Funding for this project was provided by the National Health and Medical Research Council (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) and Melbourne Neuroscience Institute Fellowship (CTN).

Tüm deney prosedürleri Avustralya&#39;da Ulusal Sağlık ve Tıbbi Araştırma Konseyi tarafından belirlenen Bakım ve Bilimsel Amaçlarla Hayvanların Kullanım Uygulama Avustralya Kanunu göre yapılmıştır. Etik boşluk Melbourne Üniversitesi, Fen Fakültesi, Hayvan Etik Komitesi (Onay numarası 0.911.322,1) elde edilmiştir. Kronik VEP Elektrotların 1. Ön-implantasyon Not: eşzamanlı ERG ve VEP sinyallerinin ameliyatla VEP implante edilmesi gereken hayvanların en az 1 hafta koleksiyonu sinyal önce elektrotlar toplanacak edin. <ol><li> klorheksidin (% 70 etanol içinde% 0.5) ile temizlenerek önce deney cerrahi tezgah sterilize edin. Kullanmadan önce tüm cerrahi ekipman Otoklav. steril bir cerrahi örtü ile hayvan örtün. Tüm Deneyciler cerrahi maske, önlük ve sterilize eldiven giymek emin olun. </li><li> 3 L / dakikalık bir akış oranında O2 ile% 3.5 izofluran - 3 anestezi neden. ane korumakameliyat boyunca% 1.5 ve 2 L / dakika sthesia. pençe tutam refleksinin yokluğu ile anestezi yeterli derinlik sağlamak. </li><li> gözlerin kurumasını önlemek için kornea% 1 karboksimetilselüloz sodyum uygulanır. </li><li> Gözleri, alnının üzerine posterior 30 mm x 30 mm alanı Tıraş ve kulaklara ön. </li><li> vücut ısısını korumak ve bir stereotaksik çerçeve ile hayvanların başını stabilize etmek için bir ısı yastığı (37 ˚C) hayvan koyun. </li><li> % 10 povidon-iyot üç kez traş bölgeyi dezenfekte edin. Uygulama Standardı ile uyumlu olmak, gözün yakın bölge için alkol bazlı antiseptik kullanmaktan kaçının Cerrahi Teknologları Derneği tarafından yola çıktı. </li><li> kranial kemik açığa çıkarmak için bir neşter ile ve dermal doku bu tüketim a ~ 20 mm çaplı daire gelen kafasına bir medyan sagital kesi olun. </li><li> kazıma ve koronal ve sagital kafatası sütür ortaya çıkarmak için gazlı bez ile kurutularak yatan periosta çıkarın. </li><li> Bize7 mm kaudal bregma, orta hatta 3 mm yanal: stereotaksik koordinatlar her iki hemisferde üzerinde kafatası yoluyla iki delik (0.7 mm çap, derinlik ~ 1 mm) Trepan, bir matkap bağlı bir diş çapak ing. </li><li> Paslanmaz çelik vida Vida (çap 0.7 mm, klorheksidin sterilize uzunluk 3 mm) yaklaşık 1 mm (maruz vidanın 2 mm) derinliğe kadar, iki önceden hazırlanmış deliklere sıkı demirleme izin vermek. Altta yatan kortikal doku zarar vermeden bu kişiler dura. </li><li> ~ 4 ve 8 saat 0 sütür - gazlı bez ile kranial kemik kurutma ve iki 3 gevşek cilt geri çekilerek diş amalgam cerrahi zemin hazırlayın. </li><li> yerine (adım 1.10 açıklanan paslanmaz çelik vidalar) vida elektrotlar güvenli maruz kafatası üzerinde diş amalgam yayıldı. ~ Vida 1,5 mm kayıt için maruz kalır emin olun. </li><li> Geri çekme dikişlerle çıkarın. </li><li> analjezi ve tuzlu su (sodyum klorür,% 0.9, 1, 0.5,% karprofen deri altından (5 mg / kg) enjektesıvı replasmanı için 0,5 ml) deri altından. </li><li> Hayvan ayrı kafeslerde kurtarmak için izin verin. sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar sahipsiz hayvan bırakmayın. </li><li> tamamen cerrahi (en az 5 gün) kurtarıldı kadar diğer hayvanların şirkete hayvan iade etmeyin. </li><li> 4 gün için% 0.5, günde bir kez analjezi için karprofen deri altından (5 mg / kg) tatbik devam edin. </li><li> Kayıt ERG ve VEP cerrahisi sonrası 1 hafta. </li></ol> 2. ERG ve VEP Kayıt <ol><li> Veri toplama hazırlığı <ol><li> Aynı anda uyaran tetiklemek ve aşağıda tavsiye edilen ayarlara göre verileri 2 elde etmek için bilgisayar yazılımını kullanın. <ol><li> Sinyaller 3 yükseltmek (ERG: 1.000, VEP ×: x10,000) içten izole bir ön amplifikatör ve amplifikatör tarafından belirlenen kazanç ve empedans açısından eşleştirilmiş iki gözü. </li><li> Bir 650 üzerinde 4 kHz ERG için ayarlayın örnekleme oranımsn kayıt penceresi (2560 puan) Bunu yapmak için, &quot;500 ms&quot; Örnekler için &quot;2.560&quot; i seçin ve (isim ve Malzeme yazılım bkz Tablo sürümü için) veri toplama yazılımı &quot;zaman tabanı&quot; sekmesini tıklayın bir süre için 650 msn kayıt penceresi dönecektir hangi. <ol><li> 250 milisaniye çağ boyunca 10 kHz VEP için örnekleme oranını ayarlamak için aynı yöntemi kullanın. hem ERG ve VEP kayıtları için 10 msn öncesi uyaran taban çizgisini izin verin. Bunu yapmak için, &quot;Kur&quot; sekmesine tıklayın; Yeni bir diyalog penceresini açın &quot;Stimülatörü&quot; seçeneğini seçin; Bu pencerede &quot;Mode&quot; için açılır listeden &quot;darbe&quot; seçeneğini seçin; ve &quot;10 ms&quot; için &quot;gecikme&quot; için değerini ayarlayın. </li></ol></li><li> 1000 Hz (- - 3 dB) 0.3 filtreleme Set ERG bant geçiren. Bu veri toplama yazılımı &quot;Bio Amplifikatör&quot; tıklayarak yapılır. Sonra, &quot;0.3Hz&quot; &quot;Yüksek Pass&quot; değeri ve &quot;düşük geçiş&quot; için &quot;1 kHz için değerini ayarlayın&quot;. </li><li> 100 Hz - (- 3 dB) Vizyon (ISCEV) Klinik Elektrofizyoloji Uluslararası Derneği tarafından önerilen insan VEP kayıtları 6 2.1.1.3&#39;de yukarıda belirtilen yöntemi kullanarak, 0.1 ile VEP bant geçiren ayarlarını. </li></ol></li></ol></li><li> elektrot hazırlığı <ol><li> Sırasıyla 2, bir elektrot kurşun gümüş tel ya da bir timsah klibi takarak ERG aktif / pasif ve VEP aktif / pasif elektrotlar özel yapmak. Ticari olarak toprak elektrot edinin. </li><li> 4 ısmarlama elektrotlar için elektrot kurşun uzantısından erkek ucunu kesti. İç tel sağlayan bir neşter bıçak hasarlı olup dış politetrafluoroetilen yalıtım kaplama 1 cm kaldırın. </li><li> Ön moda sıçan göz kuşatmak için çapında bir döngü ~ 8 mm gümüş tel (0.3 mm kalınlığında) bir 70 mm uzunluk kesme ve şekillendirme ile ERG inaktif elektrotlar. 1 ml pipet ucu ile ilgili döngü şekillendirilmesiyle tek tip bir daire hazırlayın. </li><li&gt; gümüş 70 mm uzunluk kesme ve sıçan kesici üzerine kanca uzunluğu-bilge çapında bir elips ~ 8 mm oluşturarak Öncesi moda VEP inaktif elektrotlar. </li><li> Ön moda gümüş tel 30 mm uzunluk kesme ve yavaşça sıçan kornea temas için küçük bir döngü oluşturarak ERG aktif elektrotlar (~ çapı 1-2 mm) </li><li> Güvenli maruz iç tel ile gümüş entwining ile (2 2 ERG inaktif aktif ERG, 1 VEP inaktif) elektrot kurşun elektrotlar ekleyin. </li><li> fotovoltaik eserler azaltmak için maskeleme bandı ile aşırı maruz metal izole. </li><li> ERG inaktif elektrotlar kanca ve halka raptiye küçük bir parça sopa üzerinde (~ 20 mm x 5 mm) maskeleme bandı ile kemirgen boyun askısı kararlı eki sağlamaktır. </li><li> elektrodun iç teline timsah klibi takın VEP aktif elektrotlar yapmak açar. </li><li> Önceki kayıtları, gümüş tellerin açıkta kalan yüzeyleri (yani, inaktif halka ve acti electroplateSinyal iletimi geliştirmek için 20 saniye boyunca bir 9 V DC kaynağı kullanılarak klorür ile ucu) A.Ş.. <ol><li> Bunu yapmak için, normal tuzlu su içinde (birincil hücre anot olarak hareket eden) ERG elektrot teli gümüş ucu bırakın; 9 V pil pozitif terminaline bu elektrot teli diğer ucunu. </li><li> akünün eksi kutbuna başka kabloyu (katot) bağlayın, ve aynı zamanda tuzlu su içine diğer ucunu batırmayın. 20 saniye sonra çıkarın ve beyaz renkte eşit kaplanacak ERG elektrot teli şerit ucunu görüyoruz. Not: klorür kaplama açıklığını sağlamak için (~ kadar 8 saat kadar) Her bir deneysel oturumda için yeni ERG elektrotlar hazırlayın. </li></ol></li></ol></li><li> Hayvan hazırlanması <ol><li> Bir ışık geçirmez bir odaya önceki kayıtları hayvanları gecede (≥ 8 saat) Koyu adapte. , Oda ışıkları kapatarak tüm kapıları ve güneşlikler kapatarak maksimum karanlık adaptasyonu sağlamak. etrafında ışık geçirmez malzemeler koyarak ışık sızıntısını en aza indirmekkalın siyah perdeler dışında kapı / pencere ve yerleştirme bilgisayar ekranları kavşaklar. </li><li> Loş kırmızı ışık yayan diyot yardımıyla karanlık bir odada hayvan hazırlık yapmak (LED, 17.4 cd.m -2, λ max = 600 nm) çubuk hassasiyeti sürdürmek için. </li><li> kas içinden (5 mg / kg 60) ketamin / ksilazin enjeksiyonu ile sıçan anestezisi. Bir pençe tutam refleksinin yokluğu ile anestezi yeterli derinliği onaylayın. </li><li> , Sedasyon muhafaza gerektiğinde 50 dakika sonra anestezi bir başka doz (başlangıç ​​dozunun% 50) idare etmek. </li><li> Ek topikal anestezi için her göze% 0.5 Proxymetacaine bir damla uygulamak ve fazla sıvıyı kapalı yanıp söner. </li><li> öğrenci dilatasyon daha sonra, her bir göze% 0.5 tropikamid bir damla uygulamak aşırı sıvı kapalı kuru. </li></ol></li><li> ERG ve VEP elektrot konumlandırma <ol><li> Faraday kafesi bulunan Ganzfeld kase önünde ERG platformunda hayvan yerleştirin. bu c gibi bir elektrikli ısıtma yastığı kullanmaktan kaçınınBir elektrofizyolojik kayıtlar, elektrik gürültüsü tanıtmak. Not: Platform vücut ısısını korumak için bir devridaim ısıtılmış su platformuna eklenir. </li><li> ense etrafında sıkıca sıkı değil yerleştirilmiş kanca ve halka raptiye bir şerit ile platforma güvenli bir hayvan. </li><li> anestezi sıçan alt kesici etrafında inaktif VEP elektrot kanca. </li><li> Gözün ekvator çevresinde non-invaziv skleral halka çevreleyen ile ERG inaktif elektrotlar yerleştirin. ense civarında kanca ve halka raptiye şeridine elektrotlar takarak bu stabilize. kontralateral göz için tekrarlayın. </li><li> Sabitleyin VEP paslanmaz çelik vidalı kafatası önceden implante için timsah klipleri ekleyerek aktif elektrotlar. </li><li> Sinyal kalitesini artırmak için önce ERG aktif elektrodun yerleştirme kornea üzerinde% 1 karboksimetilselüloz sodyum küçük bir damla yerleştirin. Not: viskon sıvısı ayrıca mini deney boyunca kornea hidrasyon korumak yardımcı olurkemirgenler 7 kuruma tipi katarakt oluşumunu rımızı azamiye. </li><li> VEP inaktif elektrot teması artırmak için alt ön dişlerin% 1 karboksimetilselüloz sodyum küçük bir damla koyun ve böylece kaliteyi işaret etmektedir. </li><li> hafif özel bir dahili stereotaksik kol bağlı bir mikromanipülatör kullanarak santral kornea yüzeyine dokunmak ERG aktif elektrotlar yerleştirin. </li><li> subkutan kuyruk içine toprak iğne elektrot (paslanmaz çelik) 5 mm - 2 yerleştirin. </li><li> Gerekirse alt göz kapağında önceden sinyal kalitesini artırmak için kayıt için herhangi bir aşırı sıvı kurutun. </li><li> yakın hayvanın gözleri, her iki retina bile aydınlatılmasını sağlamak için kase açılması ile uyum sağlanması Ganzfeld kaseye slayt platformu (adım 2.4.1 bakınız). </li><li> dıştan gelen sesleri azaltmak için Faraday kafesi kapatın. </li></ol></li><li> Veri koleksiyonu <ol><li> Elektrot Yerleşi olmadığını değerlendirmek için - (0.52 log cd.sm -2) loş bir test flaş kullanmakent 2 tatmin edicidir. Kontrol koşulları altında, bu ~ 800 uV bir ERG genlik ve 10&#39;dan büyük olmayan,% arası bir göz değişkenlik olmasına neden olur. Gerekli repozisyon elektrotlar edin. </li><li> Test flaş aşağıdaki hayvanların kayıttan önce tam karanlıkta 10 dakika süreyle koyu adapte sağlar. </li><li> ERG ve VEP&#39;in toplarken bir Ganzfeld kase kullanarak ışık uyaranların mevcut yanıp söner ~ 500 msn zaman penceresi üzerinden aynı anda sinyal gönderir. sönük gelen İlerleme belirli dalga formları için yeterli koyu uyumlarını sağlamak amacıyla ışık düzeylerini daha parlak. </li><li> STR, B-dalga ve ERG a / b-dalgası dalga biçimleri ortaya çıkarmak için aydınlık enerjilerin aralığında sinyalleri toplamak. parlak ışıklı enerjilerin (1 tekrar) de kısık ışık seviyelerinde (20 tekrarlar) ve daha az ortalama daha sinyaller. Yavaş yavaş 1 dimmest gelen parlak ışık seviyesine 180 sn arası uyaran aralığı uzatmak. Bir örnek protokolü için Tablo 1&#39;e bakınız. </li><li> iso içinGeç ERG çubuk ve koni yanıtları, bir eşleştirilmiş-flaş paradigma 8 kullanmaktadır. 1.52 log cd.sm dört yanıp başlatmak -2-arasında 500 milisaniye arası uyaran aralığı 2 ile. Dijital varsayılan çubuk yanıtı elde etmek için karışık dalga (1. flaş) için koni dalga formu (3. veya 4. flaş) çıkarın. </li><li> Parlak ışıklı enerjilerde VEP sinyalleri, ortalama 20 tekrarlar kaydetmek için (yani, - 0,52 log cd.sm -2, 5 sn arası uyaran aralığı 1,52). Bu dizideki ilk flaş geleneksel koyu adapte ERG tepki verdiğini unutmayın. </li><li> (20) VEP aydınlık enerjiye bağlı olarak, bir sonraki daha parlak ERG aşamasından önce süpürür sonra yeniden uyarlanması için 3 dakika - 1 izin verin. </li><li> Veri toplama işlemi tamamlandıktan sonra, pentobarbital sodyum (325 mg / ml, 3 mi) intrakardiyak enjeksiyonu ile, anestezi verilen hayvanın euthanize. </li></ol></li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-ile-next.within sayfa = &quot;always&quot;&gt; <tbody><tr><td> Dalga şekli </td><td> Uyarıcı ışık enerjisi (cd.sm log -2) </td><td> Tekrar sayısı </td><td> interstimulus aralığı (sn) </td></tr><tr><td> STR </td><td> -6,24 </td><td> 20 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> STR </td><td> -5,93 </td><td> 20 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> STR </td><td> -5.6 </td><td> 20 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> STR </td><td> -5,33 </td><td> 20 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -4,99 </td><td> 10 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -4,55 </td><td> 10 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -4,06 </td><td> 5 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -3,51 </td><td> 5 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -3,03 </td><td> 1 </td><td> 15 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -2.6 </td><td> 1 </td><td> 15 </td></tr><tr><td> Çubuk b-dalgası </td><td> -1,98 </td><td> 1 </td><td> 15 </td></tr><tr><td> Karışık a- / b-dalgası </td><td> -1,38 </td><td> 1 </td><td> 30 </td></tr><tr><td> Karışık a- / b-dalgası </td><td> -0,94 </td><td> 1 </td><td> 30 </td></tr><tr><td rowspan="2"> Flaş 1: 20 Karma a- / b-dalgası Ortalama: VEP </td><td rowspan="2"> -0,52 </td><td rowspan="2"> 20 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> (Bir sonraki önce 90 sn) </td></tr><tr><td rowspan="2"> Flaş 1: 20 Karma a- / b-dalgası Ortalama: VEP </td><td rowspan="2"> 0.04 </td><td rowspan="2"> 20 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> (Bir sonraki önce 120 sn) </td></tr><tr><td rowspan="2"> Flaş 1: 20 Karma a- / b-dalgası Ortalama: VEP </td><td rowspan="2"> 0.58 </td><td rowspan="2"> 20 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> (Bir sonraki önce 180 sn) </td></tr><tr><td rowspan="2"> Flash 1: 20 Karma a- / b-dalgası Ortalama: VEP </td><td rowspan="2"> 1.2 </td><td rowspan="2"> 20 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> (Bir sonraki önce 180 sn) </td></tr><tr><td rowspan="2"> Flaş 1: 20 Karma a- / b-dalgası Ortalama: VEP </td><td rowspan="2"> 1.52 </td><td rowspan="2"> 20 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> (Bir sonraki önce 180 sn) </td></tr><tr><td> Koni a- / b-dalgası </td><td> 1.52 </td><td> 4 </td><td> 0.5 </td></tr></tbody></table> Stimulus Enerji bir Aralığı Kullanarak Tablo 1. ERG ve VEP Kayıt Protokolü. Yeterli arası uyaran aralığı ile parlak (alt) yanıp söner, loş (üstte) den Uyarıcı sunumları ilerleme karanlık adaptasyonu sağlamak. Protokolün sonunda, kısa aralıklarla dört flaş tekrarlama koni aracılı yanıtı ortaya çıkarmak amacıyla sunulmuştur. ERG Dalga 3. Analizi Not: ERG ve VEP analizi daha önce detaylı bir şekilde tarif edilmiştir 3,9,10.Aşağıdaki bölümlerde kısa bir bakış sağlar. <ol><li> Veri analizi için bir elektronik tablo yazılımı dijital voltaj zaman biçiminde ihracat işaretleri. </li><li> Çubuk photoreceptoral fonksiyonu <ol><li> Gecikmiş bir Gauss (Eşitlik 1) 11 ile dalga PIII ön kenarını Model. PIII (i t) = Rm PIII ∙ [1 - exp (- ı, S (t ∙ - td) 2)] t&gt; T D (Denklem 1) </li><li> İki parlak parlak enerjilerin bir topluluk üzerinde 12,13 (yani, 1.22 ve 1.52 log cd.sm -2) uygun optimize edin. </li><li> A-dalga genliği% 90 Model yukarı sonrası receptoral müdahalelerine 14 önlemek için. Not: Model photoreceptoral yanıt doymuş genliği (Rm PIII, mV), duyarlılık (S m 2 .cd -1 .s -3) ve gecikme (t d, msn) döndürür. </li></ol></li><li> Çubuk bipolar hücre fonksiyonuiyon <ol><li> Dijital örten salınım potansiyelleri ile karışık PII dönmek karışık dalga formlarından PIII modeli (yukarıya bakınız) çıkarın. </li><li> Karışık PII gelen çubuk PII ayıklamak için, dijital karışık PII gelen koni yanıtı (3. ya da 1.52 log cd.sm de 4. flaş -2) çıkarma (1.52 log cd.sm 1 st flaş -2). </li><li> Ardından, salınım potansiyelleri kaldırmak için dalga (46.9 Hz, -3 dB, Blackman pencere) bir low-pass filtre uygulamak. Kalan dalga çubuk PII yanıtı 10&#39;dur. </li><li> Çubuk PII tepe genliği Özü ve 10 (1.52 log cd.sm -2 az -2 log cd.sm -2 ve çubuk izole PII altında) tüm uyaran şiddetleri karşı komplo. </li><li> iç retinal hücre bütünlüğünün bir ölçü sağlayan bir hiperbolik fonksiyonu (Denklem 2) kullanarak bu verileri Model. V (I) &#39;in V max = (i n / (i n+ K n)) (Denklem 2) Not: Bu denklem maksimal PII yanıtı (V max, mV), 1 / duyarlılık döner ve fonksiyonu (n) 15 eğimi (k, cd.sm-2 log). </li></ol></li><li> Koni bipolar hücre fonksiyonu Not: koni yanıtı tek bir yoğunlukta alınır gibi (1.52 log cd.sm -2) genlik ve zamanlama bu ışık seviyesinde döndürülür. <ol><li> Maksimal koni PII yanıtı 2,16 ayıklayın. </li><li> Bu maksimal yanıt 2,16 karşılık gelen örtülü zaman ayıklayın. </li></ol></li><li> Ganglion hücre fonksiyonu <ol><li> STR küçük bir sinyal olarak, yüksek frekans ve hat gürültüsünü ortadan kaldırmak için Dalga formu 50 Hz çentik ile bir alçak geçiren filtre uygulamak (46.9 Hz, -3 dB, Blackman pencere). </li><li> Maksimal pSTR yanıtı 3,17 ayıklayın. </li><li> Bu maksimal yanıt 3,17 karşılık gelen örtülü zaman ayıklayın. </li></ol></li></ol> 4. AnaVEP Dalga lizizi <ol><li> VEP (P1, N1 ve P2) maksimum ve minimum bileşenlerinin ekstre edilmesi. Detay için başvurular 3,6 bakın. </li><li> Onların önceki zirve ya da çukur (P1N1 ve N1P2) 3,6 den oluk-tepe genlikleri olarak Ekspres genlikleri. </li><li> Örtülü zaman (o) Ayıklama hangi bu maksimal yanıt karşılık gelir (P1 o N1 o, P2) 3,6. </li></ol>

<ol>
	<li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function.">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li><li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+electroretinography:+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses.">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li><li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function.">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li><li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination.">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li><li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation.">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li><li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+evoked+potentials+standard+(2004).">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li><li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice.">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li><li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms.">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li><li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina.">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467 (2013).</li><li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function.">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li><li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography.">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li><li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging,+progression+with+disease,+and+test-retest+variability.">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li><li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+(Cavia+porcellus).">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li><li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque.">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li><li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data.">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li><li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats.">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li><li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram.">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li><li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness.">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li><li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death:+Alzheimer's+disease+and+Parkinson's+disease.">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li><li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference:+A+missing+link+between+Alzheimer's+disease+and+glaucoma.">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li><li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-,+parvo-,+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma.">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li><li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients.">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li><li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury.">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li><li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+(Cavia+porcellus).">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, 98-100 (1998).</li><li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia:+isoform+expression,+activation+and+effects+on+function.">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li><li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram.">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li><li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram.">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li><li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials.">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li><li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats.">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172 (2013).</li><li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats.">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li></ol>

The authors have no disclosures relevant to this work.

ERG ve VEP sırasıyla, retina ve korteks, görsel fonksiyonun objektif önlemlerdir. Eş zamanlı kayıt avantajı tüm görsel yolunun daha kapsamlı bir görünüm elde olmasıdır. Özellikle, onların eş zamanlı değerlendirmesinden tamamlayıcı bilgiler, örneğin optik nöropati birincil serebral atrofi 19 ile birlikte var olabilir, ERG henüz belirgin VEP 18 tezahürleri örtüşen bozukluklar için (görsel yolunda yaralanma bölgesinde daha net bir sınırlandırılmasını sağlayabilir, 20 veya VEP kaybı) görsel yolunda 21,22 çeşitli yerlerde yaralanma tezahürü ile şaşırmış olabilir zaman. eş zamanlı olarak ERG ve VEP&#39;in ölçerek, retina ve kortikal yanıt arasındaki kazanç bir indeks de elde edilebilir. Bu ince patolojik değişiklikleri belirlemek için yararlı bir araç sağlayabilir. Geçerli protokol yaygın olarak kullanılan laboratuvar sıçanlarda ERG ve VEP ölçümü için izin verir ama kolayca reklam olabilirDiğer memeli türlerine 23-25 ​​Apted&#39;in. Kemirgenler ERG ve VEP dalga insan gözü 26-28 gözlenen tepkiler için makul bir preklinik vekil sağlar. Belirli bir uyarıcı protokolü tasarlayarak, hem ERG ve VEP yanıtı tek bir kayıt oturumu sırasında elde edilebilir. Tablo 1 ardışık yanıp söner arasındaki iyileşme süresi uygun dikkate alınarak ışık seviyelerinde bir ilerleme göstermektedir. ksilizin: Bu protokol, sinyal-gürültü karakteristikleri maksimize etmek ve ketamin tek doz tarafından sağlanan anestezi pencere içinde kayıt süresini sınırlamak için ihtiyaç arasında bir denge sağlar. Bu nedenle, bu teknik, temel fizyoloji ve hastalık ile ilgili araştırma için görme fonksiyonunda bir amacı niceliksel ölçümü için yararlı olabilecektir. görme sisteminin kapsamlı bir değerlendirme eşzamanlı bilateral retina yanıtları ve görsel uyarılmış kortikal cevapları değerlendirerek elde edilebilir. Ancak, her teknik ayrıca izolasyon yapılan ve prosedürü kolaylaştırmak yerine binoküler bir monocularly edilebilir. Geçerli protokol sıçanlar bir çubuk-egemen retina sahip olduğu göz önüne alındığında çubuk yolu izole etmek için seçilmiş scotopic ERG ve VEP sinyalleri açıklar. Işık uyarlanmış cevaplar çalışmaya büyük ilgi ise, bir arka plan ışığı öncesi adaptasyon tarafından Fotopik ERG ve VEP sinyallerinin yapmak da mümkündür. Bu tekniğin bir önemli sınırlama kararlı elektrot yerleştirme etkinleştirmek için anestezi şartlar altında prosedürü yapılması ihtiyacıdır. Bununla birlikte, bu yaklaşım, ince işleme değişikliklerin saptanmasını sağlayan güçlü bir sinyal-gürültü özellikleri sağlar. Nedeniyle STR ve hafif adaptasyon duyarlılığı küçük genlik, birkaç adım yakından bu yanıtın başarılı kaydedilmesini sağlamak için uyulması gerekmektedir. Birincisi, yeterli karanlık adaptasyonu içeren, uygulanması gereken0.52 log cd - loş bir test flaş (10 dk için aşağıdaki gecede koyu loş kırmızı ışık altında adaptasyon (≥ 8 saat), elektrot yerleştirme (17.4 cd.m -2, λ max = 600 nm) ve yeniden karanlık adaptasyonu. SM-2). Ayrıca, STR sinyal-gürültü karakteristikleri birden fazla sinyal üzerinden ortalama geliştirilebilir (örneğin, 20 sinyalleri) kısa arası uyaran aralıklarla (yani 2 sn) ile toplanmıştır. Gözleri ve korteks hem de bu kapsamlı değerlendirme avantajlarından biri kontralateral kayıt 3 karşılaştırma sağlamaktır. Böyle, özellikle bakım elektrot yapımında (yani, aynı büyüklükte ve şekilli elektrotlar) alınması gerektiği gibi, minimal arası göz ve inter-kortikal değişkenliği sağlamak. Görsel yolunun ve hastalıkla ilgili süreçlerin in vivo önlemler sağlamak için hem ERG ve VEP tekniklerinin geniş kullanım göz önüne alındığında, diğer yolu özgü p harmanlamak için yararlı olacaktırrotocols (örneğin, ON / OFF veya koni alt türü özgü) ve klinik tanılar bu tekniğin uygulama genişletmek için farklı uyaran yöntemleri (örneğin, titreşimsiz, desen, testere dişi) ile eş zamanlı ERG / VEP kayıtları gerçekleştirin. Gelecekte bu uygulamanın başka mantıklı bir adım da nöral fizyolojisi 30 anestezik etkileri önlemek için hayvanların serbestçe hareket eden, bilinçli 29&#39;dan eş zamanlı olarak ERG ve VEP&#39;in kayıt olacaktır.

elektroretinogram (ERG) ve görsel uyarılmış potansiyel (VEP) ölçümü görsel yolunun bütünlüğü yararlı kantitatif değerlendirmeler sağlar. VEP aynı ışık olayı aşağıdaki birincil görsel kortekse retinadan görme yolları gelen fonksiyonel bütünlüğünü ölçer ERG, ışık uyarımı retinanın elektrik tepkilerini ölçer. Bu yazıda yaygın olarak kullanılan bir laboratuar modellerinde sıçan kayıt ve ERG ve VEP cevapların analizi için bir protokol açıklamaktadır. ERG bir ışık yanıp sönmeye retinanın brüt elektrik tepkisini miktarının tarafından anahtar retinal hücre sınıfları bir dizi fonksiyonel bütünlüğünün bir dizin sağlar. iyonik akıların koordineli dizi ışık başlangıçlı tarafından başlatılan ve ofset, gözün dışına yerleştirilen yüzey elektrotlar kullanılarak ölçülebilir voltaj saptanabilir değişiklikler üretirler. Elde edilen dalga bir se birleşimini temsilgenlik, zamanlama ve sıklığı farklılık iyi tanımlanmış bileşenlerin Ries. Araştırmanın önemli bir vücut bu bileşenler, nispeten iyi bir çok omurgalı retinae boyunca ve parçaları birbirinden ayrılabilir olduğu korunmuş olduğunu göstermiştir. Mantıklı uyaran (flaş uyarı, arka plan, interstimulus aralık) koşulları seçme ve analiz etmek için kompozit dalga belirli özelliklerini seçerek bir retina hücrelerinin 1,2 belirli bir grubun bir ölçü dönen emin olabilirsiniz. Bu özellikler yarar ve dolayısıyla retina fonksiyonunun bir non-invaziv bir önlem olarak ERG yaygın uygulamaları altında yatan. Bu yazının (pozitif ERG ölçme ve retinada önemli hücre sınıfları, yani fotoreseptör (PIII bileşeni), bipolar hücreleri (PII bileşeni) ve retina ganglion hücrelerinin bazıları hakkında bilgi dönmek için özelliklerini analiz etmek için metodoloji üzerinde duruluyor scotopic eşik yanıt veya pSTR). 3 alan V1 optik sinir, optik sistemi, talamus (lateral genikulat nükleus, LGN) ve optik radyasyon yoluyla seri iletilecektir. Kemirgenlerde, çoğunluk - Her göz decussate 4&#39;ten optik sinir liflerinin (90% 95) ve kontralateral orta beyin innerve. ERG aksine, 5 ve böylece görsel yolu VEP dalga formunu etkileyebilecek herhangi bir yerde birlikte değişir, özel hücre sınıflar için VEP farklı bileşenlerini atfedilmesi henüz mümkün değildir. Bununla birlikte, VEP görsel performans ve görsel yolu bütünlüğü yararlı bir non-invaziv bir ölçüsüdür. VEP, ERG ile bağlantılı olarak kullanıldığında, görme sistemi (örneğin, retina / işitsel yol) daha tam bir değerlendirmesini sağlar. ERG ve VEP kayıtları başvurunun bağlı olarak, tek başına ya da kombinasyon halinde yapılabilirkatyon. Bu yazıda anlatılan metodoloji retina ve kortikal görsel uyarılmış hem gözlerden elektrofizyoloji ve anestezi farelerde her iki yarımkürede aynı anda değerlendirilmesini sağlar. Bu daha kapsamlı retina fonksiyon değişiklikleri görsel uyandırılmış kortikal fonksiyonu olabilir ki retina fonksiyonu ve yukarı etkilerini değerlendirmek için kullanışlı bir yoldur.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alligator clip</td>
			<td>generic brand</td>
			<td>HM3022</td>
			<td>Stainless steel 26 mm clip for connecting VEP screw electrodes to cables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioamplifier</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML 135</td>
			<td>For amplifying ERG and VEP signals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carboxymethylcellulose sodium 1.0%</td>
			<td>Allergan</td>
			<td>CAS 0009000-11-7</td>
			<td>Viscous fluid for improving signal quality of the active ERG electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen 0.5%</td>
			<td>Pfizer Animal Health Group</td>
			<td>CAS 53716-49-7</td>
			<td>Proprietary name: Rimadyl injectable (50 mg/mL). For post-surgery analgesia, diluted to 0.5% (5 mg/mL) in normal saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexadine 0.5%</td>
			<td>Orion Laboratories</td>
			<td>27411, 80085</td>
			<td>For disinfecting surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circulating water bath</td>
			<td>Lauda-K&#246;nigshoffen</td>
			<td>MGW Lauda</td>
			<td>For maintaining body temperature of the anesthetized animal during surgery and electrophysiological recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental amalgam</td>
			<td>DeguDent GmbH</td>
			<td>64020024</td>
			<td>For encasing the electrode-skull assembly to make it more robust</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental burr</td>
			<td>Storz Instruments, Bausch and Lomb</td>
			<td>#E0824A</td>
			<td>A miniature drill head of ~0.7mm diameter for making a small hole in the skull over each hemisphere to implant VEP screws</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill</td>
			<td>Bosch</td>
			<td>Dremel 300 series</td>
			<td>An automatic drill for trepanning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode lead</td>
			<td>Grass Telefactor&#160;</td>
			<td>F-E2-30</td>
			<td>Platinum cables for connecting silver wire electrodes to the amplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Faraday Cage</td>
			<td>custom-made</td>
			<td></td>
			<td>Ensures light proof to maintain dark adaptation. Encloses the Ganzfeld setup to improve signal to noise ratio</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs</td>
			<td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td>
			<td>57-100B</td>
			<td>For drying the surgical incision and exposed skull surface during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ganzfeld integrating sphere</td>
			<td>Photometric Solutions International</td>
			<td></td>
			<td>Custom designed light stimulator: 36 mm diameter, 13 cm aperture size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Velcro</td>
			<td>VELCRO Australia Pty Ltd</td>
			<td>VELCRO Brand Reusable Wrap</td>
			<td>Hook-and-loop fastener to secure the electrodes and the animal on the recording platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane 99.9%</td>
			<td>Abbott Australasia Pty Ltd</td>
			<td>CAS 26675-46-7</td>
			<td>Proprietary Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for VEP electrode implant surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;</td>
			<td>Troy Laboratories</td>
			<td>Ilium Ketamil</td>
			<td>Proprietary name: Ketamil Injection, Brand: Ilium. Pharmaceutical-grade anesthetic for electrophysiological recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luxeon LEDs</td>
			<td>Phillips Lighting Co.</td>
			<td></td>
			<td>For light stimulation twenty 5 watt and one 1 watt LEDs.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>BS4 50-2625</td>
			<td>Holds the ERG active electrode during recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle electrode</td>
			<td>Grass Telefactor&#160;</td>
			<td>F-E2-30</td>
			<td>Subcutaneously inserted in the tail to serve as the ground electrode for both the ERG and VEP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine 2.5% minims&#160;</td>
			<td>Bausch and Lomb</td>
			<td>CAS 61-76-7</td>
			<td>Instilled with Tropicamide to achieve maximal dilation for ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine 10%</td>
			<td>Sanofi-Aventis</td>
			<td>CAS 25655-41-8</td>
			<td>Proprietory name: Betadine, Antiseptic to prepare the shaved skin for surgery 10%, 500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerlab data acquisition system</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML 785</td>
			<td>Controls the LEDs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proxymetacaine 0.5%</td>
			<td>Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td>CAS 5875-06-9</td>
			<td>For corneal anaesthesia during ERG recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution</td>
			<td>Gelflex</td>
			<td></td>
			<td>Non-injectable, for electroplating silver wire electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scope Software</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>version 3.7.6</td>
			<td>Simultaneously triggers the stimulus via the Powerlab system and collects data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver (fine round wire)</td>
			<td>A&#38;E metal</td>
			<td>0.3 mm</td>
			<td>Used to make active and inactive ERG electrodes, and the inactive VEP electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless streel screws&#160;</td>
			<td>MicroFasterners</td>
			<td></td>
			<td>0.7 mm shaft diameter, 3 mm in length to be implanted over the primary visual cortex and serve as the active VEP electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic frame</td>
			<td>David Kopf</td>
			<td>Model 900</td>
			<td>A small animal stereotaxic instrument for locating the primary visual cortices according to Paxinos &#38; Watson&#39;s 2007 rat brain atlas coordinates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blade</td>
			<td>Swann-Morton Ltd.</td>
			<td>0206</td>
			<td>For incising the area of skin overlaying the primary visual cortex to implant the VEP electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co.,Ltd</td>
			<td></td>
			<td>3-0 silk braided suture non-absorbable, for skin retraction during VEP electrode implantation surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tobramycine eye ointment 0.3%</td>
			<td>Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td>CAS 32986-56-4</td>
			<td>Proprietary name: Tobrex. Prophylactic antibiotic ointment applied around the skin wound after surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide 0.5%</td>
			<td>Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td>CAS 1508-75-4</td>
			<td>Proprietary name: 0.5% Mydriacyl eye drop, Instilled to achieve mydriasis for ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Troy Laboratories</td>
			<td>Ilium Xylazil-100</td>
			<td>Pharmaceutical-grade anesthetic for electrophysiological recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tip&#160;</td>
			<td>Eppendorf Pty Ltd</td>
			<td>0030 073.169</td>
			<td>Eppendorf epTIPS 100 - 5000 mL, for custom-made electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>version 2010</td>
			<td>spreadsheet software for data analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lethabarb Euthanazia Injection</td>
			<td>Virbac (Australia) Pty Ltd</td>
			<td>LETHA450</td>
			<td>325 mg/mL pentobarbital sodium for rapid euthanazia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simultaneous recording of electroretinography and visual evoked potentials in anesthetized rats

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the electrical responses of the retina to light stimulation, while the VEP measures the corresponding functional integrity of the visual pathways from the retina to the primary visual cortex following the same light event. The ERG waveform can be broken down into components that reflect responses from different retinal neuronal and glial cell classes. The early components of the VEP waveform represent the integrity of the optic nerve and higher cortical centers. These recordings can be conducted in isolation or together, depending on the application. The methodology described in this paper allows simultaneous assessment of retinal and cortical visual evoked electrophysiology from both eyes and both hemispheres. This is a useful way to more comprehensively assess retinal function and the upstream effects that changes in retinal function can have on visual evoked cortical function.

ERG bir dalga (&gt; -1,38 log cd.sm -2), b-dalgaları (&gt; - 4.99 log cd.sm -2) oran otozomal STR&#39;lerle (&lt;- 4.99 log cd.sm -2) ve VEP (&gt; - 0.52 cd.sm log -2) eş zamanlı olarak (Şekil 1 ve kaydedilmiştir 3). Çok loş yanıp söner anda, pozitif STR (pSTR) 110 msn flaş sonra yaklaşık görülen ve yaklaşık 220 ms bir negatif STR (nSTR) (Şekil 1 ve 2). Büyük bir b-dalgası olan bir ERG, kendi kimlik bilgileri yanıt analiz edilebilir bir orta dereceli flaş başlamasından sonra 50 ila 100 milisaniye arasındaki zirveler (Şekiller 1 ve 2). Bu uyarıcı enerjisinde, zirve öncesi olumsuz bir dalga yok denecek kadar azdır. Parlak ışıklı enerjilerin negatif sapma bir dalga PIII yanıt (Şekil 2) ile ölçülebilir hangi daha belirgin hale gelir. ardından -; skotopik VEP dalga olumsuz yanıt (70 msn penceresi 15 P1N1) gösterir<html> Pozitif sapma (N1P2, 30-100 ms) (Şekiller 3 ve 4). <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54158/54158fig1.jpg" /> Şekil 1. Grup Ortalama ERG Dalga Şekilleri. ERG uyaran yoğunluğunu artan değiştirir. dalga solundaki sayılar dalga biçimini ortaya çıkarmak için kullanılan ışık maruziyeti gösterir. Her panel için farklı bir amplitüd ve zaman ölçekleri edin. sönük ışık enerjilerde skotopik eşik tepkisi olumlu ve olumsuz bileşenleri (pSTR, nSTR) elde edebilir. Uyarıcı enerjileri daha parlak olsun, a ve b-dalgası tepki analiz edilebilir ve bir eşleştirilmiş-flaş paradigma koni tepkisi ölçülecek verir. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54158/54158fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> Güncelle / 54158 / 54158fig2.jpg &quot;/&gt; Şekil 2. ERG analizi. (A), çubuk fotoreseptör işlevi dalga modeli, bir PIII kullanılarak analiz edilebilir. 1.22 ve 1.52 log cd.sm A-dalgaları -2 (doldurulmamış çevreler, ○) Rm PIII döndüren en az% 90 bir PIII ile bir topluluk (gri çizgiler, Denklem 1) olarak uyum vardır (doymuş genlik, mV) S (duyarlılık, m 2 .cd -1 .s -3) ve td (zamanlama gecikmesi, msn) parametreleri. (B) çubuk bipolar hücre fonksiyonu (± SEM ortalama) çubuk PII yoğunluğu tepki serisi modelleyerek denenebilir bir Naka-Rushton fonksiyonu (gri hat) ile (doldurulmamış çevreler ○). Bu V max (doymuş genlik, mV), k (1 / hassasiyet, log cd sm -2) ve n (eğim) döndürür. (C) Retina ganglion hücre fonksiyonu loş ışıklı enerjilerde tahlil ve pSTR tepe genlik tarafından ölçülür (pSTR amp) ve zamanlaması (o pSTR </sub&gt;). (D) Koni bipolar hücre fonksiyonu koni PII tepe genlik (koni PII amp) ve zamanlama (koni PII o) ile sayısal bir eşleştirilmiş flaş paradigma ile ortaya edilir. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54158/54158fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/54158/54158fig3.jpg" /> Şekil 3. Grup Ortalama VEP Dalga Formları. VEP dalga şekli uyaran artan enerji ile değiştirir. Dalga solundaki sayılar dalga biçimini ortaya çıkarmak için kullanılan ışık maruziyeti gösterir. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54158/54158fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/54158/54158fig4.jpg" /> Figu4. VEP Analiz yeniden ve Yoğunluk Tepki Fonksiyonu. (A) VEP Genlik analizi (P1N1) dip zirve olarak alınır ve (N1P2) genlikleri zirveye çukur olduğunu. Bu tepkilerin örtülü kez (o) da döndürülür (P1 o, N1 o, P2). (B) VEP P1N1 genliği (ortalama ± SEM) uyaran artan enerji artar. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54158/54158fig4large.jpg" target="_blank">Daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınız bu figür.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats at JoVE.com

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

This protocol describes simultaneous measurement of electroretinogram and visual evoked potentials in anesthetized rats.

Elektroretinografi Eşzamanlı Kayıt ve Anestezi Sıçanlar Görsel Uyarılmış Potansiyeller

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

simultaneous-recording-electroretinography-visual-evoked-potentials

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Neuroscience

12.2K Görüntüleme.  University of Melbourne. This protocol describes simultaneous measurement of electroretinogram and visual evoked potentials in anesthetized rats. 

Video: Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

Recording Large-scale Neuronal Ensembles with Silicon Probes in the Anesthetized Rat

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of behaviors from the spiking activity of its neurons. One of the most effective methods to monitor spiking activity from a large number of neurons in multiple local neuronal circuits simultaneously is by using silicon electrode arrays1-3.
Action potentials produce large transmembrane voltage changes in the vicinity of cell somata. These output signals can be measured by placing a conductor in close proximity of a neuron. If there are many active (spiking) neurons in the vicinity of the tip, the electrode records combined signal from all of them, where contribution of a single neuron is weighted by its 'electrical distance'. Silicon probes are ideal recording electrodes to monitor multiple neurons because of a large number of recording sites (+64) and a small volume. Furthermore, multiple sites can be arranged over a distance of millimeters, thus allowing for the simultaneous recordings of neuronal activity in the various cortical layers or in multiple cortical columns (Fig. 1). Importantly, the geometrically precise distribution of the recording sites also allows for the determination of the spatial relationship of the isolated single neurons4. Here, we describe an acute, large-scale neuronal recording from the left and right forelimb somatosensory cortex simultaneously in an anesthetized rat with silicon probes (Fig. 2).

Extracellular recordings of neuronal activity using silicon probes in the anesthetized rat will be described. This technique allows information to be obtained across multiple brain areas from more than 100 neurons simultaneously. It provides information with single cell resolution about neuronal ensembles dynamics in multiple local circuits.

Anestezi Rat Silikon Probları Büyük ölçekli Nöronal Toplulukları Kaydı

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of ...

Nörobilim

Simultaneous Whole-cell Recordings from Photoreceptors and Second-order Neurons in an Amphibian Retinal Slice Preparation

One of the central tasks in retinal neuroscience is to understand the circuitry of retinal neurons and how those connections are responsible for shaping the signals transmitted to the brain. Photons are detected in the retina by rod and cone photoreceptors, which convert that energy into an electrical signal, transmitting it to other retinal neurons, where it is processed and communicated to central targets in the brain via the optic nerve. Important early insights into retinal circuitry and visual processing came from the histological studies of Cajal1,2 and, later, from electrophysiological recordings of the spiking activity of retinal ganglion cells - the output cells of the retina3,4.
A detailed understanding of visual processing in the retina requires an understanding of the signaling at each step in the pathway from photoreceptor to retinal ganglion cell. However, many retinal cell types are buried deep in the tissue and therefore relatively inaccessible for electrophysiological recording. This limitation can be overcome by working with vertical slices, in which cells residing within each of the retinal layers are clearly visible and accessible for electrophysiological recording.
Here, we describe a method for making vertical sections of retinas from larval tiger salamanders (Ambystoma tigrinum). While this preparation was originally developed for recordings with sharp microelectrodes5,6, we describe a method for dual whole-cell voltage clamp recordings from photoreceptors and second-order horizontal and bipolar cells in which we manipulate the photoreceptor's membrane potential while simultaneously recording post-synaptic responses in horizontal or bipolar cells. The photoreceptors of the tiger salamander are considerably larger than those of mammalian species, making this an ideal preparation in which to undertake this technically challenging experimental approach. These experiments are described with an eye toward probing the signaling properties of the synaptic ribbon - a specialized synaptic structure found in a only a handful of neurons, including rod and cone photoreceptors, that is well suited for maintaining a high rate of tonic neurotransmitter release7,8 - and how it contributes to the unique signaling properties of this first retinal synapse.

We describe the preparation of thin retinal slices from aquatic tiger salamanders (Ambystoma tigrinum) and explain how we use these slices to study synaptic processing in the retina by obtaining dual whole-cell voltage clamp recordings from photoreceptors and second-order horizontal and bipolar cells.

Bir Amfibi Retina Dilim hazırlanması Fotoreseptörler ve İkinci dereceden nöronlar eş zamanlı tam hücreli Kayıtlar

One of the central tasks in retinal neuroscience  is to understand the circuitry of retinal neurons and how those connections are  responsible for shaping ...

Simultaneous Electrophysiological Recording and Calcium Imaging of Suprachiasmatic Nucleus Neurons

Simultaneous electrophysiological and fluorescent imaging recording methods were used to study the role of changes of membrane potential or current in regulating the intracellular calcium concentration. Changing environmental conditions, such as the light-dark cycle, can modify neuronal and neural network activity and the expression of a family of circadian clock genes within the suprachiasmatic nucleus (SCN), the location of the master circadian clock in the mammalian brain. Excitatory synaptic transmission leads to an increase in the postsynaptic Ca2+ concentration that is believed to activate the signaling pathways that shifts the rhythmic expression of circadian clock genes. Hypothalamic slices containing the SCN were patch clamped using microelectrodes filled with an internal solution containing the calcium indicator bis-fura-2. After a seal was formed between the microelectrode and the SCN neuronal membrane, the membrane was ruptured using gentle suction and the calcium probe diffused into the neuron filling both the soma and dendrites. Quantitative ratiometric measurements of the intracellular calcium concentration were recorded simultaneously with membrane potential or current. Using these methods it is possible to study the role of changes of the intracellular calcium concentration produced by synaptic activity and action potential firing of individual neurons. In this presentation we demonstrate the methods to simultaneously record electrophysiological activity along with intracellular calcium from individual SCN neurons maintained in brain slices.

Procedures are described to perform simultaneous recordings of membrane potential or current and changes of intracellular calcium concentration. Suprachiasmatic nucleus neurons are filled with the calcium indicator bis-fura-2 using a patch clamp electrode in the whole cell patch clamp configuration.

Eşzamanlı Elektrofizyolojik Kayıt ve Suprakiazmatik Nucleus Nöronlar Kalsiyum Görüntüleme

Simultaneous electrophysiological and fluorescent imaging recording methods were used to study the role of changes of membrane potential or current in ...

Extracting Visual Evoked Potentials from EEG Data Recorded During fMRI-guided Transcranial Magnetic Stimulation

Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) is an effective method for establishing a causal link between a cortical area and cognitive/neurophysiological effects. Specifically, by creating a transient interference with the normal activity of a target region and measuring changes in an electrophysiological signal, we can establish a causal link between the stimulated brain area or network and the electrophysiological signal that we record. If target brain areas are functionally defined with prior fMRI scan, TMS could be used to link the fMRI activations with evoked potentials recorded. However, conducting such experiments presents significant technical challenges given the high amplitude artifacts introduced into the EEG signal by the magnetic pulse, and the difficulty to successfully target areas that were functionally defined by fMRI. Here we describe a methodology for combining these three common tools: TMS, EEG, and fMRI. We explain how to guide the stimulator&#39;s coil to the desired target area using anatomical or functional MRI data, how to record EEG during concurrent TMS, how to design an ERP study suitable for EEG-TMS combination and how to extract reliable ERP from the recorded data. We will provide representative results from a previously published study, in which fMRI-guided TMS was used concurrently with EEG to show that the face-selective N1 and the body-selective N1 component of the ERP are associated with distinct neural networks in extrastriate cortex. This method allows us to combine the high spatial resolution of fMRI with the high temporal resolution of TMS and EEG and therefore obtain a comprehensive understanding of the neural basis of various cognitive processes.

This paper describes a method for collecting and analyzing electroencephalography (EEG) data during concurrent transcranial magnetic stimulation (TMS) guided by activations revealed with functional magnetic resonance imaging (fMRI). A method for TMS artifact removal and extraction of event related potentials is described as well as considerations in paradigm design and experimental setup.

FMRI-güdümlü Transkranial Manyetik Stimülasyon sırasında kaydedilen EEG Veri Görsel Uyarılmış Potansiyelleri ayıklanıyor

Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) is an effective method for establishing a causal link between a cortical area and cognitive/neurophysiological ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise from extra-retinal sources. Ex vivo ERG provides an efficient method to dissect the function of retinal cells directly from an intact isolated retina of animals or donor eyes. In addition, ex vivo ERG can be used to test the efficacy and safety of potential therapeutic agents on retina tissue from animals or humans. We show here how commercially available in vivo ERG systems can be used to conduct ex vivo ERG recordings from isolated mouse retinas. We combine the light stimulation, electronic and heating units of a standard in vivo system with custom-designed specimen holder, gravity-controlled perfusion system and electromagnetic noise shielding to record low-noise ex vivo ERG signals simultaneously from two retinas with the acquisition software included in commercial in vivo systems. Further, we demonstrate how to use this method in combination with pharmacological treatments that remove specific ERG components in order to dissect the function of certain retinal cell types.

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Ex vivo ERG can be used to record electrical activity of retinal cells directly from isolated intact retinas of animals or humans. We demonstrate here how common in vivo ERG systems can be adapted for ex vivo ERG recordings in order to dissect the electrical activity of retinal cells.

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to monitor the disease course in the follow-up period. Changes in the VEP parameters closely correlate with pathological damage in the optic nerve. This protocol provides a detailed description about the rodent model of optic nerve microinjection, in which a partial demyelination lesion is produced in the optic nerve. VEP recording techniques are also discussed. Using skull implanted electrodes, we are able to acquire reproducible intra-session and between-session VEP traces. VEPs can be recorded on individual animals over a period of time to assess the functional changes in the optic nerve longitudinally. The optic nerve demyelination model, in conjunction with the VEP recording protocol, provides a tool to investigate the disease processes associated with demyelination and remyelination, and can potentially be employed to evaluate the effects of new remyelinating drugs or neuroprotective therapies.

Focal demyelination is induced in the optic nerve using lysolecithin microinjection. Visual evoked potentials are recorded via skull electrodes implanted over the visual cortex to examine the signal conduction along the visual pathway in vivo. This protocol details the surgical procedures underlying electrode implantation and optic nerve microinjection.

Deneysel Optik Sinir demyelinizasyon bir Rat Modelinde Görsel Uyarılmış Potansiyel Kayıt

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

Converging evidence shows that many neuropsychiatric diseases should be understood as disorders of large-scale neuronal networks. To better understand the pathophysiological basis of these diseases, it is necessary to precisely characterize in which way the processing of information is disturbed between the different neuronal parts of the circuit. Using extracellular in vivo electrophysiological recordings, it is possible to accurately delineate neuronal activity within a neuronal network. The application of this method has several advantages over alternative techniques, e.g., functional magnetic resonance imaging and calcium imaging, as it allows a unique temporal and spatial resolution and does not rely on genetically engineered organisms. However, the use of extracellular in vivo recordings is limited since it is an invasive technique that cannot be universally applied. In this article, a simple and easy to use method is presented with which it is possible to simultaneously record extracellular potentials such as local field potentials and multiunit activity at multiple sites of a network. It is detailed how a precise targeting of subcortical nuclei can be achieved using a combination of stereotactic surgery and online analysis of multi-unit recordings. Thus, it is demonstrated, how a complete network such as the hyperdirect cortico-basal ganglia loop can be studied in anesthetized animals in vivo.

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

In this study, the methodology is presented on how to perform multi-site in vivo electrophysiological recordings from the hyperdirect pathway under urethane anesthesia.

Akut<emIn vivo</em&gt; Anestezi Uygulanan Sıçanlarda Hiperdirect Pathway&#39;den Lokal Alan Potansiyellerinin Elektrofizyolojik Kayıtları ve Çoklu Ünite Aktivitesi

Converging evidence shows that many neuropsychiatric diseases should be understood as disorders of large-scale neuronal networks. To better understand the ...

Chronic Transcranial Electrical Stimulation and Intracortical Recording in Rats

Transcranial electrical stimulation (TES) is a powerful and relatively simple approach to diffusely influence brain activity either randomly or in a closed-loop event-triggered manner. Although many studies are focusing on the possible benefits and side-effects of TES in healthy and pathologic brains, there are still many fundamental open questions regarding the mechanism of action of the stimulation. Therefore, there is a clear need for a robust and reproducible method to test the acute and the chronic effects of TES in rodents. TES can be combined with regular behavioral, electrophysiological, and imaging techniques to investigate neuronal networks in vivo. The implantation of transcranial stimulation electrodes does not impose extra constraints on the experimental design while it offers a versatile, flexible tool to manipulate brain activity. Here we provide a detailed, step-by-step protocol to fabricate and implant transcranial stimulation electrodes to influence brain activity in a temporally constrained manner for months.

This detailed protocol describes transcranial stimulation electrode placement on the temporal bone in order to investigate the short- and long-term effects of transcranial electrical stimulation in freely moving rats.

Kronik Transkraniyal elektriksel stimülasyon ve Sıçanlarda Intracortical kayıt

Transcranial electrical stimulation (TES) is a powerful and relatively simple approach to diffusely influence brain activity either randomly or in a ...

Visual Evoked Potential Recordings in Mice Using a Dry Non-invasive Multi-channel Scalp EEG Sensor

For scalp EEG research environments with laboratory mice, we designed a dry-type 16 channel EEG sensor which is non-invasive, deformable, and re-usable because of the plunger-spring-barrel structural facet and mechanical strengths resulting from metal materials. The whole process for acquiring the VEP responses in vivo from a mouse consists of four steps: (1) sensor assembly, (2) animal preparation, (3) VEP measurement, and (4) signal processing. This paper presents representative measurements of VEP responses from multiple mice with a submicro-voltage signal resolution and sub-hundred millisecond temporal resolution. Although the proposed method is safer and more convenient compared to other previously reported animal EEG acquiring methods, there are remaining issues including how to enhance the signal-to-noise ratio and how to apply this technique with freely moving animals. The proposed method utilizes easily available resources and shows a repetitive VEP response with a satisfactory signal quality. Therefore, this method could be utilized for longitudinal experimental studies and reliable translational research exploiting non-invasive paradigms.

We designed a dry-type 16 channel EEG sensor which is non-invasive, deformable, and re-usable. This paper describes the whole process from manufacturing the proposed EEG electrode to signal processing of visual evoked potential (VEP) signals measured on a mouse scalp using a dry non-invasive multi-channel EEG sensor.

Görsel uyarılmış potansiyel kayıtları bir kuru Non-invaziv çok kanallı kullanarak farelerde EEG sensör kafa derisi

For scalp EEG research environments with laboratory mice, we designed a dry-type 16 channel EEG sensor which is non-invasive, deformable, and re-usable ...

Stimulus-specific Cortical Visual Evoked Potential Morphological Patterns

This paper presents a methodology for the recording and analysis of cortical visual evoked potentials (CVEPs) in response to various visual stimuli using 128-channel high-density electroencephalography (EEG). The specific aim of the described stimuli and analyses is to examine whether it is feasible to replicate previously reported CVEP morphological patterns elicited by an apparent motion stimulus, designed to simultaneously stimulate both ventral and dorsal central visual networks, using object and motion stimuli designed to separately stimulate ventral and dorsal visual cortical networks.&#160; Four visual paradigms are presented: 1. Randomized visual objects with consistent temporal presentation. 2. Randomized visual objects with inconsistent temporal presentation (or jitter).&#160; 3. Visual motion via a radial field of coherent central dot motion without jitter.&#160; 4. Visual motion via a radial field of coherent central dot motion with jitter.&#160; These four paradigms are presented in a pseudo-randomized order for each participant.&#160; Jitter is introduced in order to view how possible anticipatory-related effects may affect the morphology of the object-onset and motion-onset CVEP response.&#160; EEG data analyses are described in detail, including steps of data exportation from and importation to signal processing platforms, bad channel identification&#160;and removal, artifact rejection, averaging, and categorization of average CVEP morphological pattern type based upon latency ranges of component peaks. Representative data show that the methodological approach is indeed sensitive in eliciting differential object-onset and motion-onset CVEP morphological patterns and may, therefore, be useful in addressing the larger research aim. Given the high temporal resolution of EEG and the possible application of high-density EEG in source localization analyses, this protocol is ideal for the investigation of distinct CVEP morphological patterns and the underlying neural mechanisms which generate these differential responses.&#160; &#160; &#160;&#160;

In this paper, we present a protocol to investigate differential cortical visual evoked potential morphological patterns through stimulation of ventral and dorsal networks using high-density EEG. Visual object and motion stimulus paradigms, with and without temporal jitter, are described. Visual evoked potential morphological analyses are also outlined.&#160;&#160;

Stimulus-spesifik kortikal görsel uyarılmış potansiyel morfolojik desenler

This paper presents a methodology for the recording and analysis of cortical visual evoked potentials (CVEPs) in response to various visual stimuli using ...