Estabelecimento de organoides tumorais derivados do câncer de pâncreas e fibroblastos a partir de tecido fresco

O desenvolvimento de modelos tumorais para pesquisa translacional. Usamos esses modelos para testar novos medicamentos que podem ser aplicados na clínica de medicina personalizada. Modelos avançados in vitro e in vivo que foram desenvolvidos a partir de muitos tipos diferentes de tumores que são mais relevantes do ponto de vista fisiológico do que os modelos 2D que têm sido tradicionalmente usados na pesquisa do câncer.

Modelos de design que imitam a forma do órgão original, como as garras do cólon, estão sendo usados para modelos in vitro. Além disso, esses modelos e o tecido primário correspondente são caracterizados por meio de técnicas, como a transcriptômica espacial, que permitem que áreas específicas e tipos celulares dentro do tumor sejam analisados separadamente. A qualidade do tecido é um fator importante.

Desde o tratamento prévio dos pacientes antes da colheita, tempo de estabelecimento da cultura, da coleta do tecido, conteúdo de células tumorais e contaminação por microrganismos e populações celulares não desejadas, como fibroblastos. Identificamos subgrupos moleculares de pacientes que podem responder de forma diferente à terapia na clínica. Para isso, precisávamos desenvolver modelos pré-clínicos para testar nossa hipótese antes de passar para ensaios clínicos.

Aqui, tentamos resolver um problema de um protocolo padronizado que pode ser usado para tecido tumoral pancreático, seja diretamente do tumor primário ou de um modelo PDX. Muitos protocolos foram relatados, mas este é o primeiro que tem um vídeo correspondente que é muito útil para as pessoas que começam a trabalhar com esse tipo de cultura. Também falamos extensivamente sobre as muitas armadilhas e opções de solução de problemas que podem ser usadas.