JoVE Journal

Genetics

Masz pełny dostęp do tej treści za pośrednictwem

Nanyang Technological University

Saccharomyces cerevisiae Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

The protocol described here is based on the genome-wide quantification of newly synthesized mRNA purified from yeast cells labeled with 4-thiouracil. This method allows to measure mRNA synthesis uncoupled from mRNA decay and, thus, provides an accurate measurement of RNA polymerase II transcription.

Rozdziały w tym wideo

0:04

Title

0:41

Cell Culturing

1:37

4tU Labeling with S. pombe as a Spike-in

3:20

RNA Extraction and DNase Treatment

4:30

Thiol-specific Biotinylation of Newly Synthesized RNA

6:05

Purification of Newly Synthesized Fraction from Total and Unlabeled RNA Using Streptavidin-coated Magnetic Beads

7:18

Results: Quantification of Newly Synthesized mRNA as a Proxy for RNA Polymerase II Activity

8:52

Conclusion

Powiązane Filmy

Używamy plików cookie, aby ulepszyć Twoje wrażenia z korzystania z naszej witryny.

Kontynuując korzystanie z naszej witryny lub klikając „Kontynuuj”, wyrażasz zgodę na akceptację naszych plików cookie.