Контролируемое корковое воздействие легко стандартизировать по предметам и экспериментам и позволяет использовать весь спектр черепно-мозговой травмы в точно определенных областях мозга. Демонстрация этой процедуры Мекка Ислам, научный специалист в моей лаборатории. Этот метод остается наиболее последовательной и воспроизводимой формой индуцирующей черепно-мозговой травмы у грызунов.
Перед началом процедуры прикрепите ударное устройство к стереотаксисной операционной раме. Se приводное устройство с желаемыми биомеханическими параметрами для соответствующей экспериментальной скорости и хорошо времени. Дон новое средства индивидуальной защиты и стерильные перчатки и подтвердить отсутствие реакции на щипать ногой в анестезированной экспериментальной мыши.
Используйте клиперы для бритья меха для хирургического участка и нанесите мазь на глаза животного. Затем поместите мышь в операционную и подготовьте бритую кожу с тремя последовательными йода на основе и алкоголя хирургических скрабов. Чтобы вызвать контролируемую корковую черепно-мозговую травму, сначала используйте скальпель, чтобы сделать один сантиметровый разрез вдоль средней линии кожи головы, чтобы разоблачить череп.
Убирают кожу головы из оперативного участка и идентифицируют сагиттаальные и корональные швы на облеженном черепе. Для выполнения черепно-мозговой операции оснастите микродрилл пятимиллиметровым трефиновым сверлом, чтобы активировать сверло на максимальной скорости и применить бит перпендикулярно черепу два миллиметра слева от сагитталового шва и два миллиметра рострального к корональному шву с нежным ровным давлением. Небольшое дать будет ощущаться, когда дрель проникает в череп.
Используйте типсы и небольшой калибровочный подкожный иглы, чтобы удалить костной лоскут, полностью подвергая основной dura mater и повернуть ударник отзыв в оперативном поле. Закрепним двусторонние височные кости между миниатюрными ушными прутьями стереотаксисной рамы и заблокировой резцы внутри зажима резцатора, чтобы создать стабильный трехоанточный удержания на голове мыши. Опустите кончик, пока он не в контакте с открытой dura матер.
Контактный датчик прибора сделает звуковой сигнал, чтобы предупредить, что контакт был сделан. Оттягивание ударного наконечника от нулевой точки и снижение позиции ударного удара на стереотаксисной раме, чтобы установить желаемую глубину удара. Затем активен ударник на приводное устройство перед поворотом устройства обратно из поля, чтобы животное было удалено из кадра.
Сразу же после травмы, применить прямое давление от стерильного хлопка наконечником аппликатора к черепу и травмированной корковой поверхности для контроля любого кровотечения и использовать свежий аппликатор, чтобы высушить череп. Закройте кожу головы над краниэктомией в соответствии со стандартными методами и ввежев послеоперационную анальгезию. Затем поместите животное в боковое положение восстановления детубита в чистую предварительно разогретую клетку с мониторингом до полной лежачих и измерять вес тела каждые три дня в течение эксперимента.
Доставка травмы, как было продемонстрировано, приводит к субдуральной внутрипаренхимальной и субарахноидальной кровоизлияния. Гистологическая оценка черепно-мозговой травмы отделов тканей головного мозга после тяжелой травмы показывает значительную ипсилатератрическую потерю корки и гиппокампа, а также контралатеральный отек и искажение. MR изображения тяжело поврежденных мозгов также демонстрирует прогрессирующую потерю тканей и замену спинномозговой жидкости.
Контролируемое корковое воздействие вызывает надежную и последовательную травму, которая способна производить широкий спектр клинически применимых травм головного мозга. Наш метод контролируемого коркового воздействия генерирует муриновую модель тяжелой черепно-мозговой травмы для поведенческого и визуализационного анализа и производит ткани для молекулярного и клеточного анализа.
