Modelo de roedores de perda muscular volumétrica masseter para estudo de materiais de bioengenharia

Nossa pesquisa está focada na regeneração do músculo esquelético na face e no corpo. Nosso objetivo é entender o que limita a regeneração em mamíferos, incluindo humanos, usando várias abordagens experimentais. Neste projeto, estamos focados na perda muscular volumétrica e abordagens para entendê-la mecanicamente e desenvolver abordagens terapêuticas.

Criar modelos experimentais confiáveis para perda muscular volumétrica é difícil, especialmente para músculos menores. Os modelos precisam ser reprodutíveis e relevantes para a condição biológica, a fim de testar as limitações da regeneração e as abordagens terapêuticas. E sem bons modelos in vivo, não é possível entender essa lesão.

Este modelo ajuda os pesquisadores a entender a resposta muscular, os efeitos do tratamento e a regeneração após lesões craniofaciais. Isso é significativo porque os tratamentos não mudam há décadas, e a compreensão da resposta à lesão pode levar a futuras terapêuticas. O músculo esquelético craniofacial difere do músculo da extremidade na expressão gênica e na composição das fibras.

As lesões de VML os afetam de maneira diferente, e nosso modelo visa investigar sua capacidade regenerativa e desenvolver novas abordagens de engenharia de tecidos. Para começar, posicione o roedor do lado esquerdo com o nariz encaixado em um cone nasal anestésico para exposição facial direita. Aplique pomada oftálmica nos olhos do roedor.

Use creme depilatório para remover o pelo do local da operação. Em seguida, desinfete o local da operação usando etanol e esfoliante Betadine, repetindo várias vezes. Depois de fazer uma incisão longitudinal, eleve o retalho cutâneo para visualizar o masseter direito e os ramos vestibular e mandibular do nervo facial.

Usando a separação romba, limpe a pele da fáscia subjacente. Segure as bordas da pele com pinças cirúrgicas para uma visualização ideal do músculo subjacente. Use a separação sem corte para expandir o espaço entre a fáscia e o masseter, preservando a integridade da fáscia restante.

Em seguida, faça uma incisão transversal na fáscia sobre a porção anterior do masseter. Em seguida, empregue uma biópsia por punção descartável esterilizada para criar uma lesão circular no músculo, usando a incisão fascial como uma janela para o masseter superficial. Use uma tesoura cirúrgica para extirpar a lesão tecidual criada pelo punção da biópsia.

Depois disso, adicione o biomaterial à lesão do masseter circular. Uma vez que o agente esteja adequadamente no lugar, usando uma sutura de monofilamento 5-0, suture a janela fascial de investimento muscular para evitar a migração do agente. Feche a pele usando uma técnica subcuticular simples, interrompida ou em execução, empregando uma sutura monofilamentar 5-0.

Aplique cola de pele sobre as suturas para evitar deiscência de incisão pós-operatória. Em seguida, coloque os ratos em uma gaiola de recuperação com uma fonte de aquecimento externa. Diluir o antibiótico sulfametoxazol-trimetoprima em água de beber.

Adicione-o à água potável do roedor por sete dias no pós-operatório.