Na pós-graduação, fiquei muito interessado na tolerância ao calor, especialmente seus componentes comportamentais, e desde então tenho me interessado muito pela termorregulação comportamental e pelos mecanismos que os endotérmicos empregam para regular a temperatura corporal. A tolerância ao calor tem sido estudada há décadas com a observação de organismos por pesquisadores. Mais recentemente, houve um advento de métodos automatizados e baseados em vídeo para medir aspectos da tolerância ao calor.
E acho que será muito legal ver aonde essas novas tecnologias nos levarão em termos de explorar algumas das complexidades do comportamento e da atividade no que se refere à regulação térmica. Um dos desafios no campo é que, embora agora tenhamos uma maneira de monitorar e coletar grandes quantidades de dados de atividade, a interpretação do que os dados de atividade significam em termos de sua relevância biológica para aplicações na vida real continua sendo uma questão que precisa de mais pesquisas. Uma das vantagens de ter o programa automatizado é que você pode lidar com grandes conjuntos de dados de uma maneira muito mais facilmente acessível.
Anteriormente, era necessário passar manualmente por grandes arquivos do Excel para analisar e interpretar os resultados. O programa automatizado torna a análise de dados muito mais fácil. Para começar, carregue as moscas nos tubos do monitor DAM2 e cubra ambas as extremidades dos tubos com algodão.
Aspire moscas individuais dos frascos de retenção para os tubos do monitor. Insira os tubos de ensaio nos monitores de atividade e documente cuidadosamente os números dos slots correspondentes a cada grupo. Carregue os monitores na incubadora de ensaios.
Inicie o software de aquisição e certifique-se de que as preferências estejam definidas antes de iniciar a aquisição de dados para o experimento. Visualize os dados do monitor e o número do índice em tempo real através da interface DAMSystem. Defina a temperatura nociva na incubadora após o número definido de índices ter passado, marcando o fim do período de aclimatação.
Monitore as contagens de atividades em tempo real usando a exibição DAMSystem no software de aquisição. Como alternativa, pode ser mais fácil monitorar os dados de atividade diretamente nos arquivos DAMSystem. Copie os arquivos de texto e abra as cópias em vez dos originais para evitar interferência na gravação de dados ao vivo.
Depois de não observar nenhum movimento em nenhuma das moscas por vários minutos, pare o software de aquisição. Depois que os dados forem adquiridos, verifique se há erros nos arquivos de texto usando o software referenciado. Com base no intervalo de aclimatação implementado antes da indução da temperatura nociva, selecione pontos de início e parada específicos para compartimentalizar os dados da atividade antes de salvar o arquivo digitalizado.
Agora, abra o HoTDAM! software de análise e clique em Arquivo e carregar dados do monitor para importar os arquivos de dados do monitor digitalizados. Adicione designações de grupo para indicar os grupos de tratamento correspondentes a cada célula nos monitores DAM2.
Clique em Iniciar definição de vários grupos para abrir a caixa de diálogo para adicionar uma designação de grupo. Em seguida, clique nas respectivas células para aplicar a designação do grupo e clique em Parar designação de vários grupos. Para exportar o TKD para cada voo como um arquivo CSV, clique em Arquivo, Exportar dados de knockdown e Exportar todos os monitores ou Exportar monitores selecionados.
A saída organizará o TKD para cada mosca por designação de grupo. Agora clique em Arquivo, Exportar Dados de Atividade e Exportar Todos os Monitores ou Exportar Monitores Selecionados para exportar os dados de atividade de cada mosca como um arquivo CSV, retendo apenas os dados de carimbo de data/hora e contagem para simplificar o arquivo de dados e atribuindo rótulos de grupo designados para cada mosca. As fêmeas W1118 endurecidas exibiram uma probabilidade significativamente menor de knockdown durante o estresse térmico em comparação com as fêmeas controle.
Embora nenhuma diferença significativa tenha sido observada nos machos, os machos endurecidos TRPA1 exibiram uma probabilidade significativamente maior de knockdown em comparação com os machos de controle durante o estresse térmico, enquanto nenhuma diferença significativa foi encontrada entre as fêmeas endurecidas e de controle. A atividade média durante a tolerância ao calor variou distintamente entre os grupos endurecido e controle para os estoques W1118, mostrando um pico na contagem de atividade em torno de 30 minutos para machos e fêmeas. A atividade das ações TRPA1 mostrou um aumento acentuado na atividade inicial, seguido por um rápido declínio para todos os grupos.
