzerine deneysel çalışmalarda dezavantajları olduğu gibi.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="476">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:187px;">MouseNail</td>
			<td style="width:179px;">RISystem AG</td>
			<td style="width:111px;">221,122</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">MouseNail aiming device</td>
			<td>RISystem AG</td>
			<td>221,201</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">MouseNail interlocking pin</td>
			<td>RISystem AG</td>
			<td>221,121</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Centering bit</td>
			<td>RISystem AG</td>
			<td>592,205</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Drill bit</td>
			<td>RISystem AG</td>
			<td>590,200</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Gigli wire saw</td>
			<td>RISystem AG</td>
			<td>590,100</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Suture (5-0 Prolene)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8614H</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Forceps</td>
			<td>Braun Aesculap AG &#38;CoKG&#160;</td>
			<td>BD520R</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Dressing forceps</td>
			<td>Braun Aesculap AG &#38;CoKG&#160;</td>
			<td>BJ009R</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Scissors</td>
			<td>Braun Aesculap AG &#38;CoKG&#160;</td>
			<td>BC100R</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Needle holder</td>
			<td>Braun Aesculap AG &#38;CoKG&#160;</td>
			<td>BM024R</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">24G needle</td>
			<td>BD Mircolance 3</td>
			<td>304100</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">27G needle</td>
			<td>Braun Melsungen AG</td>
			<td>9186182</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Scalpel blade size 15</td>
			<td>Braun Aesculap AG &#38;CoKG&#160;</td>
			<td>16600525</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Pincers</td>
			<td>Knipex</td>
			<td>7932125</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Heat radiator</td>
			<td>Sanitas</td>
			<td>605.25</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Depilatory cream</td>
			<td>Asid bonz GmbH</td>
			<td>&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; NDXZ10</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Eye lubricant</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>2182442</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Xylazine</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td align="right">1320422</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Ketamine</td>
			<td>Serumwerke Bernburg</td>
			<td align="right">7005294</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Tramadol</td>
			<td>Gr&#252;nenthal GmbH</td>
			<td align="right">2256241</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Disinfection solution (SoftaseptN)</td>
			<td>Braun Melsungen AG</td>
			<td align="right">8505018</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">CD-1 mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td align="right">22</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intramedullary locking nail for standardized fixation of femur osteotomies to analyze normal and defective bone healing in mice

Kemik iyileşmesi modelleri klinik kırık tedavisi için yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesine önem taşımaktadır. Bundan başka, fare modelleri, travma araştırmalarında kullanılan daha yaygın hale gelmektedir. Onlar kemik iyileşmesi çok farklılaşmış sürecin arkasındaki moleküler mekanizmaların analizi için mutant ve antikorların çok sayıda sunuyoruz. biyomekanik ortamı kontrol etmek için, standart ve iyi karakterize osteosentez teknikleri farelerde zorunludur. Burada, farelerde açık femur osteotomileri stabilize tasarım ve intramedüller çivi kullanımı ile ilgili rapor. Tıbbi kalite paslanmaz çelikten yapılmış çivi, yüksek eksenel ve dönme sertliği sağlar. ayrıca implant tanımlanan, sürekli osteotomi boşluğu yaratılması 0.00 mm 2.00 mm boyutları verir. 0.00 mm ve 0.25 mm boşluk boyutları ile femur osteotomi tırnak stabilizasyonu kilitleme intramedüller enkondral ve intramembranöz ossificat yoluyla yeterli kemik iyileşmesi sonucuiyon. atrofik olmayan birliğe 2.00 mm&#39;lik sonuçlarının bir boşluk boyutu ile femur osteotomi istikrar. Bu durumda, kemik iliği kilitleme tırnağı iyileşmesi ve olmayan iyileşme modellerinde kullanılabilir. Açık olan diğer kemik iyileşmesi modelleri ile karşılaştırıldığında tırnak kullanımının bir başka avantajı yeterince kemik bütünleşme sürecini incelemek için kemik yerine kullanılan ve iskeleler düzeltmek için imkanı vardır. intramedüller çivi kullanımı bir dezavantajı kapalı modellere kıyasla tüm açık prosedürlere doğasında daha invazif cerrahi işlemdir. Bir başka dezavantaj, ekstra-medular sabitleme işlemleri ile karşılaştırıldığında tüm intramedüller sabitleyici özgü intramedüler kavite bazı hasar indüksiyonu, olabilir.

cerrahi işlem için genel zaman yara kapanmadan yaklaşık 30 dakika cilt kesisi oldu. sağlanan cerrahi implantları kullanarak, cerrahi bir stereo-mikroskop olmadan yapılabilir. Ameliyat sonrası hayvanlar günlük olarak izlenmiştir. Hayvanların hiçbiri bu süre sonrası ağrı (seslendirme, huzursuzluk, hareketlilik olmaması, damat başarısızlık, anormal duruş ya da çevresi normal ilgi eksikliği) kanıt gösterdi çünkü post-operatif analjezi 3 gün sonra sona erdirildi. Hayvanlar ameliyattan sonra 2 gün içinde, normal ağırlık taşıyan gösterdi. Yara enfeksiyonu ya da ikincil kırıklar, tüm gözlem süresi boyunca gözlenmemiştir. Oluşabilir en önemli komplikasyonu diz eklemi (Şekil 3 A) kondillerin ile tırnak seviyesinin çıkıntı ile, kilitleme tırnağın yanlış implantasyonu olduğunu. Bu görülürlerbağlı olan nişan alma yanlış kullanımı ya da bağlı, özellikle 20 g altında vücut ağırlıkları ile farelerde çok küçük femur, bir hayvan kullanımına s. Başka bir komplikasyon bir kilitleme pimi (Şekil 3 B) çıkık olduğunu. Bu komplikasyon sırasında veya ameliyattan hemen sonra doğru implant yerleştirme radyolojik teyidi ile önlenebilir. Bu sorun, özellikle pimin eksik ekleme kaynaklanır. o birbirine işaretçilerine kaldırmak için zordu çünkü nihayet, deney sonunda kemik hasat birkaç kez engellenmiştir. Bu pim konumu etrafında köprü kemikli nedeniyle oldu. 5 hafta 0,25 mm osteotomi boşluğu tam iyileşme onaylandıktan sonra Radyolojik analiz eder. Bu zaman noktasında, periosteal kallus hemen hemen tamamen (Şekil 4A) remodeled. Bunun aksine, 2.00 mm bir boşluk ile stabilize femur, osteotomi iyileşmiş değildi. femora güvenilir gösterdi<html> n sendikasız oluşum atrofik. Bu aynı zamanda kemik iyileşmesi 10 hafta (Şekil 4 B) sonra teyit edildi. 0.25 mm osteotomi boşluk ile stabilizasyon sonrasında, histolojik analizler intramembranöz ve endokondral kemikleşme de dahil olmak üzere nasır oluşumu, ikincil kırık iyileşmesi tipik bir desen ortaya koydu. 5 hafta sonra, osteotomi tamamen kemik dokusu ile köprü oldu. Bu zaman noktasında, dokuma kemik önce yaprak yapılı kemik (Şekil 5 A) remodeled. 2.00 mm osteotomi boşluklar gözlem 10 hafta sonra atrofik olmayan birlik gösterdi aksine, femora stabilize. Bu osteotomi boşluğu içinde fibröz doku yüksek miktarda ile ilişkili bulunmuştur. Osteotomi hiçbiri kemik iyileşmesi ya da histolojik analiz edildiğinde köprüleme belirtileri (Şekil 5 B) gösterdi. 2 / 54472fig1.jpg &quot;/&gt; Şekil 1: İmplantlar. C. intrameduler tespit edilmiş bir yakın iplik (ok 4 mm uzunluk) ve kilitleme pimlerinin sokulması için iki delik (ok başları) ile (0.8 mm çapında, 15.7 mm uzunluğunda). Çivi mil (çift ok) uygulaması. B. Kilitleme pimi (0.3 mm çap, ok) dönme ve eksenel istikrarı sağlamak için bağlanır. Birbirine pimi de uygulanmasını kolaylaştırmak için bir şaft (çift ok) bağlanır. C. intramedüller çivi fare femur içine implantasyon sonrası. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54472/54472fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/54472/54472fig2.jpg" /> Şekil 2: tırnak implantasyonu Cerrahi aletler. C. sokulması için hedefleme cihazıTırnağın. B. 0.25 mm&#39;lik bir boşluk boyutu ile osteotomi oluşturulması için kullanılacak rehber gördüm. C. Matkap Ucu birbirine pimleri için delik delmek için. D. kilitleme pimi delikleri havşalama için matkap ucunu Merkezleme çivi, havşalama, delik delme ve birbirine pimlerin sokulması yerleştirilmesi için kullandı. E. El matkap. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54472/54472fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/54472/54472fig3.jpg" /> Şekil 3: Ameliyat sonrası grafileri. A. radyografi kondillerin düzeyinde diz eklemi içine çivi bir çıkıntı (ok) gösteren. B. radyografi proksimal Interloc tamamlanmamış bir ekleme gösterenking pimi (ok). Ölçek çubukları 4 mm temsil etmektedir. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/54472/54472fig4.jpg" /> Şekil 4: Kemik iyileşmesi 5 ve 10 hafta sonra radyografileri. Bir femur A. radyografik analizi yeterli kemik iyileşmesini gösteren, 5 hafta sonra 0,25 mm osteotomi boşluk ile stabilize. Bir femur B. radyografik analizi atrofik olmayan birlik gösteren, 10 hafta sonra bir 2.00 mm osteotomi boşluk ile stabilize. Ölçek çubukları 4 mm temsil etmektedir. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/54472/54472fig5.jpg" /> Şekil 5: kemik iyileşmesi 5 ve 10 hafta sonra histolojik bölümler. Bir femur A. histolojik analiz yeterli kemik iyileşmesini gösteren, 5 hafta sonra 0,25 mm osteotomi boşluk ile stabilize. Lamellar kemik neredeyse komple biçimlenme unutmayın. B. HistBir femur ological analizi atrofik olmayan birlik gösteren, 10 hafta sonra bir 2.00 mm osteotomi boşluk ile stabilize. osteotomi boşluğu fibröz doku unutmayın. Histolojik bölümler trikrom yöntemine göre boyandı. Ölçek çubukları 800 um temsil etmektedir. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/54472/54472fig6.jpg" /> Şekil 6: Kemik yerine implantasyonu farenin sağ femur segmental kemik defekti gösteren in vivo fotoğraf.. kusur, bir kemik yerine (ok) ile doldurulur. Kemik yerine yeterli konumlandırma ve sabitlenmesini sağlayan, çivi üzerine implante edilir.

Watch this Scientific Journal Video about An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice at JoVE.com

An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice

This protocol describes an osteosynthesis technique using an intramedullary locking nail for standardized fixation of femur osteotomies, which can be used to analyze normal and defective bone healing in mice.

Femur Osteotomiler standardize Sabitleme için bir intramedüller Kilitleme Nail Fare Normal ve Arızalı Kemik Şifa Analiz

Bone healing models are essential to the development of new therapeutic strategies for clinical fracture treatment. Furthermore, mouse models are becoming ...

an-intramedullary-locking-nail-for-standardized-fixation-femur

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

13.3K Görüntüleme.  Saarland University. This protocol describes an osteosynthesis technique using an intramedullary locking nail for standardized fixation of femur osteotomies, which can be used to analyze normal and defective bone healing in mice.

Video: An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules that regulate HSCs. In these transplant model systems, the function of HSCs is determined by the ability of these cells to engraft and reconstitute lethally irradiated recipient mice. Commonly, the donor cell contribution/engraftment is measured by antibodies to donor- specific cell surface proteins using flow cytometry. However, this method heavily depends on the specificity and the ability of the cell surface marker to differentiate donor-derived cells from recipient-originated cells, which may not be available for all mouse strains. Considering the various backgrounds of genetically modified mouse strains in the market, this cell surface/ flow cytometry-based method has significant limitations especially in mouse strains that lack well-defined surface markers to separate donor cells from congenic recipient cells. Here, we reported a PCR-based technique to determine donor cell engraftment/contribution in transplant recipient mice. We transplanted male donor bone marrow HSCs to lethally irradiated congenic female mice. Peripheral blood samples were collected at different time points post transplantation. Bone marrow samples were obtained at the end of the experiments. Genomic DNA was isolated and the Y chromosome specific gene, Zfy1, was amplified using quantitative Real time PCR. The engraftment of male donor-derived cells in the female recipient mice was calculated against standard curve with known percentage of male vs. female DNAs. Bcl2 was used as a reference gene to normalize the total DNA amount. Our data suggested that this approach reliably determines donor cell engraftment and provides a useful, yet simple method in measuring hematopoietic cell reconstitution in murine bone marrow transplantation models. Our method can be routinely performed in most laboratories because no costly equipment such as flow cytometry is required.

Determining donor cell engraftment presents a challenge in mouse bone marrow transplant models that lack well-defined phenotypical markers. We described a methodology to quantify male donor cell engraftment in female transplant recipient mice. This method can be used in all mouse strains for the study of HSC functions.

Rekabetçi bir mürin Kemik İliği Transplantasyon Modelinde Donör Hücre Aşı belirleme Kantitatif Gerçek-zamanlı PCR kullanarak

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Tıp

Lesion Explorer: A Video-guided, Standardized Protocol for Accurate and Reliable MRI-derived Volumetrics in Alzheimer's Disease and Normal Elderly

Obtaining in vivo human brain tissue volumetrics from MRI is often complicated by various technical and biological issues. These challenges are exacerbated when significant brain atrophy and age-related white matter changes (e.g. Leukoaraiosis) are present. Lesion Explorer (LE) is an accurate and reliable neuroimaging pipeline specifically developed to address such issues commonly observed on MRI of Alzheimer's disease and normal elderly. The pipeline is a complex set of semi-automatic procedures which has been previously validated in a series of internal and external reliability tests1,2. However, LE's accuracy and reliability is highly dependent on properly trained manual operators to execute commands, identify distinct anatomical landmarks, and manually edit/verify various computer-generated segmentation outputs.
LE can be divided into 3 main components, each requiring a set of commands and manual operations: 1) Brain-Sizer, 2) SABRE, and 3) Lesion-Seg. Brain-Sizer's manual operations involve editing of the automatic skull-stripped total intracranial vault (TIV) extraction mask, designation of ventricular cerebrospinal fluid (vCSF), and removal of subtentorial structures. The SABRE component requires checking of image alignment along the anterior and posterior commissure (ACPC) plane, and identification of several anatomical landmarks required for regional parcellation. Finally, the Lesion-Seg component involves manual checking of the automatic lesion segmentation of subcortical hyperintensities (SH) for false positive errors.
While on-site training of the LE pipeline is preferable, readily available visual teaching tools with interactive training images are a viable alternative. Developed to ensure a high degree of accuracy and reliability, the following is a step-by-step, video-guided, standardized protocol for LE's manual procedures.

Lesion Explorer (LE) is a semi-automatic, image-processing pipeline developed to obtain regional brain tissue and subcortical hyperintensity lesion volumetrics from structural MRI of Alzheimer's disease and normal elderly. To ensure a high level of accuracy and reliability, the following is a video-guided, standardized protocol for LE's manual procedures.

Lezyon Explorer: Doğru ve Güvenilir MR türetilmiş Alzheimer Hastalığı Volumetrics ve Normal Yaşlı Bir Video-güdümlü, Standart Protokol

Obtaining in vivo human brain tissue volumetrics from MRI is often complicated by various technical and biological issues. These challenges are ...

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there has been great clinical interest in improving bone healing by altering the mechanical environment through the fixation stability around the lesion. One constraint of preclinical animal research in this area is the lack of experimental control over the local mechanical environment within a large segmental defect as well as osteotomies as they heal. In this paper we report on the design and use of an external fixator to study the healing of large segmental bone defects or osteotomies. This device not only allows for controlled axial stiffness on the bone lesion as it heals, but it also enables the change of stiffness during the healing process in vivo. The conducted experiments have shown that the fixators were able to maintain a 5 mm femoral defect gap in rats in vivo during unrestricted cage activity for at least 8 weeks. Likewise, we observed no distortion or infections, including pin infections during the entire healing period. These results demonstrate that our newly developed external fixator was able to achieve reproducible and standardized stabilization, and the alteration of the mechanical environment of in vivo rat large bone defects and various size osteotomies. This confirms that the external fixation device is well suited for preclinical research investigations using a rat model in the field of bone regeneration and repair.

One constraint of preclinical research in the field of bone repair is the lack of experimental control over the local mechanical environment within a healing bone lesion. We report the design and use of an external fixator for bone repair with the ability to change fixator stiffness in vivo.

Ayarlanabilir Sertlik, Sıçan Femur Osteotomi ve Segmental Kemik Hata Modelleri için Eksternal Fiksatör

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in vivo optical and &#956;CT imaging allow the visualization of biological phenomena in an anatomical context. These imaging modalities may be especially useful to study conditions that impact bone. In particular, orthopaedic implant infections are an important problem in clinical orthopaedic surgery. These infections are difficult to treat because bacterial biofilms form on the foreign surgically implanted materials, leading to persistent inflammation, osteomyelitis and eventual osteolysis of the bone surrounding the implant, which ultimately results in implant loosening and failure. Here, a mouse model of an infected orthopaedic prosthetic implant was used that involved the surgical placement of a Kirschner-wire implant into an intramedullary canal in the femur in such a way that the end of the implant extended into the knee joint. In this model, LysEGFP mice, a mouse strain that has EGFP-fluorescent neutrophils, were employed in conjunction with a bioluminescent Staphylococcus aureus strain, which naturally emits light. The bacteria were inoculated into the knee joints of the mice prior to closing the surgical site. In vivo bioluminescent and fluorescent imaging was used to quantify the bacterial burden and neutrophil inflammatory response, respectively. In addition, &#956;CT imaging was performed on the same mice so that the 3D location of the bioluminescent and fluorescent optical signals could be co-registered with the anatomical &#956;CT images. To quantify the changes in the bone over time, the outer bone volume of the distal femurs were measured at specific time points using a semi-automated contour based segmentation process. Taken together, the combination of in vivo bioluminescent/fluorescent imaging with &#956;CT imaging may be especially useful for the noninvasive monitoring of the infection, inflammatory response and anatomical changes in bone over time.

Combined In vivo Optical and  &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Combined optical and &#956;CT imaging in a mouse model of orthopaedic implant infection, utilizing a bioluminescent engineered strain of Staphylococcus aureus, provided the capability to noninvasively and longitudinally monitor the dynamics of the bacterial infection, as well as the corresponding inflammatory response and anatomical changes in the bone.

Kombine<em&gt; In vivo</em&gt; Optik ve uCT Görüntüleme Farelerde bir Ortopedik İmplant Enfeksiyon Enfeksiyon, Enflamasyon ve Kemik Anatomisi Monitör

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in ...

Femoral Bone Marrow Aspiration in Live Mice

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed step-by-step technical procedure for an analogous procedure in live mice which allows for serial characterization of cells present in the BM. This procedure facilitates studies aimed to detect the presence of exogenously administered cells within the BM of mice as would be done in xenograft studies for instance. Moreover, this procedure allows for the retrieval and characterization of cells enriched in the BM such as hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) without sacrifice of mice. Given that the cellular composition of peripheral blood is not necessarily reflective of proportions and types of stem and progenitor cells present in the marrow, procedures which provide access to this compartment without requiring termination of the mice are very helpful. The use of femoral bone marrow aspiration is illustrated here for cytological analysis of marrow cells, flow cytometric characterization of the hematopoietic stem/progenitor compartment, and culture of sorted HSPCs obtained by femoral BM aspiration compared with conventional marrow harvest.

This protocol describes a procedure for serial sampling of femoral bone marrow (BM) without requiring the sacrifice of mice. This procedure facilitates longitudinal studies of the BM composition of mice over time and provides serial access to cells within the BM for ex vivo and transplantation studies.

Canlı Farelerde Femoral Kemik İliği Aspirasyon

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity is a commonly used model to study both acute lung injury and fibrosis, and multiple methods have been developed for administering bleomycin (and other toxic agents) into the lungs. However, many of these approaches, such as transtracheal instillation, have inherent drawbacks, including the need for strong anesthetics and survival surgery. This paper reports a quick, reproducible method of intratracheal intubation that involves mild inhaled anesthesia, visualization of the trachea, and the use of a surrogate spirometer to confirm exposure. As a proof of concept, 8-12 week old C57BL/6 mice were administered either 2.0 U/kg of bleomycin or an equivalent volume of PBS, and both damage and fibrotic endpoints were measured post-exposure. This procedure allows researchers to treat a large cohort of mice in a relatively short period with little expense and minimal post-procedure care.

This article presents a rapid and simple method for administering bleomycin directly into the mouse trachea via intubation. Key advantages of this method are that it is highly reproducible, easy to master, and does not require specialized equipment or lengthy recovery times.

Farelerde Trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the silicone compound, via a 26 G catheter, into the portal or hepatic vein. After silicone injection, organs were explanted and prepared for ex-vivo micro-CT (&#181;CT) scanning. The silicone injection procedure is technically challenging. Achieving a successful outcome requires extensive microsurgical experience from the surgeon. One of the challenges of this procedure involves determining the adequate perfusion rate for the silicone compound. The perfusion rate for the silicone compound needs to be defined based on the hemodynamic of the vascular system of interest. Inappropriate perfusion rate can lead to an incomplete perfusion, artificial dilation and rupturing of vascular trees.
The 3D reconstruction of the vascular system was based on CT scans and was achieved using preclinical software such as HepaVision. The quality of the reconstructed vascular tree was directly related to the quality of silicone perfusion. Subsequently computed vascular parameters indicative of vascular growth, such as total vascular volume, were calculated based on the vascular reconstructions. Contrasting the vascular tree with silicone allowed for subsequent histological work-up of the specimen after &#181;CT scanning. The specimen can be subjected to serial sectioning, histological analysis and whole slide scanning, and thereafter to 3D reconstruction of the vascular trees based on histological images. This is the prerequisite for the detection of molecular events and their distribution with respect to the vascular tree. This modified silicone injection procedure can also be used to visualize and reconstruct the vascular systems of other organs. This technique has the potential to be extensively applied to studies concerning vascular anatomy and growth in various animal and disease models.

Tools used for visualizing vascular regeneration require methods for contrasting the vascular trees. This film demonstrated a delicate injection technique used to achieve optimal contrasting of the vascular trees and illustrate the potential benefits resulting from a detailed analysis of the resulting specimen using &#181;CT and histological serial sections.

Normal Farelerde% 70 hepatektomi sonrası Vasküler ve Parankimal Rejenerasyon görselleştirme

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

In Vivo Evaluation of Fracture Callus Development During Bone Healing in Mice Using an MRI-compatible Osteosynthesis Device for the Mouse Femur

Endochondral fracture healing is a complex process involving the development of fibrous, cartilaginous, and osseous tissue in the fracture callus. The amount of the different tissues in the callus provides important information on the fracture healing progress. Available in vivo techniques to longitudinally monitor the callus tissue development in preclinical fracture-healing studies using small animals include digital radiography and &#181;CT imaging. However, both techniques are only able to distinguish between mineralized and non-mineralized tissue. Consequently, it is impossible to discriminate cartilage from fibrous tissue. In contrast, magnetic resonance imaging (MRI) visualizes anatomical structures based on their water content and might therefore be able to noninvasively identify soft tissue and cartilage in the fracture callus. Here, we report the use of an MRI-compatible external fixator for the mouse femur to allow MRI scans during bone regeneration in mice. The experiments demonstrated that the fixator and a custom-made mounting device allow repetitive MRI scans, thus enabling longitudinal analysis of fracture-callus tissue development.

In Vivo Evaluation of Fracture Callus Development During Bone Healing in Mice Using an MRI-compatible Osteosynthesis Device for the Mouse Femur

The evaluation of tissue development in the fracture callus during endochondral bone healing is essential to monitor the healing process. Here, we report the use of a magnetic resonance imaging (MRI)-compatible external fixator for the mouse femur to allow MRI scans during bone regeneration in mice.

Vivo Fare uyluk için bir MRI uyumlu Osteosentez aygıtı kullanma farelerde kemik iyileşme sırasında kırık Kallus gelişimi değerlendirme

Endochondral fracture healing is a complex process involving the development of fibrous, cartilaginous, and osseous tissue in the fracture callus. The ...

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an increased use of mouse models in orthopedic research was noted, most probably because mouse models offer a large number of genetically-modified strains and special antibodies for the analysis of molecular mechanisms of fracture healing. To control the biomechanical conditions, well-characterized osteosynthesis techniques are mandatory, also in mice. Here, we report on the design and use of a closed bone healing model to stabilize femur fractures in mice. The intramedullary screw, made of medical-grade stainless steel, provides through fracture compression an axial and rotational stability compared to the mostly used simple intramedullary pins, which show a complete lack of axial and rotational stability. The stability achieved by the intramedullary screw allows the analysis of endochondral healing. A large amount of callus tissue, received after stabilization with the screw, offers ideal conditions to harvest tissue for biochemical and molecular analyses. A further advantage of the use of the screw is the fact that the screw can be inserted into the femur with a minimally invasive technique without inducing damage to the soft tissue. In conclusion, the screw is a unique implant that can ideally be used in closed fracture healing models offering standardized biomechanical conditions.

This protocol describes a minimally invasive osteosynthesis technique using an intramedullary screw for standardized stabilization of femur fractures, which can be used to analyze endochondral bone healing in mice.

Endochondral standart biyomekanik koşullar altında farelerde şifa kırık çözümlemek için minimal invaziv bir Model

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...