この作品は、スイスの国立科学財団助成 150271 によって支えられました。

、スイス連邦獣医局、スイス連邦共和国 (FR 2015/58)、フリブール州の獣医のオフィスによって承認されたこの実験的プロトコル。
 注: 3.2 2.8 キロの間の重量を量る雄 NZW ウサギが使用されました。動物は、従来の条件 (12 h 光と暗いサイクル、アドリブの水と食糧を提供) の下で収容されました。バルーン侵食前に動物は 1 週間中に、彼らは通常の食事の飼料で飼育した順応しました。順化 1 週間後ウサギは高脂肪 (8.6%) から成る動脈硬化の食事療法に切り替えていたし、全体の調査の持続期間のための 205 mg/kg (1%) のコレステロールの食事療法の飽和脂肪酸。左総腸骨動脈のバルーン傷害を行ったダイエット開始後 1 週間、2 週間または 4 週間バルーン傷害の後の動物が犠牲になった。
 1 術前手順 <ol><li>ガラス ビーズ滅菌器やその他機器に使用する前にすべての手術器具を滅菌します。</li>。
	<li>準備とバルーン カテーテルのアセンブリをチェックします。
	<ol><li>アタッチ 1 mL ルアーロック シリンジはバルーンカテーテルのルアーロック部分に食塩に満ちています。閉じ込められた空気の欠席の理由を慎重に監視します。漏れの注射器のプランジャーを押して適切なバルーンの膨張を確認してください</li>。
	</ol></li> <li>ウサギの重量を量るし、オンに 37 に thermopad ° C</li>
	<li>/Ml 0.01 mg/kg の投与量を皮下注入 0.3 mg の濃度のブプレノルフィン ソリューションを使用します</li>。
	<li>麻酔 5% イソフルランと 10-15 分のための部屋に誘導 5 L/min O 2 ウサギ</li>
	<li>は、手術のプラットフォーム上に保存加熱パッドに麻酔下のウサギを配置します。パッチや温度、呼吸、および心電図監視にクリップを配置します</li>。
	<li>は、ウサギの鼻をマシンに適した麻酔マスクに接続します。イソフルラン (2.5 L/min O 2 4.0%) で麻酔を維持します。(筋肉の緊張の欠如とギャグと耳介反射の喪失によって示される) 適切な anesthetization を確認します</li>。
	<li>は、角膜の乾燥を防ぐために両方の目に眼軟膏を適用されます。滅菌手術用シートで公開される下肢のみでウサギをドレープします</li>。
</ol> 2。外科プロトコル <ol><li>動物のバリカンを使用して膝の関節のすぐ下の腹側領域から髪を削除します</li>。
	<li>皮膚をきれいにし緩い毛を取除く適切な消毒剤との区域を綿棒します</li>。
	<li>伏在動を見つけて、約 1.5 cm の小さな皮膚切開は、メスを使用して長さ</li>。
	<li>大腿静脈と大腿神経を損傷することがなく小さなカーブタイプ鉗子と伏在動のごく一部を公開します</li>。
	<li>は、伏在動の下に 2 つの緩い合字ループ (5-0 絹糸) を置き、動脈の遠位端に向かって 1 つの合字ループを結ぶ。合字の内腸骨動脈から血流を停止する上記の微小血管クランプを配置します</li>。
	<li>局所動脈を拡張し、血管攣縮を防ぐためにパパベリンの一滴を適用します</li>。
	<li>タイの合字の助けを借りて伏在動を持ち上げて確認、24 を使用して小さな切開切開ゲージ針します</li>。
	<li>微細鉗子で切開フラップを上げるし、動脈の内腔に静脈ピックや誘導針をゆっくりと挿入します</li>。
	<li>は、2 フランス語肺葉動脈塞栓を伏在動脈に挿入します。静脈ピックおよび血管クランプ削除します</li>。
	<li>6 のマーク (20-25 cm) の位置に大体対応するまでカテーテルを進める 2 5 cm 腸骨の分岐上</li>。
	<li>0.1 mL 通常生理食塩水 1 mL の注射器を使用して、または 6 のわずかな圧力で風船を膨らませる 16 , 22 で説明するように規制手動空気入れを使用して atm</li>。
	<li>鉗子でバルーンカテーテルを押しながら戻って腸骨の arterytoward を 6 cm カテーテルを回転させながら挿入のポイントをドラッグします</li>。
	<li>注射器のピストンを引いてバルーンをしぼませる</li>。
	<li>完全な内皮細胞の侵食を確実に 2.10 に 2.13 の手順を 3 回繰り返します</li>。
	<li>カテーテルを外し、すぐに出血を止めるため切開の真上結紮ループを結ぶ</li>。
	<li>は傷の周囲の適切な防腐剤すべてを適用し、綿棒に血の塊。5-0 縫合糸で皮膚切開を閉じるし、消毒ポビドン ヨード溶液による手術サイト</li>。
	<li>手順 2.1 に 2.16 側のカテーテルを用いた腸骨</li>。
	<li>目から眼軟膏を綿棒します</li>。
</ol> 3。術後ケア <ol><li>管理 sulfadoxine 40 mg/kg とトリメトプリム 8 mg/kg または手術後すぐに他の適した抗生物質</li>。
	<li>麻酔回復期間中にきれいなオートクレーブ檻に入れられた熱パッド上にウサギを維持します</li>。
	<li>監視パッチとクリップを削除します</li>。
	<li>回復後、ホームの檻にウサギを戻る。ブプレノルフィン 0.05 を皮下注入 - 0.1 mg/kg のポスト - 48 h. もう 2 週間か 4 週間の続行動脈硬化の食事療法のすべての 6-12 h 作動します</li>。
</ol> 4。組織の収穫とプラークの組成分析 <ol><li>(初期の薄いプラーク) の 2 週間、3 週間バルーン傷害の後前述のように同様の方法でイソフルランを使用してウサギを麻酔します</li>。
	<li>胸腔内を開き、intracardial デスメタルでウサギを安楽死させる</li>。
	<li>は、 23 で説明したように総腸骨動脈を分離します。
	<ol><li>簡単に、腹部を開くし、後腹膜を公開します。腸骨の分岐に向けて大動脈をトレースし、分岐上に結ぶ。慎重に公開し、左右の腸骨動脈を分離する周囲の組織を削除します</li>。
	</ol></li> <li>Dissect 両方の腸骨動脈をして冷たいリン酸緩衝生理食塩水でそれらを浸します。鉗子の助けを借りて、血栓を除去します。動脈内プラークの厚さを特徴付けるための 4-6 セグメントに各総腸骨動脈を分割します</li>。
	<li>すぐに凍結する液体窒素を使用して最適な切削温度化合物を含む金型で動脈セグメントを埋め込み、クライオスタットを使用して 24-70 ° c. の準備 5 μ m 厚いセクションにそれを維持します</li>。
	<li>実行組織や蛍光抗体の免疫染色形態計測、プラークの脂質および細胞内容 10 , 25 で説明したようします 。
	注: 簡単に言えば、リン酸緩衝生理食塩水 (PBS) で動脈のセクションを洗い、0.2% を使用してを permeabilize トリトン。PBS のセクションを洗い、抗 α-SM アクチン (レバレッジ) や RAM11 抗体 (レバレッジ) 37 ° C で 1 時間のセクション 30 分加温 2% ウシ血清アルブミンと非特定のサイトをブロックします。PBS でセクションをすすぎ、PBS で再び 37 ° c. の洗浄で 30 分の適切な二次抗体とインキュベートしてヘキストを追加 (5 μ g/mL) 10 分間核の検出にします</li>。
</ol>

<ol>
	<li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2015+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 131, e29-e322 (2015).</li><li>Boone, L. R., Brooks, P. A., Niesen, M. I., Ness, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+resistance+to+dietary+cholesterol.">Mechanism of resistance to dietary cholesterol.</a> J Lipids. 2011, 101242 (2011).</li><li>Kapourchali, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+atherosclerosis.">Animal models of atherosclerosis.</a> World J Clin Cases. 2, 126-132 (2014).</li><li>Carter, C. P., Howles, P. N., Hui, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+variation+in+cholesterol+absorption+efficiency+among+inbred+strains+of+mice.">Genetic variation in cholesterol absorption efficiency among inbred strains of mice.</a> J Nutr. 127, 1344-1348 (1997).</li><li>Kolodgie, F. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypercholesterolemia+in+the+rabbit+induced+by+feeding+graded+amounts+of+low-level+cholesterol.+Methodological+considerations+regarding+individual+variability+in+response+to+dietary+cholesterol+and+development+of+lesion+type.">Hypercholesterolemia in the rabbit induced by feeding graded amounts of low-level cholesterol. Methodological considerations regarding individual variability in response to dietary cholesterol and development of lesion type.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 16, 1454-1464 (1996).</li><li>Singh, V., Tiwari, R. L., Dikshit, M., Barthwal, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+to+study+atherosclerosis:+a+mechanistic+insight.">Models to study atherosclerosis: a mechanistic insight.</a> Curr Vasc Pharmacol. 7, 75-109 (2009).</li><li>Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+atherosclerosis+in+rabbits.">Experimental atherosclerosis in rabbits.</a> Arq Bras Cardiol. 95, 272-278 (2010).</li><li>Baumgartner, H. R., Studer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Effects+of+vascular+catheterization+in+normo-+and+hypercholesteremic+rabbits].">[Effects of vascular catheterization in normo- and hypercholesteremic rabbits].</a> Pathol Microbiol (Basel). 29, 393-405 (1966).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+activation+of+vascular+cells+and+leukocytes+in+the+rabbit+aorta+after+balloon+injury.">Sustained activation of vascular cells and leukocytes in the rabbit aorta after balloon injury.</a> Circulation. 88, 1788-1803 (1993).</li><li>Phinikaridou, A., Hallock, K. J., Qiao, Y., Hamilton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+rabbit+model+of+human+atherosclerosis+and+atherothrombosis.">A robust rabbit model of human atherosclerosis and atherothrombosis.</a> J Lipid Res. 50, 787-797 (2009).</li><li>Nakazawa, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-eluting+stent+safety:+findings+from+preclinical+studies.">Drug-eluting stent safety: findings from preclinical studies.</a> Expert Rev Cardiovasc Ther. 6, 1379-1391 (2008).</li><li>Aikawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+lowering+by+diet+reduces+matrix+metalloproteinase+activity+and+increases+collagen+content+of+rabbit+atheroma:+a+potential+mechanism+of+lesion+stabilization.">Lipid lowering by diet reduces matrix metalloproteinase activity and increases collagen content of rabbit atheroma: a potential mechanism of lesion stabilization.</a> Circulation. 97, 2433-2444 (1998).</li><li>Jeanpierre, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+lipid+lowering+modifies+plaque+phenotype+in+rabbit+atheroma+after+angioplasty:+a+potential+role+of+tissue+factor.">Dietary lipid lowering modifies plaque phenotype in rabbit atheroma after angioplasty: a potential role of tissue factor.</a> Circulation. 108, 1740-1745 (2003).</li><li>Durand, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+of+ruptured+plaques+in+the+rabbit+with+ultrasmall+superparamagnetic+particles+of+iron+oxide.">Magnetic resonance imaging of ruptured plaques in the rabbit with ultrasmall superparamagnetic particles of iron oxide.</a> J Vasc Res. 44, 119-128 (2007).</li><li>Stadius, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+and+cellular+characteristics+of+the+iliac+artery+response+to+acute+balloon+injury.+An+angiographic,+morphometric,+and+immunocytochemical+analysis+in+the+cholesterol-fed+New+Zealand+white+rabbit.">Time course and cellular characteristics of the iliac artery response to acute balloon injury. An angiographic, morphometric, and immunocytochemical analysis in the cholesterol-fed New Zealand white rabbit.</a> Arterioscler Thromb. 12, 1267-1273 (1992).</li><li>Khanna, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholesterol+diet+withdrawal+leads+to+an+initial+plaque+instability+and+subsequent+regression+of+accelerated+iliac+artery+atherosclerosis+in+rabbits.">Cholesterol diet withdrawal leads to an initial plaque instability and subsequent regression of accelerated iliac artery atherosclerosis in rabbits.</a> PLoS One. 8, e77037 (2013).</li><li>Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+resveratrol+on+intimal+hyperplasia+after+endothelial+denudation+in+an+experimental+rabbit+model.">Effect of resveratrol on intimal hyperplasia after endothelial denudation in an experimental rabbit model.</a> Life Sci. 68, 153-163 (2000).</li><li>Li, M., Zhang, Y., Ren, H., Zhang, Y., Zhu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+clopidogrel+on+the+inflammatory+progression+of+early+atherosclerosis+in+rabbits+model.">Effect of clopidogrel on the inflammatory progression of early atherosclerosis in rabbits model.</a> Atherosclerosis. 194, 348-356 (2007).</li><li>Nakazawa, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+polymer-based+comparator+drug-eluting+stents+using+a+rabbit+model+of+iliac+artery+atherosclerosis.">Evaluation of polymer-based comparator drug-eluting stents using a rabbit model of iliac artery atherosclerosis.</a> Circ Cardiovasc Interv. 4, 38-46 (2011).</li><li>Van Dyck, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolute+and+Xience+V+polymer-based+drug-eluting+stents+compared+in+an+atherosclerotic+rabbit+double+injury+model.">Resolute and Xience V polymer-based drug-eluting stents compared in an atherosclerotic rabbit double injury model.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 81, E259-E268 (2013).</li><li>Abran, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validating+a+bimodal+intravascular+ultrasound+(IVUS)+and+near-infrared+fluorescence+(NIRF)+catheter+for+atherosclerotic+plaque+detection+in+rabbits.">Validating a bimodal intravascular ultrasound (IVUS) and near-infrared fluorescence (NIRF) catheter for atherosclerotic plaque detection in rabbits.</a> Biomed Opt Express. 6, 3989-3999 (2015).</li><li>Kanamasa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+tissue+plasminogen+activator+prevents+intimal+hyperplasia+after+balloon+angioplasty+in+hypercholesterolemic+rabbits.">Recombinant tissue plasminogen activator prevents intimal hyperplasia after balloon angioplasty in hypercholesterolemic rabbits.</a> Jpn Circ J. 60, 889-894 (1996).</li><li>Pai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+in-stent+restenosis+in+rabbit+iliac+arteries+with+photodynamic+therapy.">Inhibition of in-stent restenosis in rabbit iliac arteries with photodynamic therapy.</a> Eur J Vasc Endovasc Surg. 30, 573-581 (2005).</li><li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryosectioning+tissues.">Cryosectioning tissues.</a> CSH Protoc. 2008, (2008).</li><li>Chaytor, A. T., Bakker, L. M., Edwards, D. H., Griffith, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Connexin-mimetic+peptides+dissociate+electrotonic+EDHF-type+signalling+via+myoendothelial+and+smooth+muscle+gap+junctions+in+the+rabbit+iliac+artery.">Connexin-mimetic peptides dissociate electrotonic EDHF-type signalling via myoendothelial and smooth muscle gap junctions in the rabbit iliac artery.</a> Br J Pharmacol. 144, 108-114 (2005).</li><li>Zhang, W., Trebak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+balloon+injury+and+intraluminal+administration+in+rat+carotid+artery.">Vascular balloon injury and intraluminal administration in rat carotid artery.</a> J Vis Exp. (94), (2014).</li><li>Maillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+percutaneous+adenovirus-mediated+Gax+gene+delivery+to+the+arterial+wall+in+double-injured+atheromatous+stented+rabbit+iliac+arteries.">Effect of percutaneous adenovirus-mediated Gax gene delivery to the arterial wall in double-injured atheromatous stented rabbit iliac arteries.</a> Gene Ther. 7, 1353-1361 (2000).</li><li>Sharif, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-eluting+stents:+adenovirus-mediated+delivery+of+eNOS+to+the+blood+vessel+wall+accelerates+re-endothelialization+and+inhibits+restenosis.">Gene-eluting stents: adenovirus-mediated delivery of eNOS to the blood vessel wall accelerates re-endothelialization and inhibits restenosis.</a> Mol Ther. 16, 1674-1680 (2008).</li><li>Lee, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+rabbit+model+for+a+preclinical+comparison+of+coronary+stent+types+in-vivo.">Development of a rabbit model for a preclinical comparison of coronary stent types in-vivo.</a> Korean Circ J. 43, 713-722 (2013).</li><li>Tulis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+carotid+artery+balloon+injury+model.">Rat carotid artery balloon injury model.</a> Methods Mol Med. 139, 1-30 (2007).</li><li>Asada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+inflation+pressure+of+balloon+catheter+on+vascular+injuries+and+subsequent+development+of+intimal+hyperplasia+in+rabbit+aorta.">Effects of inflation pressure of balloon catheter on vascular injuries and subsequent development of intimal hyperplasia in rabbit aorta.</a> Atherosclerosis. 121, 45-53 (1996).</li><li>Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+atherosclerosis+in+rabbits.">Experimental atherosclerosis in rabbits.</a> Arq Bras Cardiol. 95, 272-278 (2010).</li><li>Waksman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PhotoPoint+photodynamic+therapy+promotes+stabilization+of+atherosclerotic+plaques+and+inhibits+plaque+progression.">PhotoPoint photodynamic therapy promotes stabilization of atherosclerotic plaques and inhibits plaque progression.</a> J Am Coll Cardiol. 52, 1024-1032 (2008).</li><li>Fernandez-Parra, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetic+Study+of+Paclitaxel+Concentration+after+Drug-Eluting+Balloon+Angioplasty+in+the+Iliac+Artery+of+Healthy+and+Atherosclerotic+Rabbit+Models.">Pharmacokinetic Study of Paclitaxel Concentration after Drug-Eluting Balloon Angioplasty in the Iliac Artery of Healthy and Atherosclerotic Rabbit Models.</a> J Vasc Interv Radiol. 26, 1380-1387 (2015).</li><li>Dussault, S., Dhahri, W., Desjarlais, M., Mathieu, R., Rivard, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elsibucol+inhibits+atherosclerosis+following+arterial+injury:+multifunctional+effects+on+cholesterol+levels,+oxidative+stress+and+inflammation.">Elsibucol inhibits atherosclerosis following arterial injury: multifunctional effects on cholesterol levels, oxidative stress and inflammation.</a> Atherosclerosis. 237, 194-199 (2014).</li><li>Manderson, J. A., Mosse, P. R., Safstrom, J. A., Young, S. B., Campbell, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+catheter+injury+to+rabbit+carotid+artery.+I.+Changes+in+smooth+muscle+phenotype.">Balloon catheter injury to rabbit carotid artery. I. Changes in smooth muscle phenotype.</a> Arteriosclerosis. 9, 289-298 (1989).</li><li>Miyake, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+neointimal+formation+after+angioplasty+using+nuclear+factor-kappaB+decoy+oligodeoxynucleotide-coated+balloon+catheter+in+rabbit+model.">Prevention of neointimal formation after angioplasty using nuclear factor-kappaB decoy oligodeoxynucleotide-coated balloon catheter in rabbit model.</a> Circ Cardiovasc Interv. 7, 787-796 (2014).</li><li>Fulcher, J., Patel, S., Nicholls, S. J., Bao, S., Celermajer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+for+serial+in+vivo+imaging+of+aortic+plaque+in+the+rabbit:+a+preliminary+experience.">Optical coherence tomography for serial in vivo imaging of aortic plaque in the rabbit: a preliminary experience.</a> Open Heart. 2, e000314 (2015).</li><li>Abela, O. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plaque+Rupture+and+Thrombosis:+the+Value+of+the+Atherosclerotic+Rabbit+Model+in+Defining+the+Mechanism.">Plaque Rupture and Thrombosis: the Value of the Atherosclerotic Rabbit Model in Defining the Mechanism.</a> Curr Atheroscler Rep. 18, 29 (2016).</li><li>Yamashita, A., Asada, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rabbit+model+of+thrombosis+on+atherosclerotic+lesions.">A rabbit model of thrombosis on atherosclerotic lesions.</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 424929 (2011).</li></ol>

著者は競合する金銭的な利益を宣言しません。

ウサギ腸骨動脈のアテローム性動脈硬化モデルは動脈硬化研究で広く使用されます。このプロトコルでウサギは急速にコレステロールの食事療法のみで開発された自発的な病変と比較してより厳しいと高度なプラクを開発しました。重要なは、動物は手術から迅速に回復します。
粥状動脈硬化のための主要な刺激は、血管内皮細胞を傷つける、distends 容器壁26バルーンカテーテルによる機械的損傷です。この手順は、マクロファージの募集そして脂質蓄積 hypercholestorolemic ダイエット、血管平滑筋細胞の遊走および増殖、強化されたマトリックスに関連付けられている炎症によって特徴づけられる改造反応を誘導します。合成、および時間依存の方法15,16で侵襲的新生内膜の確立。バルーンカテーテルを挿入するプロシージャの最も重要な部分です。強制的にバルーンを挿入することを避けるために注意を行使する必要があります。末梢の伏在動脈、総腸骨動脈にアクセスするための使用は、技術を簡素化します。総腸骨動脈は、頸動脈カット-下り27,28を前述のようを介してアクセスすることができます。しかし、頚動脈経由で総腸骨動脈を評価する高度な外科の専門知識と血管造影装置などの追加機器が必要です。また、致命的な出血29につながる内頚静脈への損傷のようなプロシージャ関連の合併症に関連付けられます。パパベリンなど局所血管拡張薬の使用は、血管を広げるし、バルーン カテーテル30に対する動脈壁の抵抗を削減するのに役立ちます。これらに直接の関連が新生内膜形成31インフレ圧力とバルーンのサイズを慎重に考慮する必要があります。希望のレベルよりも高いレベルにバルーンの過膨満感は、血管壁の破裂につながる可能性があります。これは血と堅牢な血栓形成内腔と外側表面26両方の漏れの可能性があります。
動物は、その血管内皮細胞障害をようにバルーン傷害の前に 1 〜 2 週間の豊富な食事療法が高コレステロール血症の設定で発生した脂質を供給しなければなりません。また新しいダイエットに適応する動物に役立ちます。この手法は、ウサギの高度なプラクを誘導する、プラークの形態を観察した人間から異なります。自発の人間の病変は、そのまま内部弾性層32サブ内皮の領域に制限されます。ここでは、4 週間は線維化のコアを示さなかったまで研究の実施。アテローム性動脈硬化病変のまま実質的なマクロファージ浸潤と脂肪の連続のようです。
多くの小規模および大規模な動物モデルは、粥状動脈硬化6を理解するために使用されています。バルーン傷害ウサギ腸骨動脈モデルは、イメージング10,32,33プラーク進化、新規ドラッグデリバリー システム新しい治療薬の効果を研究に使用されています。単一または複数のバルーンの injurieshave は総腸骨動脈34,35, 頸動脈36,37, と大動脈10,38で行われています。本手法の利点は、頚動脈の使用と比較して大きなプラークは、ボリュームと厚さの開発です。さらに、対側の腸骨がコントロールとして使用され、したがって29動物間の変動が減少します。ウサギ腸骨動脈バルーン傷害は、安全かつ簡単にここで説明した方法を使用して実行できます。プラークは時間依存の方法で成長する、動脈の全長にわたって均一です。他の動脈硬化家兎モデルは渡辺遺伝性高脂血症 (WHHL) モデル、低密度リポタンパク質受容体欠乏症と遺伝子組み換え動物モデルなども開発されています。バルーン損傷モデルは、定義されているサイトに病変を生成する WHLL ウサギにも適用できます。
ウサギ腸骨動脈とひと冠動脈プラークの違いがあります。確かに、高度な動脈硬化病変を開発し、人間39で観測されたプラーク破裂のモデルを作成する試みでいくつかの代替手順を設けています。たとえば、不安定プラーク形成はバルーン傷害16を施行したウサギで 8 週後コレステロール食を排除することによって誘導されました。その他の変更手続きは、プラーク破裂のメカニズム、動脈硬化で血栓形成と血栓の成長を評価するラッセルクサリヘビ毒10とそれに続く繰り返しバルーン傷害40など薬理学的トリガーを使用します。血管。ラッセルクサリヘビ毒は、血栓症につながる凝固カスケードを活性化する酵素を含んでいます。プラークの組織因子40によるトロンビン生成に繰り返しバルーン傷害の結果。家兎モデルを含む動物モデル結果を人間に完全に推定可能性がありますないことに留意。しかし、これらのモデルを評価し、新しい薬理学的介入の有効性を比較するための便利なツールがあります。慎重に外挿は、病因、病態、ひと動脈硬化の治療の知識を広げるため高コレステロール血症とプラークの組成の学位に関連して行う必要があります。ここにモデル提示プラーク進化に関与するメカニズムを研究し、プラーク安定化/回帰に向けて新たな抗動脈硬化治療法の効果を検討するのに役立ちます。

動脈硬化性プラークの破裂は、先進国1死の主要な原因の 1 つです。過去十年にわたって研究は、プラークの進展に関与するいくつかの分子・細胞メカニズムを展開してきた、病気の進行の複雑なメカニズムを解明するだけでなく、新しいテストにも努力が必要まだ続けている治療近づきます。動脈硬化症を研究するいくつかの動物モデルを提案されています。遺伝子操作、コレステロール供給または機械的内皮損傷動脈硬化マウス、ウサギ、ミニブタなどのほとんどの動物モデルで共有標準戦略であります。これらのうち、NZW ウサギは、正常ラットおよびマウスでは、食餌療法のコレステロール2,3,4は大幅吸収しない中コレステロールの食事療法に敏感です。ウサギは自発的にコレステロール豊富な食事療法5,6にうんざりしたいくつかの線維性のコンポーネントとマクロファージの豊富な大動脈病変を開発します。しかし、動脈硬化 plaquesby コレステロール食事療法だけで6,7を給餌を誘発する 4-8 ヶ月の長い準備時間は実験的設定のほとんどのための主な欠点です。比較的短時間で病変を誘導するための追求、Baumgarter、ステューダー8でコレス トロールが高い食事療法およびバルーン傷害の組み合わせを開発しました。この手法の全体的な目標は、高コレステロール血症ウサギにおける泡沫細胞 (人間の脂肪のストリークに類似) 2 週間以内で構成される動脈硬化性プラークを誘導するためです。本手法では、nzw 種高コレステロール血症ウサギの腸骨動脈に高度なバルーンカテーテルを用いた Baumgarter の法に基づく動脈壁損傷の手順について説明します。
コレステロール豊富な食事と一緒に解消の内皮化が誘起されるバルーン傷害、動脈硬化に します。バルーン傷害はアテローム性動脈硬化病変の形成を加速し、均一なサイズと分布のプラークが生成されます。内膜肥厚は傷害の後の数日以内時間と内膜細胞浸潤の開始の期間にわたって増加します。実質的なマクロファージと脂肪筋はバルーン傷害の 7 ~ 10 日後現われ始めるし、アメリカ心臓協会分類 II 型病変として表されます。ウサギ バルーン傷害は、しばしば大動脈プラークの組成を研究する実行されます。新生内膜内皮細胞間接着分子の高レベルを表しています。プラークは、内側と外の変化に関連付けられます。動脈硬化病変、脂質、増殖平滑筋細胞 (SMCs)、コラーゲン線維と再生内皮の下で蓄積、大抵タイプ II 本質的に炎症性細胞の構成されます。原則としてひと大動脈9,10で報告に類似していたウサギのプラクの位相分布、大動脈腸骨動脈と比較してサイズは大きくより大きい長さのプラークになります。しかし、動脈硬化家兎のサイトとして総腸骨動脈を使用しての主な利点は、アクセシビリティ、ひと冠動脈11、制服病変開発12、高組織率に筋肉のコンテンツの類似性活動13と一貫性のある容器寸法ひと冠動脈形態と血管造影のエンドポイントに商業的に製造されたデバイスの評価に匹敵します。生きている動物のウサギ腸骨動脈のプラークを分析する侵襲的、非侵襲的な方法を検討しました。磁気共鳴画像 (MRI) をさらに 2.35 テスラ MR システム14の助けを借りての使用については以前のレポート、血管内超音波 (IVUS) や光コヒーレンス断層法 (OCT) カテーテルを適切にすることができます画像に適用ウサギ腸骨動脈で動脈硬化プラーク。総腸骨動脈は、高解像度の超音波を使用して超音波検査バリアフリーと大動脈は、この手法で調べることができます。
過去 10 年間でさらにプラーク進行15とプラーク回帰16のメカニズムを理解するバルーン傷害のこの家兎モデルをしました。さらに、モデルは、スタチン系薬剤、標準的な抗血小板剤、抗酸化剤17,18エベロリムスなどの薬剤溶出ステントなどの新規治療薬の影響を研究に使用されていますかゾタロリムス溶出ステント19,20新生内膜肥厚。このモデルは、血管内カテーテル21近赤外蛍光イメージングを調査する使用されています。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>New Zealand White rabbits</td>
			<td>Charles River laboratories,France</td>
			<td>Cre:KBL(NZW)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol rich diet</td>
			<td>Ssniff spezialdi&#228;ten</td>
			<td>Ssniff EF K High Fat and Cholesterol</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bead sterilizer-Germinator 500</td>
			<td>VWR, Leicestershire, UK</td>
			<td>101326-488</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fogarty balloon embolectomy catheters, 2 French</td>
			<td>Edwards Lifesciences, Switzerland</td>
			<td>120602F</td>
			<td>For single use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company, USA</td>
			<td>309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermopad Type 226</td>
			<td>Solis, Switzerland AG</td>
			<td>397387</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine- Temgesic</td>
			<td>Reckitt Benckiser AG, Switzerland</td>
			<td>7.68042E+12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care, Inc, Bethlehem, PA 18017</td>
			<td>2667-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anaesthesia machine-combi-vet Base Anesthesia System</td>
			<td>Rothacher Medical GmbH, Switzerland</td>
			<td>CV 30-301-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardell touch veterinary vital signs monitor</td>
			<td>Midmark, Ohio, USA</td>
			<td>8013-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment-Humigel</td>
			<td>Virbac, France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal hair clippers</td>
			<td>Aesculap AG, Germany</td>
			<td>GT420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disinfectant-Betadine solution</td>
			<td>MundipharmaMedicalCompany, Switzerland</td>
			<td>14671-1203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #7 Forceps</td>
			<td>FST Germany</td>
			<td>11274-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium and small microscissors</td>
			<td>Medline International Switzerland S&#224;rl</td>
			<td>UC4337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvascular clamps</td>
			<td>FST, Germany</td>
			<td>18051-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Papaverine</td>
			<td>ESCA chemicals, Switzerland</td>
			<td>RE 356 803</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein Pick</td>
			<td>Harvard Apparatus, Cambridge, UK</td>
			<td>72-4169</td>
			<td>For single use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Laboratorium Dr. G. Bichsel AG, , Switzerland</td>
			<td>1330055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polysorb 5-0 suture</td>
			<td>Covidien AG, Switzerland</td>
			<td>UL 202</td>
			<td>Monofilament</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfadoxine and Trimethoprim-Trimethazol</td>
			<td>Werner Stricker AG, Switzerland</td>
			<td>Swissmedic Nr. 50&#39;361</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antiseptic- Octenisept</td>
			<td>Sch&#252;lke &#38; Mayr AG, Switzerland</td>
			<td>GTIN: 4032651214068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Roth</td>
			<td>1058.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isobutanol-2-Methylbutane</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>M32631-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optimum Cutting Temperature compound-Tissue-Tek</td>
			<td>VWR Chemicals, Belgium</td>
			<td>25608-930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica, Glattbrugg, Switzerland</td>
			<td>Leica CM1860 UV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slide- Superfrost Plus</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>4951PLUS4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayer&#39;s Haematoxylin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>MHS32-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin 0.5% aq.</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>HT110232-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oil Red O</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>O0625-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-smooth muscle actin antibody</td>
			<td>Abcam, UK.</td>
			<td>ab7817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Macrophage Clone RAM11 antibody</td>
			<td>DAKO, Switzerland</td>
			<td>M063301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst</td>
			<td>Abcam, UK.</td>
			<td>ab145596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat polyclonal Secondary Antibody (Chromeo 546)</td>
			<td>Abcam, UK.</td>
			<td>ab60316</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488/547</td>
			<td>Abcam, UK.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycergel Mounting Medium, Aqueous</td>
			<td>DAKO, Switzerland</td>
			<td>C056330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>H3136-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferric chloride for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>157740-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine for Movat staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>207772-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium iodide for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>60400-100G-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcian blue for Movat staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>A5268-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strong Ammonia for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>320145-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant crocein MOO for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>210757-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acid Fuchsin for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>F8129-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Thiosulfate for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>72049-250G,</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphotungstic acid for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>79690-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crocin for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>17304-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EUKITT for Movat pentachrome staining</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td>03989-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the rabbit model of accelerated atherosclerosis: a methodological perspective of the iliac artery balloon injury

動脈硬化性プラークの開発と破壊に続く冠動脈閉塞による急性冠症候群は、先進世界での死の主要な原因です。ニュージーランド ホワイト (nzw 種) ウサギは、アテローム性動脈硬化の研究の動物モデルとして広く使用されます。彼らは動脈硬化食事にうんざりした自発的な病変を開発します。ただし、これは 4-8 ヶ月の長い時間を必要があります。さらに強化し、粥状動脈硬化を促進、動脈硬化の食事と機械的血管内皮傷害の組み合わせがしばしば利用されます。家兎動脈硬化性プラークを誘導するため提示された手順は、動脈硬化の飼料 NZW ウサギの左総腸骨動脈の内皮細胞を破壊するのにバルーンカテーテルを使用します。バルーンカテーテルによるこのような機械的な損傷は、時間依存的新生内膜脂質の蓄積を開始する炎症反応の連鎖を誘発します。次のバルーン傷害ショー新生内膜肥厚広範な脂肪浸潤、高平滑筋細胞内容マクロファージの存在と動脈硬化性プラークには、泡沫細胞が派生しました。この手法、シンプルで再現性のある、内腸骨動脈内長の制御のプラークを生成します。全体の手順は 20-30 分以内に完了します。手順は、安全低死亡率では、実質的な内膜肥厚病変に高い成功を提供しています。バルーンカテーテルのプロシージャは、2 週間以内動脈硬化症における動脈傷害の結果を誘発しました。このモデルは病の病理を調査するため使用することができます画像診断と新しい治療戦略を評価します。

総腸骨動脈のバルーン傷害は、(図 1) の合併症もなく正常に実行されました。20 〜 30 分の怪我のため手術時間の合計は、のみ 1 つの腸骨動脈、および両方の動脈の損傷のための 35 〜 45 分を行います。ウサギはバルーン損傷後 1 h 以内に回復。すべての動物は、有意な体重を失うことがなく健康な登場。感染症、浮腫や動脈血栓症発生しませんでした。創傷部は縫合のサイトでいくつかの軽度の線維化以外にも正常であった。動脈硬化食事餌やりの 4 週間、続いてウサギ展示高コレステロール血症 44 ± 18 mM/l。
図 2 a図 2 e、および図 2 iを右無傷腸骨動脈 (バルーン損傷にさらされていない) 通常の外観と。(図 2および図 3) 2 週間で動脈硬化性プラークの発展につながる血管壁の構造変化にバルーン傷害およびコレステロール dietresulted の組み合わせ。ため無傷バルーン負傷した腸骨動脈は、同じ動物から分離された.豊富な脂質浸潤 (8.7 ± 1.7% 脂質領域) (図 2および図 3) 平滑筋細胞の遊走と増殖 (図 4)、同様にトリガー イベントとしてバルーン傷害に増殖血管応答結果内腔領域 (1.4 ± 0.2 mm2) の減少、併用で内膜-メディアの厚さ比 (1.5 ± 0.2) およびプラーク (0.8 ± 0.2 mm2) の増加につながるマクロファージ (図 4) の募集 (図 3) 観察 2週間後バルーン傷害です。RAM 11 は、特にターゲットにウサギ マクロファージの細胞質に対するモノクローナル抗体です。Α-SM アクチン筋肉アクチンを識別し、血管での血管平滑筋細胞と反応します。これらの抗体は、マクロファージや平滑筋細胞でウサギの内膜肥厚病変を勉強する以前に使用されています。これらの変更は時間とメディア/内膜中膜厚比 (2.6 ± 0.2) と内腔縮小 (0.7 ± 0.1 mm2) のなお一層の増加とともに進化し続けます (図 2および図 3) バルーン損傷後 4 週間を指摘されました。この手法は、時間をかけて開発し、2 〜 4 週間後調査された動脈硬化性プラークの健全な発展に します。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55295/55295fig1.jpg"> 
図 1: バルーン損傷プラークの進展のタイムラインを示す略図。<a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55295/55295fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55295/55295fig2.jpg"> 
図 2: バルーン傷害誘導ウサギ腸骨動脈のアテローム性動脈硬化します。非負傷からのセクションを染色 Movat pentachrome (A ~ D)、ヘマトキシリン ・ エオジン (E H) とオイル赤い O (-L) の代表的なイメージ (、E、私)、2 週間ポスト バルーン損傷 (B, F, J) (n = 5) と 4 週間ポストバルーン傷害 (C, G, K) (n = 3) 動脈硬化の食事療法の腸骨動脈セグメント供給 NZW ウサギ。D、H および L のスケール バーは 100 μ m スケールの他の画像バー = 500 μ m. Labelled B はイメージの内腔、内膜、IEL (内弾性板)、ウナギ (外弾性板)。メディアは、IEL とウナギとの間の領域です。<a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55295/55295fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55295/55295fig3.jpg"> 
図 3: プラークの形態計測的解析します。バルーンが 2 で動脈を負傷、散布プロット番組内膜/メディア厚比、プラーク、内腔領域の領域および % オイル赤い O 正領域非負傷したコントロールから腸骨動脈セクション、(n = 5)、4 週間 (n = 3)。データは、平均 ± SD. として表示されます * p &#60; 0.05対非負傷した動脈、#p &#60; 0.05対4 週間ポスト バルーン傷害。N.d. を示す検出されません。プラーク エリアは、O 正地域総断面容器壁領域のパーセントを表します油赤中 IEL 領域から内腔領域を差し引くことによって計算されます。<a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55295/55295fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55295/55295fig4.jpg"> 
図 4: プラークの組成の免疫組織化学的解析します。Α-平滑筋アクチン (赤) (A-D) とマクロファージ (RAM 11) 陽性細胞 (赤) (E ・ F) を示す代表的なイメージ。右側のパネルは、ヘキスト (青) とエラスチン (グリーン) それぞれマージされた画像を表示します。スケールバー = 100 μ m.<a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55295/55295fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

Watch this Scientific Journal Video about The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury at JoVE.com

The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

動脈硬化症の動物モデルは、メカニズムを理解してプラークの開発や破断、先進国の死亡原因を防止するための新しいアプローチを調査するために不可欠です。このプロトコルは、ウサギ腸骨動脈の動脈硬化性プラークを誘発するのにバルーン傷害と高コレステロール食の組み合わせを使用します。

加速動脈硬化家兎モデル: 内腸骨動脈バルーン傷害の方法論的視点

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the ...

the-rabbit-model-accelerated-atherosclerosis-methodological

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K ビュー.  University of Fribourg. 動脈硬化症の動物モデルは、メカニズムを理解してプラークの開発や破断、先進国の死亡原因を防止するための新しいアプローチを調査するために不可欠です。このプロトコルは、ウサギ腸骨動脈の動脈硬化性プラークを誘発するのにバルーン傷害と高コレステロール食の組み合わせを使用します。

ビデオ: The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

再狭窄の研究のための頸動脈内ステント留置のマウスモデル

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

医学

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and cellular mechanisms involved in vascular smooth muscle dedifferentiation, neointima formation and vascular remodeling. Male Sprague-Dawley rats are the most frequently employed animals for this model. Female rats are not preferred as female hormones are protective against vascular diseases and thus introduce a variation into this procedure. The left carotid is typically injured with the right carotid serving as a negative control. Left carotid injury is caused by the inflated balloon that denudes the endothelium and distends the vessel wall. Following injury, potential therapeutic strategies such as the use of pharmacological compounds and either gene or shRNA transfer can be evaluated. Typically for gene or shRNA transfer, the injured section of the vessel lumen is locally transduced for 30 min with viral particles encoding either a protein or shRNA for delivery and expression in the injured vessel wall. Neointimal thickening representing proliferative vascular smooth muscle cells usually peaks at 2 weeks after injury. Vessels are mostly harvested at this time point for cellular and molecular analysis of cell signaling pathways as well as gene and protein expression. Vessels can also be harvested at earlier time points to determine the onset of expression and/or activation of a specific protein or pathway, depending on the experimental aims intended. Vessels can be characterized and evaluated using histological staining, immunohistochemistry, protein/mRNA assays, and activity assays. The intact right carotid artery from the same animal is an ideal internal control. Injury-induced changes in molecular and cellular parameters can be evaluated by comparing the injured artery to the internal right control artery. Likewise, therapeutic modalities can be evaluated by comparing the injured and treated artery to the control injured only artery.

This protocol uses a balloon catheter to cause an intraluminal injury on the rat carotid artery and henceforth elicit neointimal hyperplasia. This is a well-established model for studying the mechanisms of vascular remodeling in response to injury. It is also widely used to determine the validity of potential therapeutic approaches.

ラット頸動脈における血管バルーン傷害と管腔内投与

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

A Rat Carotid Balloon Injury Model to Test Anti-vascular Remodeling Therapeutics

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is also a valuable model system to test, and to evaluate therapeutics and drugs that negate maladaptive remodeling in the vessel. The injury, or barotrauma, in the vessel lumen caused by an inflated balloon via an inserted catheter induces subsequent neointimal growth, often leading to hyperplasia or thickening of the vessel wall that narrows, or obstructs the lumen. The method described here is sufficiently sensitive, and the results can be obtained in relatively short time (2 weeks after the surgery). The efficacy of the drug or therapeutic against the induced-remodeling can be evaluated either by the post-mortem pathological and histomorphological analysis, or by ultrasound sonography in live animals. In addition, this model system has also been used to determine the therapeutic window or the time course of the administered drug. These studies can leadto the development of a better administrative strategy and a better therapeutic outcome. The procedure described here provides a tool for translational studies that bring drug and therapeutic candidates from bench research to clinical applications.

The rat carotid balloon injury model described below allows researchers to evaluate drugs or therapeutics that negate injury-induced arterial hyperplasia. Detailed pre-surgical preparation, surgical procedure, and post-surgical cares of the animal are described.

ラット頸動脈バルーン損傷モデルは、抗血管リモデリングの治療薬をテストします

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

マウスにおける加速アテローム性動脈硬化症の誘導:ワイヤー傷害モデル

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves focal endothelial-selective transgenesis, thereby allowing an investigator to determine the biological roles of endothelial-expressed transgenes and to quantify the in vivo transcriptional activity of DNA sequences in large artery endothelial cells. The method uses surgical isolation of rabbit common carotid arteries and an arteriotomy to deliver a transgene-expressing viral vector into the arterial lumen. A short incubation period of the vector in the lumen, with subsequent aspiration of the lumen contents, is sufficient to achieve efficient and durable expression of the transgene in the endothelium, with no detectable transduction or expression outside of the isolated arterial segment. The method allows assessment of the biological activities of transgene products both in normal arteries and in models of human vascular disease, while avoiding systemic effects that could be caused either by targeting gene delivery to other sites (e.g. the liver) or by the alternative approach of delivering genetic constructs to the endothelium by germ line transgenesis. Application of the method is limited by the need for a skilled surgeon and anesthetist, a well-equipped operating room, the costs of purchasing and housing rabbits, and the need for expertise in gene-transfer vector construction and use. Results obtained with this method include: transgene-related alterations in arterial structure, cellularity, extracellular matrix, or vasomotor function; increases or reductions in arterial inflammation; alterations in vascular cell apoptosis; and progression, retardation, or regression of diseases such as intimal hyperplasia or atherosclerosis. The method also allows measurement of the ability of native and synthetic DNA regulatory sequences to alter transgene expression in endothelial cells, providing results that include: levels of transgene mRNA, levels of transgene protein, and levels of transgene enzymatic activity.

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

This method is to introduce a transgene into the endothelium of rabbit carotid arteries. Introduction of the transgene allows the assessment of the biological role of the transgene product either in normal arteries or disease models. The method is also useful for measuring activity of DNA regulatory sequences.

生体内でウサギの一般的な頚動脈内皮細胞への遺伝子導入

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

耐久性のある遺伝子発現により一般的な頚動脈移植に頸静脈の家兎モデル

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

ワイヤー図法を使用してマウスの腸間膜動脈の等尺性収縮力測定

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the luminal surface area in arteries thereby reducing adequate blood flow to organs and distal tissues. Clinically, revascularization procedures such as balloon angioplasty with or without stent placement aim to restore blood flow. Although these procedures reestablish blood flow by reducing plaque burden, they damage the vessel wall, which initiates the arterial healing response. The prolonged healing response causes arterial restenosis, or re-narrowing, ultimately limiting the long-term success of these revascularization procedures. Therefore, preclinical animal models are integral for analyzing the pathophysiological mechanisms driving restenosis, and provide the opportunity to test novel therapeutic strategies. Murine models are cheaper and easier to operate on than large animal models. Balloon or wire injury are the two commonly accepted injury modalities used in murine models. Balloon injury models in particular mimic the clinical angioplasty procedure and cause adequate damage to the artery for the development of restenosis. Herein we describe the surgical details for performing and histologically analyzing the modified, pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model. Additionally, this protocol highlights how local periadventitial application of therapeutics can be used to inhibit neointimal hyperplasia. Lastly, we present light sheet fluorescence microscopy as a novel approach for imaging and visualizing the arterial injury in three-dimensions.

The rat carotid artery balloon injury mimics the clinical angioplasty procedure performed to restore blood flow in atherosclerotic vessels. This model induces the arterial injury response by distending the arterial wall, and denuding the intimal layer of endothelial cells, ultimately causing remodeling and an intimal hyperplastic response.

過期治療アプリケーションを用いてラット頸動脈圧制御区分バルーン損傷

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...

The Intra-Aortic Balloon Pump

Cardiogenic shock remains one of the most challenging clinical syndromes in modern medicine. Mechanical support is being increasingly used in the management of cardiogenic shock. Intra-aortic balloon pump (IABP) is one of the earliest and most widely used types of mechanical circulatory support. The device acts by external counterpulsation and uses systolic unloading and diastolic augmentation of aortic pressure to improve hemodynamics. Although IABP provides less hemodynamic support when compared with newer mechanical circulatory support devices, it can still be the mechanical support device of choice in appropriate situations because of its relative simplicity of insertion and removal, need for smaller size vascular access and better safety profile. In this review, we discuss the equipment, procedural and technical aspects, hemodynamic effects, indications, evidence, current status and recent advances in the use of IABP in cardiogenic shock.

We describe the steps for the percutaneous implantation of the intra-aortic balloon pump (IABP), a mechanical circulatory support device. It acts by counterpulsation, inflating at the onset of diastole, augmenting diastolic aortic pressure and improving coronary blood flow and systemic perfusion, and deflating before systole, reducing left ventricular afterload.