Os autores desejam agradecer Sr. Akihiro Hirano por sua assistência em produzir o aparelho personalizado. Os autores gostaria de agradecer o Sr. Kosuke Takahashi e Sr. Shingo Nakajima para sua assistência técnica. Este trabalho foi apoiado pela pesquisa sobre o risco das substâncias químicas, saúde e bolsas de investigação do laboratório de Ciências, Ministério da saúde, trabalho e bem-estar, Japão (H25-KAGAKU-IPPANN-003) e A concessão do projeto de pesquisa por Instituto de ciência e tecnologia de Meiji University, Japão.

Todos os procedimentos experimentais descritos aqui foram aprovados pelo cuidado institucional do Animal e uso Comitê da Universidade de Meiji (IACUC 14-0002(1)). Animais utilizados nos resultados representativos foram preparados como segue: ratos machos Sprague-Dawley foram comprados de uma empresa de animais de laboratório e alojados em grupos de 4 animais por jaula de rato padrão (W200 × D410 × H250 mm) pelo menos uma semana antes do início da experimento comportamental. O quarto de alojamento dos animais foi mantido nas condições normais de ambientes para a luz (12:12 horário de claro/escuro com luzes acesas no 10:00 h), temperatura (25,0 ± 0,5 ° C), umidade (55 ± 10%) e ventilação (10 vezes / h), e os animais tinham acesso ad libitum a comida ( Oriental fermento co. Ltd., Tóquio, Japão) e água. Os animais foram mantidos em uma gaiola de rato padrão (W410 x D250 x H200 mm, Toyoriko co., Ltd., Aichi, Japão) com papel do fundamento (alfa-dri, LSG Corporatin, Tóquio, Japão).
1. elevada e mais teste de labirinto
<ol><li>Configurar o plus elevado labirinto aparelhos em um contêiner personalizado (W1, 500 × D1, 500 × H2, 000mm) (figura 1A) com um quadro metálico em forma de mais 500 mm acima do piso para apoiar a execução braços forma (figura 1B), iluminação no teto para contêiner Ilumine a superfície do labirinto para a intensidade da luz exigida (Figura 1) e uma câmera de vídeo digital no teto centro para permitir o monitoramento de vídeo ao vivo dos testes comportamentais (Figura 1).</li>
	<li>Os braços (L500 x W100 mm) na estrutura em forma de mais e em seguida sujeite a plataforma quadrado central (W100 x D100 mm) no centro dos quatro braços (Figura 1 -F). Nota: Em nosso laboratório, temos dois tipos de braços abertos (L500 x W100 mm) e dois tipos de braços fechados (L500 x x H450 W100 mm) (Figura 1). Os braços fechados têm paredes ou transparentes ou opacas (Figura 1), e os braços abertos são projetados com ou sem uma borda curta (H5 mm, Figura 1E). A plataforma quadrado central (W100 × D100 mm) é colocada no centro dos quatro braços (Figura 1 -F). Assim, as seguintes quatro combinações de braços podem ser preparadas de acordo com finalidade experimental: abre braços com bordas + braços fechados com paredes transparentes (lajes/transparente), braços abertos, com bordas + braços fechados com paredes opacas (lajes/opaco), de braços abertos sem bordas + braços fechados com paredes transparentes (não-bordas/transparente) e braços abertos sem bordas + braços fechados com opaco paredes (não-bordas/opaco). A superfície da pista de braço é preta, para permitir melhor animal rastreamento pelo software de análise do comportamento automatizado, como descrito na secção 2, análise comportamental.</li>
	<li>Ajuste a intensidade de iluminação na superfície da parte distal da extremidade de cada braço e uma plataforma central para aproximadamente 100 Lux.</li>
	<li>Antes de cada ensaio, limpe todo o aparelho com solução de etanol 70% e limpe com água destilada.</li>
	<li>Clique no botão"gravar" no gravador de disco rígido para iniciar a câmera de vídeo digital que vai gravar o comportamento do rato para o vídeo descrito na secção 2, análise comportamental de análise de imagem.</li>
	<li>Coloque um animal na plataforma central, enfrentando um braço aberto e permitir a livre exploração em cima da aparelho por 5 min.</li>
	<li>Clique no botão"parar" no gravador de disco rígido, para terminar a gravação.</li>
	<li>Conte o número de fezes e micções após retornar o animal testado para o quarto de alojamento dos animais.</li>
	<li>Repita da etapa 1.4 até o final do experimento. Nota: Uma execução de teste seco é sempre efectuada antes de iniciar cada experimento para verificar que todas as configurações experimentais estão corretamente configuradas antes de quaisquer animais experimentais estão expostos a condições experimentais. Caso contrário, alguns animais, especialmente o primeiro animal pode experimentar diferentes condições ambientais (por exemplo, ruídos, possivelmente induzidos pelo experimentador durante pistas de manipulação e/ou animal, eventualmente deixadas pelo animal previamente testado). Nota: Os experimentadores estão perto do recipiente quando um animal está sendo testado. Assim, mesmo que os experimentadores não são visíveis o rato pode ainda ser capaz de senti-los através do cheiro e/ou som.</li>
</ol>2. análise comportamental
Nota: Análise comportamental é realizado pela observação manual e automatizada de software de análise.
<ol><li>
Observação do manual
	<ol>
<li>Depois que o animal é colocado no peitoril, observar o seguinte: número de entradas (uma entrada para um braço é definida como qualquer instância quando todas as 4 patas no braço), o tempo gasto em cada braço, e número de esticada-atendente Postures posturas enfrentando um braço aberto , ao afastar a plataforma central para um braço fechado.</li>
		<li>Medir a duração e a frequência dos comportamentos definidos acima pelo cronômetro e contagem de 5 min, a partir de quando as portas do recipiente estão fechadas.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Análise automatizada
	<ol>
<li>Usando o programa de software disponíveis, gravar o seguinte: a distância percorridas, tempo gasto em diferentes posições de braços abertos (segmentos proximais, médios e distais da plataforma central), e uma análise de minuto a minuto do tempo gasto em aberto e fechado braços.</li>
		<li>Clique no botão"Iniciar" do software análise automatizada ao mesmo tempo, como a observação manual começa (a gravação irá parar automaticamente se a duração de gravação é definido). Nota: O software de análise comportamental utilizado neste estudo rastreia o animal através do seu contraste com o campo de fundo; o animal, que é atribuído a um tamanho fixo, é identificado como o objeto mais brilhante e a locomoção de seu ponto central, portanto, pode ser usada para rastreamento de animais.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+Brain's+Reward+Circuitry+in+Depression:+Transcriptional+Mechanisms.">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li><li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li><li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+'fear'-motivated+behaviour.">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li><li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+open:closed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat.">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li><li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+illumination,+closed+wall+transparency+and/or+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze.">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li><li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety.">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li><li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze.">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li><li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze.">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li><li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls.">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li><li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam.">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li><li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze.">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li><li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats.">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li><li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests.">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li><li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood.">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li><li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats.">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li><li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents.">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li><li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze.">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li><li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age.">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31 (2015).</li></ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

À medida que aumenta o número de pacientes que sofrem de transtornos psiquiátricos, incluindo transtorno de ansiedade, é importante desenvolver estudos de ponta para melhorar a compreensão do mecanismo básico de ansiedade. Para conseguir isso, é também importante otimizar os procedimentos experimentais. Portanto, para melhorar a aplicação da elevada além de teste de labirinto, temos demonstrado o efeito das características de braço em resultados experimentais utilizando ratos.
A elevada mais labirinto foi originalmente criado para testar animal ansiedade em roedores4, mas embora as estruturas básicas são geralmente consistente (por exemplo, elevada 500 mm acima do piso com uma forma mais), vários projetos de braço são usados frequentemente. Originalmente, o aparelho consistia de braços abertos, sem bordas e fechou a braços com paredes de madeira opacos. No entanto, mais recentemente abertos braços foram desenvolvidos com bordas para evitar que animais cair o aparelho e braços fechados também foram desenvolvidos com paredes transparentes para facilitar a observação do comportamento nos braços fechados. No entanto, não tem havido relatos que abordou os efeitos combinados destes braço recursos sobre os resultados experimentais da elevada mais teste de labirinto. Conforme mostrado pelos nossos resultados, a presença de bordas de braço aberto e a transparência do braço fechado paredes evitar a diminuição da exploração de braço aberto em ratos (Figura 2), que pode diminuir a sensibilidade de detecção do efeito ansiolítico do diazepam ( Figura 3). O aparelho transparente/bordas apareceu para encorajar a maior exploração sobre os braços abertos pelo veículo Tratado ratos (Figura 3). Este reduzido comportamental discriminação na exploração de braço aberto actividade entre veículo e diazepam tratados de ratos, tornando assim mais difícil de detectar diferenças nos níveis de ansiedade. Portanto, a sensibilidade mais baixa do aparelho transparente/bordas pode significar que mais animais que precisam ser testados para demonstrar o tratamento significativo efeitos em comparação com o uso de aparelhos não-bordas/opaco.
Em nosso protocolo, a duração e o número de entradas em cada braço manualmente foi medido por experimentadores bem treinados. Este procedimento permite uma medição precisa de entradas de braço, definidas como todos os 4 patas colocadas em um braço. Embora seja verdade que os sistemas de rastreamento automatizado de animais estão disponíveis para alguns parâmetros comportamentais, como viajar a distância, em nossa experiência, eles não conseguem distinguir sempre com precisão entre as entradas e as entradas para braços, especialmente quando os animais Execute posturas esticado-atendente, perto da fronteira entre a plataforma central e um braço. Assim, nós recomendamos usar uma combinação de ambos os sistemas de observação manual e automatizada, com base em seus respectivos pontos fortes para cada parâmetro comportamental.
Existem algumas outras diferenças de protocolo entre laboratórios. Por exemplo, alguns pesquisadores coloquem animais na plataforma central, enfrentando um braço fechado13,14, enquanto outros colocam os ratos enfrentando um braço aberto15,16. Além disso, alguns pesquisadores testar comportamento imediatamente depois de tomar os ratos da casa-gaiola, enquanto outros permitem que os ratos algum tempo para se aclimatar ao comportamento sala de teste antes de iniciar o teste. Em relação ao caso anterior, em testes preliminares experimentamos como resultados diferiam dependendo do que armar o rato inicialmente enfrentado; Houve um aumento da incidência de entrar para o braço que o rato estava situado em frente. Além disso, quando os ratos foram colocados frente para um braço fechado, alguns animais não se mexeu fora esse braço fechado após a primeira entrada. Nesse caso, é difícil distinguir se os ratos experimentam de conflito entre os braços abertos e fechados, ou que eles simplesmente preferem estar em um lugar fechado, sem jamais reconhecer a presença de braços abertos. Embora em nosso estudo, nós escolhemos colocar os ratos enfrentando um braço aberto, para garantir uma elevada incidência de estar em conflito, recomendamos que mais estudos sejam conduzidos para garantir que o efeito desta diferença de protocolo em resultados experimentais é corretamente investigada.
As medições de exploração do segmento distal de braços abertos e análise por minuto forneceram informações extra detalhadas sobre comportamento de ansiedade-rato. Estas medidas contribuídas para mostrar as diferenças entre os desenhos do braço diferente sensibilidade detecção. Apesar disso, resultados relatados de ansiedade de pesquisa usando a elevada mais teste de labirinto frequentemente não relatar estes tipos de medições detalhadas13,17,18. Portanto, é altamente recomendável que pesquisadores também relatam mais informações sobre atividades exploratórias de rato, incluindo exploração distal, análise por minuto e também postura esticada-atendente.
Em conclusão, nossos resultados sugerem que os diferentes tipos de aparelhos podem ter suas próprias características. Estes testes, demonstrámos que o aparelho não-bordas/opaco melhor pode detectar o efeito de drogas potencialmente ter um efeito ansiolítico. Em contraste, é concebível que bordas/transparente aparelhos podem ter uma vantagem semelhante ao testar o potencial anxiogenic de drogas. Até à data, testes comportamentais tem sido usados não só para triagem de drogas, mas também para os ensaios de fenotipagem em animais mutantes. Com efeito, genoma avançadas técnicas de edição permitem a rápida produção de animais mutantes. Portanto, é muito importante desenvolver procedimentos de teste com melhor precisão e sensibilidade para detectar melhor as variações no comportamento. Este relatório demonstra uma aplicação melhorada da elevada além teste para pesquisa de animais ansiedade baseada nas funções dos genes drogas ou destino esperadas. Assim, acreditamos que nossos esforços ajudarão a avançar a pesquisa empregando a elevada além de labirinto.

O número de pacientes que sofrem de transtornos do humor, incluindo transtorno de ansiedade e depressão, está aumentando. Embora o desenvolvimento destes transtornos envolve fatores genéticos e ambientais, os mecanismos de patogenicidade detalhados ainda não estão totalmente compreendidos1. Portanto, pesquisa deve centrar-se em desvendar os mecanismos subjacentes de transtornos do humor, bem como o desenvolvimento de medicamentos eficazes que têm menos efeitos colaterais.
Testes comportamentais para animais de laboratório são úteis para investigar a função superior do cérebro, incluindo a emoção. Como comportamento animal é altamente variável, resultados experimentais diferem frequentemente entre laboratórios, mesmo se uma estirpe de pura idêntica foi usado2. Assim, os pesquisadores também precisam entender as características básicas dos dispositivos experimentais adoptarem a fim de fornecer resultados fiáveis, precisos no laboratório.
A elevada além de teste de labirinto foi originalmente criado para examinar a reatividade emocional em roedores3,4. Todo o aparelho é normalmente localizado 500 mm acima do piso e consiste de dois abertos e dois braços fechados que fazem de uma forma mais. Medições de exploração do braço (incluindo a duração e a frequência de entradas em cada braço), distância viajados e especificados comportamentos como postura esticada-atendente de animais sujeitos são registados durante os períodos de observação. Por essas medidas, estima-se como um resultado experimental animal ansiedade.
A elevada além de teste de labirinto é usado em todo o mundo, mas nem todos os laboratórios usam o mesmo aparelho design5,6, e estas diferenças podem afectar os resultados experimentais. Por exemplo, diferenças incluem a presença ou ausência de saliências ao longo de braços abertos e/ou o uso de paredes transparentes ou opacos para braços fechados5,6. As bordas ao longo de braços abertos e o uso de paredes transparentes para braços fechados foram desenvolvidos para evitar animais cair o aparelho7e para facilitar as observações comportamentais dentro os braços fechados, respectivamente de8,9. Embora tenha havido alguns estudos que examinaram as diferenças de estrutura de braço como individuais podem afectar a capacidade de detectar animais ansiedade1,2,5,10,11 , os efeitos combinados de open (com/sem borda curta) e características de braço fechado (transparente/opaco paredes) sobre o comportamento do animal ainda não tenha sido investigada.
Num relatório recente, discutimos o efeito destas combinações de designs de braço no comportamento de ansiedade em ratos12. Em breve, bordas de braço aberto aumentaram significativamente comportamento de ansiedade em ratos, enquanto braços transparentes também podem ter diminuído esse comportamento. Além disso, verificamos a maior sensibilidade de detecção do efeito de um medicamento ansiolítico em uma combinação de braço aberto não-ledged + opaco braço fechado murado em comparação com uma combinação de ledged braço aberto + braço fechado murado transparente. Neste relatório, podemos apresentar nosso protocolo para a elevada mais labirinto teste, juntos com a discussão dos principais resultados do relatório anterior. Acreditamos que este relatório fornecerá informações úteis para aqueles que têm empregado ou quem planeja usar a elevada mais de labirinto em seus estudos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Customized container (W1500 &#215; D1500 &#215; H2000 mm)</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td style="width:167px;">Handmade by Mr. Akihiro Hirano</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LED lighting</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Handmade by Mr. Akihiro Hirano</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Elevated plus maze apparatus</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Handmade by Mr. Akihiro Hirano</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Digital video camera</td>
			<td style="width:71px;">Watec</td>
			<td style="width:119px;">WAT-250D2</td>
			<td>Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hard disk recorder</td>
			<td style="width:71px;">TOSHIBA</td>
			<td style="width:119px;">RD-R200</td>
			<td>Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera.</td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:216px;">Sprague-Dawley rats</td>
			<td style="width:71px;">Charles River Laboratories Japan, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Any suitable rats can be used for your study</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard rat cage</td>
			<td style="width:71px;">Toyoriko</td>
			<td style="width:119px;">TP-105</td>
			<td>Any suitable rat cage be used for your study</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Instrument to measure light intensity</td>
			<td style="width:71px;">AS ONE</td>
			<td style="width:119px;">1-5818-02</td>
			<td>Any suitable instrument to measure light intensity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">EthoVision XT version 8.0</td>
			<td style="width:71px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Any suitable software to measure animal behavior</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Diazepam</td>
			<td style="width:71px;">Taiyo Pharmaceutical Industry</td>
			<td style="width:119px;">1124402A2061</td>
			<td>Any suitable drug can be used for your study</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Tween 80</td>
			<td style="width:71px;">Wako Pure Chemical Industries</td>
			<td style="width:119px;">9005-65-6</td>
			<td>Any suitable drug can be used for your study</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

testing animal anxiety in rats: effects of open arm ledges and closed arm wall transparency in elevated plus maze test

A elevada além de labirinto é um teste comportamental para avaliar ansiedade animal em roedores. Embora este teste é aplicado extensamente no campo da ciência comportamental, resultados conflitantes são fornecidos frequentemente de laboratórios diferentes. Para identificar razões para os diferentes resultados, enfocamos anteriormente características de braço, que diferem entre laboratórios, mais notavelmente a presença/ausência de bordas para os lados de braços abertos e a opacidade/transparência das paredes de braço fechado. Em um relatório anterior, usamos um contêiner personalizado projetado para comparar o comportamento de ratos em diferentes combinações de desenhos de braço abertos e fechados, em condições experimentais idênticas e mostrou diferenças de características de braço interferem experimental resultados. Em breve, bordas de braço aberto aumentaram significativamente comportamento de ansiedade em ratos, enquanto braços transparentes também podem ter diminuído esse comportamento. Além disso, verificamos uma maior sensibilidade de detecção do efeito de um medicamento ansiolítico em uma combinação de braço aberto não-ledged + opaco braço fechado murado em comparação com uma combinação de ledged braço aberto + braço fechado murado transparente. Neste relatório, nós apresentamos o nosso protocolo para a elevada plus teste de labirinto, juntamente com a discussão dos principais resultados do relatório anterior e nossa experiência experimental. Acreditamos que este relatório fornecerá informações úteis para pesquisadores que têm empregado ou quem planeja usar a elevada mais de labirinto em seus estudos.

No estudo anterior, comparamos os efeitos combinados de bordas de braço aberto e transparência das paredes de braço fechado sobre os comportamentos exploratórios no labirinto12. Ratos, significativamente, gastou muito menos tempo em braços abertos sem bordas do que de braços abertos, com bordas (F [1, 60] = 13.49, P = 0,0005) (Figura 2A). Resultados semelhantes foram encontrados também para o número de entradas nos braços abertos (F [1, 60] = de 11,17, P < 0.0014)12, sugerindo que a presença de bordas aumenta o comportamento exploratório de rato de braços abertos. Ratos mostraram significativamente menos postura esticada-atendente sobre o aparato que tinha fechado a braços com paredes transparentes do que em aparelhos que tinham fechado a braços com paredes opacas (F [1,60] = 4,03, P = 0.0492) (Figura 2B), sugerindo que paredes transparentes braço fechado diminuíram o comportamento de ansiedade em ratos. Ratos, passou mais tempo no segmento distal de braços abertos em cima do aparelho que tinha paredes transparentes braço fechado do que no aparelho com paredes opacas braço fechado (F [1,60] = 8,00, P = 0.0983) (Figura 2), sugerindo que transparente paredes maio também Diminua o comportamento exploratório de braço aberto de rato. Além disso, a exploração de braço aberto no segmento distal foi significativamente menor no aparelho não-bordas/opaco comparado ao aparelho de bordas/transparente (Figura 2). Tomados em conjunto, estes resultados indicam que sensibilidade de detecção de comportamento de ansiedade pode diferir dependendo dos tipos de recursos de design de braço usados e o aparelho não-bordas/opaco e bordas/transparente aparelhos poderão ter um relativamente grande diferença na sensibilidade da detecção.
Para verificar diferenças de sensibilidade detecção entre diferentes tipos de projeto do braço, uma experiência adicional foi realizada usando o ansiolítico diazepam de droga (Figs. 3A–D). Em breve, o aparelho não-bordas/opaco detectou o efeito do tratamento com altas doses de diazepam no tempo gasto nos braços abertos, Considerando que o aparelho transparente/bordas não fez (Figura 3A–B). Resultados semelhantes foram encontrados também para o número de entradas em braços abertos12 (dados não mostrados). A falta de qualquer efeito significativo sobre o aparelho de bordas/transparente pode ter sido devido ao fato de que a atividade basal (tratamento de veículo) no aparelho foi maior do que o aparelho não-bordas/opaco, mas essa exploração de braço aberto nunca ultrapassou 33% de o tempo em qualquer fase de qualquer aparelho. Portanto, este intervalo de tempo de exploração mais estreito do braço aberto tornou mais difícil distinguir o efeito ansiolítico do diazepam sobre o aparelho Ledged/transparente (Figura 3–D).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56428/56428fig1.jpg"> Figura 1 : Equipamentos projetados para elevados além de teste de labirinto Painel (A): elevados além de contêiner de teste de labirinto. O aparelho é colocado no recipiente preto, e um monitor ao lado as imagens de filme ao vivo do recipiente projetos registrados durante o experimento. Painel (B): além de quadro de labirinto no recipiente que ofereça suporte a braços equipados. Todo o aparelho está localizado a 500 mm acima do piso. Painel (C): iluminação de teto que pode ser ajustada por intensidade. Uma câmera de vídeo digital (ver seta) rodeado por movimentos de animais de registros de iluminação. Painel (D): elevados além de braços de labirinto e plataforma central que são montados ao quadro; da esquerda para a direita, parede opaca fechada braço braço aberto não-parapeito, ledged braço aberto, plataforma central, braço de parede transparente fechado. Painel (E): exibição de close-up de braços abertos; da esquerda para a direita, abra o braço sem bordas, abra o braço com bordas (H5 mm). Painel (F): um exemplo de um labirinto construído (aparelhos de bordas/transparente). <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56428/56428fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56428/56428fig2.jpg"> Figura 2 : Bordas de braço aberto reduzem comportamento de ansiedade, e paredes transparentes diminuem parcialmente o comportamento de ansiedade. Ratos machos foram submetidos a elevada além de labirinto de teste com diferentes combinações de estruturas de braço (lajes/transparente, bordas/opaco, não-bordas/transparente e não-bordas/opaco). Ordem de teste foi normalizada através dos grupos experimentais (cada combinação de tipo de aparelho). Este procedimento normaliza efeitos inesperados que poderiam ter ocorrido devido ao tempo de um dia de cada teste. Painel (A): tempo gasto com os braços abertos; Painel (B): número de posturas esticado-atendente; Painel (C): tempo gasto no segmento distal de braços abertos. Linhas contínuas e tracejadas indicam significativos efeitos principais das estruturas de braço abertos e fechados, respectivamente (Two-Way ANOVA, #P < 0.1, * P < 0.05, * *P < 0,01, * * *P < 0,001). Letras diferentes ao lado as barras no painel (C) indicam diferença significativa (teste de comparação múltipla de Bonferroni, um < b, P < 0,0125). Os dados foram expressos como média com SEM (n = 16 por grupo experimental). Estes números foram modificados de nossa anterior relatório12. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56428/56428fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56428/56428fig3.jpg"> Figura 3 : O aparelho não-bordas/opaco mostra maior sensibilidade de detecção do efeito ansiolítico do diazepam. Ratos machos foram submetidos a elevada além de labirinto de teste, com aparelhos não-bordas/Opaque ou bordas/Transparent, 30 min após o tratamento com veículo (0 mg/kg), baixo (0,25 mg/kg) ou doses alta (0,5 mg/kg) de diazepam de drogas o ansiolítico (intraperitoneal injeção). Solução de diazepam foi dissolvida em solução salina normal 0,9%, com um agente de superfície-ativando. Neste experimento, a teste ordem dos grupos de tratamento de drogas de três e dois tipos de design de aparelhos foram randomizados para conta para quaisquer efeitos que possam ocorrer devido ao tempo de um dia de cada teste. Painéis (A & B): Total de tempo por cento (5 min) gasto com braços abertos de aparelhos bordas/transparente e não-bordas/opaco, respectivamente. Painéis (C e D): por minuto por cento tempo gasto nos braços abertos do aparelho bordas/transparente e não-bordas/opaco, respectivamente. Letras diferentes ao lado de barras no painel (B) indicam uma diferença significativa entre os tratamentos (teste de comparação múltipla de Bonferroni, um < b, P < 0,0167). As linhas contínuas e tracejadas em painéis (C e D) indicam significativos efeitos principais dos tratamentos Time-Lapse e diazepam, respectivamente (repetido medidas ANOVA, *P < 0.05, * *P < 0,01, * * *P < 0.001). os dados foram expressos como média com SEM. números nas colunas indicam animais que concluído o experimento (números entre parênteses indicam animais cair o aparelho). Estes números foram modificados de nossa anterior relatório12. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56428/56428fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

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Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

Testes Animal ansiedade em ratos: efeitos de bordas de braço aberto e fechado do braço de parede transparência em elevados além de teste de labirinto

Ansiedade-como o comportamento dos ratos testados da elevada mais labirinto altamente varia de acordo com o ambiente de teste. Aqui nós mostramos como configurações do aparelho, especialmente a estrutura de braço, afetam o comportamento no labirinto, e explicamos um protocolo confiável para detectar os efeitos dos ansiolíticos. Este relatório irá contribuir para a investigação de ansiedade.

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

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Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

13.4K visualizações.  Meiji University. Ansiedade-como o comportamento dos ratos testados da elevada mais labirinto altamente varia de acordo com o ambiente de teste. Aqui nós mostramos como configurações do aparelho, especialmente a estrutura de braço, afetam o comportamento no labirinto, e explicamos um protocolo confiável para detectar os efeitos dos ansiolíticos. Este relatório irá contribuir para a investigação de ansiedade.

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The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones. Handley, Mithani and File et al. performed the first studies on the plus-maze design we use today, and in 1987 Lister published a design for use with mice. 
Time spent on, and entries into, the open arms are an index of anxiety; the lower these indices, the more anxious the mouse is. Alternatively, a mouse that spends most of its time in the closed arms is classed as anxious. 
One of the problems of the plus-maze is that, while time spent on, and entries into, the open arms is a fairly unambiguous measure of anxiety, time in the central area is more difficult to interpret, although time spent here has been classified as &#x201C;decision making&#x201D;. In many tests central area time is a considerable part of the total test time.
Shepherd et al. produced an ingenious design to eliminate the central area, which they called the &#x201C;zero maze&#x201D;. However, although used by several groups, it has never been as widely adopted as the plus-maze. 
In the present article I describe a modification of the plus-maze design that not only eliminates the central area but also incorporates elements from other anxiety tests, such as the light-dark box and emergence tests. It is a linear series of four alleys, each having increasing anxiogenic properties. It has given similar results to the plus-maze in general. Although it may not be more sensitive than the plus-maze (more data is needed before a firm conclusion can be reached on this point), it provides a useful confirmation of plus-maze results which would be useful when, for example, only a single example of a mutant mouse was available, as, for example, in ENU-based mutagenesis programs.

The plus-maze measures anxiety-like behaviour in rodents. There are two opposite closed and two opposite open arms; anxious rodents avoid the open arms. The central area is neither completely open nor closed, so time spent here is ambiguous and difficult to interpret. Here a modification of the plus-maze protocol eliminating this area is described.

O Becos Teste sucessiva de ansiedade em camundongos e ratos

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

Comportamento

An Alternative to the Traditional Cold Pressor Test: The Cold Pressor Arm Wrap

Recently research on the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior has greatly increased. These advances have yielded insights into important questions ranging from the nature of stress&#39; influence on addiction1 to the role of stress in neural changes associated with alterations in decision-making2,3. As topics being examined by the field evolve, however, so too must the methodologies involved. In this article a practical and effective alternative to a classic stress induction technique, the cold pressor test (CPT), is presented: the cold pressor arm wrap (CPAW). CPT typically involves immersion of a participant&#39;s dominant hand in ice-cold water for a period of time4. The technique is associated with robust activation of the sympatho-adrenomedullary (SAM) axis (and release of catecholamines; e.g.&#160;adrenaline and noradrenaline) and mild-to-moderate activation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis with associated glucocorticoid (e.g.&#160;cortisol) release. While CPT has been used in a wide range of studies, it can be impractical to apply in some research environments. For example use of water during, rather than prior to, magnetic resonance imaging (MRI) has the potential to damage sensitive and expensive equipment or interfere with acquisition of MRI signal. The CPAW is a practical and effective alternative to the traditional CPT. Composed of a versatile list of inexpensive and easily acquired components, CPAW makes use of MRI-safe gelpacs cooled to a temperature similar to CPT rather than actual water. Importantly CPAW is associated with levels of SAM and HPA activation comparable to CPT, and can easily be applied in a variety of research contexts. While it is important to maintain specific safety protocols when using the technique, these are easy to implement if planned for. Creation and use of the CPAW will be discussed.

The cold pressor test is a classic stress induction task used in a wide range of research examining the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior. In this article, a practical and versatile alternative to the traditional cold pressor test is presented: the cold pressor arm wrap.

Uma alternativa ao teste tradicional de prensa fria: o envoltório do braço da prensa fria

Recently research on the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior has greatly increased. These advances have yielded insights into ...

Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food deprivation, and may introduce scent cue confounds. The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs. Specifically, subjects are required to avoid the arms previously used for escape during each testing day (working memory) as well as avoid the fixed arms, which never contain escape platforms (reference memory). Re-entries into arms that have already been used for escape during a testing session (and thus the escape platform has been removed) and re-entries into reference memory arms are indicative of working memory deficits. Alternatively, first entries into reference memory arms are indicative of reference memory deficits. We used this maze to compare performance of rats with neonatal brain injury and sham controls following induction of hypoxia-ischemia and show significant deficits in both working and reference memory after eleven days of testing. This protocol could be easily modified to examine many other models of learning impairment.

The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs.

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land (Barnes) mazes. Improved performance over sessions or trials is thought to reflect learning and memory of the escape cage/platform location. Considered less stressful than water mazes, the Barnes maze is a relatively simple design of a circular platform top with several holes equally spaced around the perimeter edge. All but one of the holes are false-bottomed or blind-ending, while one leads to an escape cage. Mildly aversive stimuli (e.g.&#160;bright overhead lights) provide motivation to locate the escape cage. Latency to locate the escape cage can be measured during the session; however, additional endpoints typically require video recording. From those video recordings, use of automated tracking software can generate a variety of endpoints that are similar to those produced in water mazes (e.g.&#160;distance traveled, velocity/speed, time spent in the correct quadrant, time spent moving/resting, and confirmation of latency). Type of search strategy (i.e.&#160;random, serial, or direct) can be categorized as well. Barnes maze construction and testing methodologies can differ for small rodents, such as mice, and large rodents, such as rats. For example, while extra-maze cues are effective for rats, smaller wild rodents may require intra-maze cues with a visual barrier around the maze. Appropriate stimuli must be identified which motivate the rodent to locate the escape cage. Both Barnes and water mazes can be time consuming as 4-7 test trials are typically required to detect improved learning and memory performance (e.g.&#160;shorter latencies or path lengths to locate the escape platform or cage) and/or differences between experimental groups. Even so, the Barnes maze is a widely employed behavioral assessment measuring spatial navigational abilities and their potential disruption by genetic, neurobehavioral manipulations, or drug/ toxicant exposure.

The dry-land Barnes maze is widely used to measure spatial navigation ability in response to mildly aversive stimuli. Over consecutive days, performance (e.g.&#160;latency to locate escape cage) of control subjects improves, indicative of normal learning and memory. Differences between rats and mice necessitate apparatus and methodology changes that are detailed here.

Barnes Estratégias Teste Labirinto com pequenas e grandes roedores Modelos

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of the most commonly used platforms to measure behaviors in animal models. It is a fast and relatively easy test that provides a variety of behavioral information ranging from general ambulatory ability to data regarding the emotionality of the subject animal. As it relates to rodent models, the procedure allows the study of different strains of mice or rats both laboratory bred and wild-captured. The technique also readily lends itself to the investigation of different pharmacological compounds for anxiolytic or anxiogenic effects. Here, a protocol for use of the open field maze to describe mouse behaviors is detailed and a simple analysis of general locomotor ability and anxiety-related emotional behaviors between two strains of C57BL/6 mice is performed. Briefly, using the described protocol we show Wild Type mice exhibited significantly less anxiety related behaviors than did age-matched Knock Out mice while both strains exhibited similar ambulatory ability.

A protocol is provided to use an Open Field Maze to access general locomotor activity, anxiety and emotionality in a laboratory mouse model.

A utilização do campo aberto Maze medir Locomotor e Ansiedade-like Comportamento no Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Board Modificado - Medir Comportamento, Cognição e Interação Social em camundongos e ratos

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

O Double-H labirinto: um teste comportamental robusto para Aprendizado e Memória em roedores

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris Water Maze Teste: Otimização para Mouse e Strain Testing Ambiente

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for examining how rats learn to use a place- or response-learning to successfully navigate in an open-field arena. Additionally, this protocol describes how the OFTM differs from other behavioral maze paradigms that are commonly used to study spatial learning in rodents. The OFTM described in this article was adapted from the one previously described by Cole, Clipperton, and Walt (2007). Specifically, the OFTM was created to test spatial learning in rodents without the experimenter having to consider how &#8220;stress&#8221; might play a role as a confounding variable. Experiments have shown that stress-alone can significantly affect cognitive function1. The representative results section contains data from an experiment that used the OFTM to examine the effects of estradiol treatment on place- and response-learning in adult female Sprague Dawley rats2. Future studies will be designed to examine the role of the hippocampus and striatum in place- and response-learning in the OFTM.

The Open-field Tower Maze (OFTM) is a maze created to study the behavioral and neural mechanisms of spatial learning (e.g., place- or response-learning) in rats. This maze is especially useful for experimenters who want to use a non-stressful maze paradigm to investigate spatial learning in their research.

Coloque e Aprendizagem Response no Open-campo Torre Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

An Objective and Child-friendly Assessment of Arm Function by Using a 3-D Sensor

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment of muscle functions is an essential and important, although challenging, prerequisite for successful clinical trials. Current clinical rating scales restrain the movement abnormalities to certain predefined coarse-grained individual items. The Kinect 3-D sensor has emerged as a low-cost and portable motion sensing technology used to capture and track people&#39;s movement in many medical and research fields. A novel approach using this 3-D sensor was developed and a game-like test was designed to objectively measure the upper limb function of patients with SMA. The prototype test targeted joint movement capability. While sitting in a virtual scene, the patient was instructed to extend, flex, and lift the whole arm in order to reach and place some objects. Both kinematic and spatiotemporal characteristics of upper limb movement were extracted and analyzed, e.g., elbow extension and flexion angles, hand velocity, and acceleration. The first study included a small cohort of 18 ambulant SMA patients and 19 age- and gender-matched healthy controls. A comprehensive analysis of arm movement was achieved; however, no significant difference between the groups were found due to the mismatch of patient&#39;s capability and the test difficulty. Based on this experience, a second version of the test consisting of a modified version of the first game with increased difficulties and a second game targeting muscle endurance were designed and implemented. The new test has not been conducted in any patient groups yet. Our work has demonstrated the potential capability of the 3-D sensor in assessing such muscle function and suggested an objective approach to complement the clinical rating scales.

An objective measure of muscle functions is challenging especially in children. Based on a commercially available digital 3-D sensor, a child-friendly gaming test was developed to assess upper limb function for clinical trials.

Uma avaliação objetiva e criança-amigável da função do braço usando um Sensor 3D

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment ...