JoVE Journal

Biochemistry

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Nanyang Technological University

Complementação da Atividade de Emenda por um Complexo Galectin-3 - U1 snRNP on Beads

Este artigo descreve os procedimentos experimentais para (a) esgotamento do U1 snRNP a partir de extratos nucleares, com perda concomitante de atividade de emenda; e (b) reconstituição da atividade de emenda no extrato empobrecido U1 por partículas de galectina-3 - U1 snRNP ligadas a contas covalentemente acopladas a anticorpos anti-galectina-3.

Capítulos neste vídeo

0:04

Introduction

0:53

Preparation of NE Depleted of U1 snRNP (U1ΔNE)

2:10

Immunoprecipitation of 10S Fractions of Glycerol Gradients by Anti-Gal3

3:52

Assembly of Splicing Reaction and Analysis of Products

6:09

Results: RNA and Polypeptide Compositions of the Anti-Gal3 Precipitate of the 10S Region of the Glycerol Gradient and its Ability to Reconstitute Splicing in U1ΔNE

8:08

Conclusion

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