circadian 타이밍, 선호도 및 동작에 있는 개별적인 다름을 측정할 때 일관성 없는 용어 및 방법론이 있습니다. 이 프로토콜은 circadian 표현형을 분류하고 주어 성능 테스트를 수행하기 위한 골드 표준 기술을 결합합니다. 음,이 프로토콜의 주요 장점은 우리가 정확하게 circadian 단계와 수면 행동을 모두보고 circadian 표현형을 평가 할 수 있다는 것입니다, 이것은 자신의 가정 환경에서 개인과 함께 수행 할 수 있습니다.
참가자 과정을 시연하는 것은 써리 대학의 셰릴 이셔우드입니다. 포함 기준을 충족하는 참가자들에게 첫 모임에 참석하도록 권유한다. 그리고 실험에 참여하는 데 관심이있는 모든 참가자로부터 서면 통보 된 동의를 얻습니다.
참가자들에게 수면, 절전 모드 변수 및 직장 및 자유 일에 대한 가벼운 노출의 개별적인 차이를 평가하는 뮌헨 크로노타입 설문지를 작성하도록 요청하십시오. 생리학적 샘플 수집의 경우 참가자 ID 번호, 아침 또는 저녁 및 개별 샘플링 번호가 있는 7개의 밀리리터 폴리프로필렌 수집 튜브를 미리 라벨로 지정합니다. 다양한 색상의 라벨을 아침과 저녁 샘플링 튜브에 사용하여 샘플을 구별할 수 있습니다.
아침과 저녁 프로토콜에 대한 샘플 수집 레코드 시트를 준비하여 참가자 ID 번호, 계절 별 정보 날짜 및 사진 기간을 계산하는 위치를 포함하여 참가자가 샘플을 채취한 후 타임스탬프를 찍을 수 있도록 합니다. 보편적 인 시간은 .m p.m에 문제가 없는지 확인하는 데 사용되는 것이 중요합니다.
시간 코드. 타액 샘플을 수집하는 방법을 시연하고, 침대에서 나오기 직전에 아침 샘플을 획득하는 것이 필수적이며, 저녁 샘플을 희미하게, 바람직하게는 적색광으로 획득해야 한다고 참가자들에게 알려줍니다. 연구원은 이것을 측정해야 합니다, 가능하면.
참가자에게 경보가 필요 없이 잠자리에 들고 선호하는 시간에 깨어날 수 있는 무료 날에 샘플을 수집하도록 지시합니다. 각 참가자에게 손목 활동 모니터 또는 액티그래프를 최소 2주 동안 착용하여 휴식 및 활동 패턴 및 연구 기간 내내 가벼운 데이터를 수집하도록 합니다. 각 액티그래프를 설정하여 휴식 및 활동 분석을 위한 액티그래피 데이터를 수집하고 필요한 내용에 따라 매개 변수를 설정합니다.
참가자들에게 액티그래프를 사용하는 방법을 지시하고, 지배적이지 않은 손목에 착용하고, 슬리브가 장치를 덮지 않도록 하여 가벼운 데이터를 수집할 수 있도록 합니다. 액티그래피와 병행하여, 수면을 용이하게 하기 위해, 액티그래피 데이터에서 유래한 웨이크 분석, 각 참가자에게 매일 완성할 수 있는 수면 일기를 준다. 코티솔 각성 반응 아침 샘플 수집의 경우, 참가자는 침대에 있는 동안 깨어나면 샘플을 수집하여 적절하게 표시된 샘플 튜브에 넣고, 첫 시간 동안 15분마다, 다음 1~2시간 동안 30분마다 평가하도록 한다.
모든 샘플을 수집한 경우, 참가자들은 연구팀이 수집할 때까지 섭씨 영하 20도의 냉동실에 샘플을 보관해야 합니다. 희미한 빛 멜라토닌 발병의 경우, 참가자는 희미한 빛 아래 실내에 앉아 있어야하며, 습관적인 취침 전에 3~4시간 전에 30분마다 적절한 유리병에 타액 샘플을 수집하여 상습적인 취침 후 1~2시간 까지 수집해야 합니다. 참가자는 각 샘플을 채취한 시간도 기록해야 합니다.
가능한 경우, 연구원은 강도와 스펙트럼 구성을 모니터링하기 위해 빛 상태를 측정해야합니다. 저녁 샘플링의 경우, 참가자들은 희미한 조명 조건에서 실내에 앉아 있는 것의 중요성을 이해하는 것이 필수적입니다. 참가자는 다음 샘플을 수집하기 전에 15 분 동안 다시 앉아있는 한 화장실을 사용하거나 샘플 사이에 카페인이 없는 음료를 섭취 할 수 있습니다.
다른 모든 객실에 동일한 조명 조건을 갖도록 하여 참가자가 샘플링 기간 동안 조광, 바람직하게는 적색광에 남아 있는지 확인합니다. 샘플 사이에 음식이 소비되는 경우, 참가자는 다음 샘플의 수집 15 분 전에 물로 입을 씻어야합니다. 모든 샘플을 채취하면 참가자는 연구팀이 수집할 때까지 섭씨 영하 20도의 냉동실에 샘플을 보관해야 합니다.
주가지 성능 테스트는 가정이나 실험실에서 수행 될 수 있으며 특정 클럭 시간에 조사되는 시간 포인트 수에 따라 연구 가설에 따라 배치되어야합니다. 타액 샘플 과 수면 일기를 검색하면 매일 취침 시간을 추출하고 수면 일기에서 시간을 깨우고 이러한 데이터를 제조업체 소프트웨어에 입력하여 연구와 관련된 액티피티그래픽 변수를 얻습니다. 참가자의 타액 샘플에서 멜 라 토 닌과 코 티 솔 농도 각 시점에서 확인 하려면 표준 프로토콜에 따라 각 참가자의 샘플와 함께 무선 면역 분석 작업을 수행.
멜 라 토 닌 농도 3 개의 기준 초기 타 액 컬렉션의 두 개의 표준 편차를 초과 하는 시간 점으로 개별 DlMO를 계산. 코티솔 피크를 아침 코티솔 각성 반응 중에 기록된 가장 높은 코티솔 농도의 시간으로 계산합니다. 변수는 초기 circadian 표현형 범주에 있는 경우 0으로 할당되어야 하며, 하나는 중간 circadian 표현형 범주에 있는 경우, 두 개는 후기 circadian 표현형 범주에 있는 경우.
수집된 5개의 변수에서 총 circadian 표현형 점수를 계산합니다. 이 점수에 따라 하위 범주는 표에 표시된 대로 결정할 수도 있습니다. 초기 circadian 표현형으로 분류 된 모든 참가자는 0에서 1 사이의 점수를 가졌습니다.
그리고 모든 후기 circadian 표현형 참가자는 8에서 10 사이 점수를 가졌습니다. 본 대표적인 실험의 결과를 확인하기 위해, 각 circadian 표현형 변수에 대해 그룹 평균을 비교하였다. 다른 수면 변수는 수면 기간, 효율성 및 대기 시간을 포함하여 그룹 간에 크게 다르지 않았습니다.
자유 일에 교정 된 중간 수면은 희미한 빛 멜 라 토닌 발병, 코티솔 각성 반응의 피크 시간, 수면 발병 및 일어나 시간과 크게 상관 관계가 있었습니다. 이 데이터는 다른 circadian 표현형 단이 그들의 잠 개시에 있는 명확한 다름을 보여주었다는 것을, 오프셋 시간, 뿐만 아니라 그들의 생리적인 변수에서. 카롤린스카 졸음 스케일 및 정신 운동 경계 작업에 대한 전체 그룹 수준에서 중요한 주부 변이가 관찰되었다.
각 그룹이 별도로 분석되었을 때, 주관적인 졸음은 저녁에 높은 졸음을 보고하고, 아침에 LCP의 최고 졸음을 보고하는 와 가진 중요한 주관적인 졸음이 중요한 주각 변이를 보여주었습니다. 정신 운동 경계 성능의 경우, 상당한 주부 변화는 LcP에서 발견되었지만 EP에서는 발견되지 않았습니다. 프로토콜의 각 단계를 명확하게 설명하고 참가자가 설치 인터뷰 중에 학습 준수를 극대화할 수 있도록 이해하는 것이 중요합니다.
참가자가 circadian 표현형으로 분류되면, 성능 테스트 요소는 연구 목표에 따라 다른 작업을 사용하여 시간 점을 증가시킴으로써 수정, 타이밍 변경, 시간 포인트를 증가시키거나 변경될 수 있습니다. 이 프로토콜은 포함 및 배제 기준을 위한 선별 도구로 circadian 표현형의 정확하고 철저한 평가를 요구하는 모든 연구 결과에서 이용될 수 있고, 또한 시간 민감한 연구에서 circadian 표현형을 통제하기 위하여 이용될 수 있습니다. 이 접근법은 금 표준 생물학적 위상 마커를 객관적이고 주관적인 수면 패턴과 결합하여 개별 circadian 표현형을 결정하는 상세한 방법을 제공합니다.
