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1. Preparazione di EOB-DTPA e Ga [EOB-DTPA] Attenzione: Si prega di consultare tutte le schede di sicurezza materiale pertinente (MSDS) dei macchinari usati solventi organici, acidi e alcali prima dell&#39;uso. Eseguire tutti i passaggi in una cappa aspirante e utilizzare dispositivi di protezione individuale (occhiali, guanti, camice da laboratorio). <ol><li> Isolamento di EOB-DTPA da acido gadoxetico <ol><li> Mettere 3 ml di 0,25 M soluzione iniettabile gadoxetico acido in un pallone. Aggiungere 500 mg (5,6 mmol) di acido ossalico alla soluzione agitata. </li><li> Dopo agitazione per 1 ora, filtrare la sospensione attraverso una fritta con pressione ridotta. Lavare il residuo tre volte con 3 ml di acqua, rispettivamente. </li><li> Unire i filtrati acquosi e dotare la soluzione con un elettrodo di pH. Aggiungere 12 M di acido cloridrico al filtrato finché il pH è circa -0.1. </li><li> Rimuovere il solvente sotto vuoto ottenendo un residuo incolore. Conservare sotto gas inerte. </li><li> Lavare accuratamente il residuo (almeno trevolte) con acetato di etile per rimuovere l&#39;eccesso di acido ossalico. Essiccare il residuo sotto vuoto. </li><li> Riprendere il residuo in 2 ml di acqua a temperatura ambiente e poi raffreddare la soluzione in un bagno di ghiaccio. Senza rimuovere il bagno di ghiaccio, si aggiungono 0,5 M di idrossido di sodio acquoso soluzione goccia a goccia fino alla formazione di un incolore collosa solido viene osservato. </li><li> Rimuovere l&#39;acqua per decantazione. Lavare i solidi altre due volte con 1 ml di acqua fredda. Essiccare il solido sotto vuoto ottenendo la prima frazione di prodotto. </li><li> Isolare una seconda frazione del prodotto dalle frazioni combinate di acqua decantata tramite cromatografia su colonna (silice, metanolo / acqua 4/1). 24 Rimuovere il solvente sotto vuoto. </li><li> Se il solido così ottenuto non è bianco puro, scioglierla in 1 ml di acqua, aggiungere 10 ml di etanolo e successivamente 10 ml di etere etilico per far precipitare il prodotto. Filtrare attraverso una fritta con pressione ridotta e secco sotto vuoto. </li><li> combinareentrambe le frazioni solide di EOB-DTPA ed eseguire spettroscopica NMR, 25 spettrometria di massa 26 e 27 elementari analisi. </li></ol></li><li> Sintesi di Ga [EOB-DTPA] ATTENZIONE: solido Ga (III) cloruro Conservare in atmosfera inerte, secco, dal momento che al contatto con l&#39;aria, l&#39;umidità o la decomposizione di grasso si svolge, con conseguente fumi corrosivi e la formazione di impurità giallo, marrone o nero. <ol><li> Preparare una soluzione 0,11 M magazzino sciogliendo 1,94 g (11,0 mmoli) di Ga (III) cloruro in 100 ml di acqua. Diluire 1 ml di 25% soluzione acquosa ammoniacale con 4 ml di acqua. </li><li> Sciogliere 80 mg (0,15 mmoli) di EOB-DTPA in un pallone a 10 ml di acqua. Se necessario, riscaldare il solvente per ottenere la completa dissoluzione. </li><li> Aggiungere 1,4 ml (0,15 mmol) del Ga (III) cloruro soluzione madre. Dotare il pallone con un agitatore e pH-elettrodo. Aggiungere diluita soluzione acquosa di ammoniaca goccia a goccia fino a che il pH della soluzione è circa 4,1. Mescolare a rotemperatura om per 30 min. </li><li> Rimuovere il solvente sotto vuoto. Posizionare il residuo in un pallone munito di un stillhead con un collo lato centrale e parallelo. Dotare collo centrale con un dito di raffreddamento e il collo laterale con una presa di pompa da vuoto </li><li> Riscaldare il residuo a pressione ridotta (125 ° C, 0,6 mbar). Periodicamente rimuovere il cloruro di ammonio sublimata (visibile come rivestimento bianco della superficie di vetro) dal dito di raffreddamento ed ancora testa, nonché dalle parti superiori del pallone con un panno leggermente bagnato. Continuare il processo fino a quando non vi è alcuna formazione visibile di nuovo sublimato. </li><li> Per rimuovere le ultime tracce di cloruro di ammonio lavare il residuo tre volte con 0,5 ml di metanolo caldo, rispettivamente. Essiccare il residuo incolore sotto vuoto. Eseguire NMR spettroscopica, 25 di massa spettrometria di 26 e 27 elementari analisi. </li></ol></li></ol> 2. Procedura generale Labeling ATTENZIONE: tutti gli exesperi- compreso il contatto diretto o indiretto con le sostanze radioattive devono essere effettuate solo da personale qualificato. Si prega di utilizzare apparecchiature schermatura appropriata. Raccogliere tutte le scorie radioattive a parte e conservare e smaltire secondo le norme vigenti. <ol><li> Eluizione del generatore Nota: A 40 mCi 68 Ge / 68 Ga generatore con il nuclide madre vincolati come ossido di silice dodecil-3,4,5-trihydroxybenzoate è stato utilizzato. Elution e purificazione possono essere eseguite manualmente o, come nel caso in questa procedura, come un processo automatizzato combinati utilizzando una pompa peristaltica e dispositivo erogatore. <ol><li> Preparare soluzioni di 5,5 M, 1,0 M e 0,05 M di acido cloridrico. Preparare una soluzione di 5,0 M di cloruro di sodio contenente 25 ml di 5,5 M di acido cloridrico per ml. Preparare una soluzione tampone a pH 4,6 combinando 4,1 g di acetato di sodio, 1 ml di HCl (30%) e 2,5 ml di acido acetico glaciale e diluendo la miscela con acqua a 50 ml. </li><li> precondition PS-H + cartuccia lavaggio lentamente con 1 ml di 1,0 M di acido cloridrico e poi 5 ml di acqua. </li><li> Eluire la colonna di silice del generatore con 4 ml di 0,05 M HCl. 12 Caricare il 68 Ga eluato sulla PS-H + cartuccia. </li><li> Lavare la cartuccia con 5 ml di acqua e successivamente asciugare con 5 ml di aria. Eluire il 68 Ga dalla cartuccia con 1 ml 5.0 M acidificato soluzione di cloruro di sodio. 28 </li></ol></li><li> Etichettatura di EOB-DTPA con 68 Ga <ol><li> Sciogliere 1 mg (1,9 mmol) di EOB-DTPA in 1 ml di acqua. Da questa soluzione prendere 100 ml (0,19 mmol) e diluire con 9,9 ml di acqua per preparare un 19 micron (10 mg / ml) soluzione madre di EOB-DTPA. </li><li> Rimuovere 50 ml (pari 22-29 MBq) della soluzione contenente 68 Ga e messi in una fiala. Aggiungere 50 ml (0,5 mg) di mm soluzione stock di EOB-DTPA 19 e 300 ml of tampone per aumentare il pH a 4,0. Agitare brevemente e incubare la soluzione a temperatura ambiente per 5 min. Rimuovere una aliquota di 1-5 ml e mettere a un&#39;analisi HPLC o TLC. </li><li> Eseguire l&#39;analisi HPLC la radio su una fase inversa (RP) C18 colonna 29 Utilizzare la seguente fase mobile:. A - acqua / acido trifluoroacetico (99,9% / 0,1%), B - Acido acetonitrile / trifluoroacetico (99,9% / 0,1%), pendenza : 06 min 80% A → 0% A (0,5 ml / min), 610 min 0% A (0,5 ml / min). </li><li> Determinare l&#39;intensità dei picchi dei segnali radio HPLC come area sotto la curva. Calcolare la resa di etichettatura radiochimica purezza (RCP) del tracciante come segue: RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A + A Ga Ga-EOB-DTPA) ∙ 100% Un Ga-EOB-DTPA: area sotto la curva di 68 Ga [EOB-DTPA] A Ga: area sotto la curva del libero 68 Ga </li></ol></li></ol> 3. etichettatura dell&#39;efficienza <ol><li> Eseguire procedure di etichettatura come descrittod nella sezione 2. Utilizzare una serie coerente di avviare l&#39;attività di 68 Ga eluato, ad esempio, 22-29 MBq (40-140 ml, a seconda della freschezza del eluato). </li><li> Aggiungere la quantità richiesta di soluzione tampone per regolare il pH a 3,8-4,0 (40-190 microlitri, a seconda del volume di 68 Ga eluato). Aggiungere la quantità richiesta di soluzione di legante magazzino (10-70 ml di una soluzione di 19 mm). </li><li> Aggiungere la quantità necessaria di acqua per regolare il volume complessivo di ogni sonda etichettatura a 1,75 ml. Mescolare accuratamente e lasciare riposare il campione per 5 minuti a temperatura ambiente. Effettuare analisi HPLC come descritto al punto 2 per determinare la resa di etichettatura. </li><li> Eseguire le procedure di etichettatura con quantità di legante tra 0,1 mg e 0,7 mg a passi di 0,1 mg. Effettuare esperimenti in triplicato per ciascuna concentrazione ligando. Calcolare la resa media e deviazione standard. </li></ol> 4. In Vitro stabilità <ol><li> p GeneraleROCEDURA e preparati <ol><li> Sciogliere una compressa di tampone fosfato salino (PBS) in 200 ml di acqua deionizzata per preparare una soluzione madre PBS con una concentrazione di fosfato 10 mM. </li><li> Eseguire etichettatura di 22-29 MBq 68 Ga con 0,5 ml di soluzione stock EOB-DTPA, come descritto nella sezione 2. A seconda del volume del 68 Ga eluato, regolare la quantità di tampone, come descritto nella sezione 3. Prelevare campioni di soluzione di etichettatura contenente 6-12 MBq di tracciante per eseguire misure di stabilità. </li><li> Eseguire la radio analisi TLC su piastre di alluminio 80 mm di gel di silice rivestite con 0,1 M citrato di sodio acquoso come eluente e analizzare le piastre con uno scanner radioattività TLC. 30 Determinare le intensità dei segnali TLC come area sotto la curva. Calcolare la RCP del tracciante come segue: RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A-Ga libero + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-colloidale) ∙ 100% Un Ga-EOB-DTPA: area sotto la curva di 68 Ga [EOB-DTPA] Un Ga-libera: area sotto la curva del libero 68 Ga Un Ga-colloidale: area sotto la curva di colloidale 68 Ga </li><li> Calcolare RCP t / RCP 0 per ogni punto di tempo. Tracciare la RCP in tal modo standardizzato rispetto differenza di tempo da quando il punto di partenza t = 0 min. RCP t = RCP di 68 Ga [EOB-DTPA] al punto di tempo t. RCP = 0 RCP di 68 Ga [EOB-DTPA] al tempo t = 0 min. </li></ol></li><li> Stabilità in tampone fosfato (A) <ol><li> Per 65 ml di soluzione di etichettatura aggiungere 150 ml di soluzione madre PBS e 60 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. Mescolare accuratamente. </li><li> Rimuovere una aliquota di 1-5 microlitri per effettuare analisi TLC ( &#39;punto di partenza&#39;). memorizzare immediatamente la soluzione in un incubatore a 37 ° C e rimuovere aliquote di effettuare analisi TLC a rappresentareative punti di tempo più di 3 ore. </li></ol></li><li> Stabilità verso eccesso di apo -transferrin in PBS (B) <ol><li> Per 120 ml di soluzione di etichettatura aggiungere 50 ml di soluzione madre PBS e 430 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. Aggiungere 40 ml di una soluzione di apo -transferrin (25 mg / ml). Mescolare accuratamente. </li><li> Rimuovere una aliquota di 1-5 microlitri per effettuare analisi TLC ( &#39;punto di partenza&#39;). memorizzare immediatamente la soluzione in un incubatore a 37 ° C e rimuovere aliquote di effettuare analisi TLC in punti temporali rappresentativi oltre 3 ore. </li></ol></li><li> Stabilità in siero umano (C) <ol><li> Per 500 ml di siero umano aggiungere 25 ml di soluzione di etichettatura e 45 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. Mescolare accuratamente. </li><li> Rimuovere una aliquota di 1-5 microlitri per effettuare analisi TLC ( &#39;punto di partenza&#39;). memorizzare immediatamente la soluzione in un incuBator a 37 ° C e rimuovere aliquote di eseguire analisi TLC in momenti rappresentativi di oltre 3 ore. </li></ol></li></ol> 5. Determinazione del coefficiente di ripartizione LoGD <ol><li> Eseguire procedure di etichettatura, come descritto nella sezione 2. Per 50 ml di soluzione di etichettatura aggiungere 20 ml di soluzione madre PBS e 170 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. </li><li> Prelevare 200 ml di questa soluzione e metterla in una plastica V-fiala. Aggiungere 200 ml di n-ottanolo. Chiudere la fiala e vortex per 2 min. Poi centrifugare il campione a 1.600 xg per 5 min. </li><li> Rimuovere triplicato da 40 ml dalla fase n n-octanolo e la fase acquosa ogni e metterli in V-flaconcini separati. Fare attenzione a non mischiare gli strati. </li><li> Misurare l&#39;attività di ciascun campione in un contatore gamma bene per 30 sec. Per ogni campione ripetere la misurazione immediatamente due volte e ne calcola la media dell&#39;attività Ᾱ t </sub&gt; in conteggi per minuto (cpm). Elencare il Ᾱ t così guadagnato, W1, Ᾱ t, W2 e Ᾱ t, W3 (attività in campioni acquosi) e Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (attività in n- ottanolo) insieme con il rispettivo punto t momento della loro determinazione. </li><li> Definire il punto di tempo della misurazione dell&#39;ultimo campione come t 0. Determinare ed elencare Dt in min calcolando At = TT 0. Eseguire la correzione di decadimento Ᾱ t, utilizzando la seguente formula: Ᾱ 0 = Ᾱ t · 2 (Dt / 68 min). </li><li> Calcolare Ᾱ 0, W come media di Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 e Ᾱ 0, W3 e Ᾱ 0, O come media di Ᾱ 0, O1, Ᾱ 0, O2 e Ᾱ 0, O3. Calcolare LoGD utilizzando la seguente formula: LoGD = log [(Ᾱ <sub&gt; 0, O · 40 mcg) / (Ᾱ 0, W · 33 mg)]. </li><li> Eseguire l&#39;intero esperimento in triplicato e calcolare la media LoGD insieme con la sua deviazione standard. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

EOB-DTPA è accessibile attraverso una sintesi multi-step 33, ma può benissimo essere isolato dagli agenti di contrasto disponibili contenenti acido gadoxetico. Per questo scopo, lo ione centrale di Gd (III) può essere precipitato con un eccesso di acido ossalico. Dopo aver rimosso Gd ossalato (III) e acido ossalico il legante può essere isolato mediante precipitazione in acqua fredda a pH 1.5. Tuttavia, al fine di migliorare le rese colonna cromatografica del filtrato può essere eseguita preferibilmente o come una procedura di follow-up. Entrambi i metodi produce il ligando analiticamente puro in rese globali del 70% (Figure 1-3, Tabella 1). Abbiamo trovato che per isolare Ga [EOB-DTPA] regolando il pH con una soluzione di ammoniaca viene confrontato vantaggioso l&#39;uso di idrossido di sodio, poiché il cloruro di ammonio sottoprodotto può essere rimosso dal residuo molto idrofila mediante sublimazione. Nelle condizioni di cui sopra questo processo avviene lentamentely. Dal momento che quantità non trascurabili di cloruro erano ancora rilevabili dopo cinque giorni, il sale residuo è stato lavato con metanolo. Sebbene questo lavoro-up procedura comporta perdita parziale di Ga [EOB-DTPA], il prodotto è stato ottenuto in purezza analitica con una resa complessiva del 46% (Figure 4-6, Tabella 1). Per l&#39;isolamento di entrambi EOB-DTPA e la sua Ga (III), l&#39;uso della cromatografia in fase inversa dovrebbe essere considerato come un metodo alternativo di purificazione, particolarmente poiché la decomposizione di gel di silice è probabile quando si usano solventi altamente polari. Il processo di etichettatura di EOB-DTPA richiesto l&#39;uso di elevata purezza solventi, prodotti chimici e attrezzature senza metalli per evitare la presenza di ioni metallici in competizione, a causa di 68 Ga essendo presente in quantità nanomolari (2 MBq di 68 Ga in un campione 1,75 ml uguale a una concentrazione nuclide di 0,14 nm). Etichettatura di EOB-DTPA a 68 Ga avviene a pH 3,8-4,0 entro cinque minutisce a temperatura ambiente. Ricerche sull&#39;efficienza 68 Ga-etichettatura richiedono la determinazione della resa di etichettatura, mantenendo le condizioni di reazione pH, temperatura e tempo di reazione e di avviare l&#39;attività di 68 Ga costante o in un intervallo giustificabile. Per ciascun punto di dati (cioè, concentrazione ligando) dell&#39;esperimento dovrebbe essere eseguito almeno tre volte per fornire un livello ragionevole sicurezza, poiché le concentrazioni sia di ligando e 68 Ga sono molto bassa e la resa etichettatura quindi sensibili anche lievi deviazioni del condizioni di reazione. Ad esempio, i 68 Ga età eluato, aliquote di volume crescente bisogno di essere ritirato per fornire un&#39;attività iniziale costante, rendendo quindi necessario crescenti volumi di tampone. Inoltre, l&#39;invecchiamento dei risultati eluato a concentrazioni crescenti del prodotto di decadimento 68 Zn, che si potrebbe agire come un concorrente per 68 Ga, in tal modo negativamente influenzare labeling efficienza. 13,34,35 etichettatura praticamente quantitativa di 22-29 MBq 68 Ga è realizzato secondo le condizioni di cui sopra, con quantità di EOB-DTPA ≥ 0,7 mg (Figura 9), con contenuti di libera 68 Ga ≤ 2% e circa 5 % di colloidale 68 Ga presenti nei campioni. Mentre HPLC fornito la separazione della linea di base superiore della libera 68 Ga Ga e 68 [EOB-DTPA], non è adatto per rilevare colloidale 68 Ga. Abbiamo quindi scelto di TLC per determinare la RCP durante le misure di stabilità, in cui era richiesta la quantificazione della transferrina o di proteine-bound 68 Ga. Abbiamo trovato separazione basale accettabile per questo scopo (figura 10); Tuttavia, l&#39;uso di cromatografia ad esclusione sterica o filtrazione metodi 15,36 per rimuovere frazioni colloidali, seguita da analisi HPLC, potrebbero essere considerati alternativi. Il complesso 68 Ga presenta una forte retenzione su piastre TLC (R f = 0.3) se il campione viene prelevata direttamente dalla soluzione di etichettatura rispetto a campioni a pH fisiologico (R f = 0,5). Consigliamo questa osservazione potrebbe essere spiegata da diversi stati di protonazione del complesso. In determinazioni stabilità in vitro di 68 traccianti Ga sono di solito eseguite in PBS 15,17 o sistemi tampone alternativi mimano il pH fisiologico 37, nonché in soluzioni contenenti apo transferrina 37, che è il principale concorrente per 68 Ga nel sangue, o 15,17 siero umano. Nei nostri esperimenti l&#39;aggiunta di soluzione di idrossido di sodio 0,1 M di PBS è stato richiesto di regolare il pH dei campioni a 7,4. Non abbiamo potuto affermare che la concentrazione di fosfato influenza la velocità di degradazione, dal momento che gli esperimenti di stabilità in soluzioni di varia concentrazione di fosfati (0,8 mm e 5,5 mm (A)) ha prodotto non reprodurisultati cible. Tuttavia, abbiamo scoperto che una soluzione B, contenenti apo -transferrin (1,6 mg / ml, che è nel raggio d&#39;azione il normale contenuto di plasma 38) e 0,8 mm di fosfato (sangue umano di solito presenta un livello di fosfato di 0,8-1,5 mM 39,40 ), provoca la decomposizione ad una velocità paragonabile a quello osservabile nel siero umano (C). Nelle soluzioni AC, dopo 185 min il contenuto colloidale 68 Ga è aumentata di circa il 24%, mentre il contenuto del libero 68 Ga aumentato del 11% in soluzione A, 17% in soluzione B e 27% in soluzione C (Tabella 2 ). Il fatto che il 68 Ga formata da decomposizione tracciante è prevalentemente presente come libero 68 Ga al contrario di colloidali o legato alle proteine ​​68 Ga in B e C potrebbe essere a causa della saturazione della transferrina o tassi di legame della transferrina relativamente lenti. <sup&gt; 41 Il complessivo osservato bassa stabilità (Figura 11) di 68 Ga [EOB-DTPA] è paragonabile a traccianti che caratterizzano simili chelanti DTPA derivati. 15,16,18 Di solito, le informazioni sul arteriosa precoce e la fase della perfusione venosa del fegato sono guadagnato effettuando scansioni MRI entro i primi 3 minuti dopo la somministrazione di 4,21 Gd [EOB-DTPA], mentre la presenza degli epatociti viene rilevato nella fase ritardata di 20 minuti 3,4,23 fino a diverse ore 21,22 dopo l&#39;iniezione. Dopo 20 minuti nel siero umano 93% di 68 Ga [EOB-DTPA] rimangono intatti. Expectedly, il rapporto segnale-rumore in quel momento avrebbe deteriorato a causa quantità crescenti di 68 Ga-transferrina, che è presente in recettori della transferrina plasmatiche e tissutali esprimere, e la connessione 68 Ga gallato. 41,42 Per prevedere una distribuzione tissutale traccianti ottanolo partizione / acqua log coefficientiP o distribuzione coefficienti LoGD può essere determinato come rapporto tra concentrazioni di attività nelle due fasi. Per definizione, il parametro LoGD non distingue tra le specie più presenti in un mezzo, che lo rende adatto per i nostri esperimenti a causa della possibilità di diversi stati di protonazione del tracciante e sua decomposizione nella fase acquosa. Per determinare LoGD per estrazione del mezzo acquoso viene generalmente tamponata con PBS per simulare condizioni di sangue. 17,43-45 Per ragioni di cui sopra abbiamo usato diluito PBS, esibendo una concentrazione di fosfato di 0,8 mm e pH fisiologico. Dopo estrazione con n n-octanolo e centrifugazione, la rimozione di diversi aliquote sulla stessa fase consente imprecisioni dovute pipettamento per essere ridotto. A causa delle concentrazioni molto basse di attività in n- ottanolo si dovrebbe fare attenzione ad evitare la contaminazione incrociata con la fase acquosa e per garantire il trasferimento quantitativa in un flacone separato. Distribcoefficienti ution determinati da questa procedura sono riproducibili, e mentre consentono una stima approssimativa di lipofilia, un confronto diretto ad un logP di Gd [EOB-DTPA] non è possibile. A causa della specificità della Gd [EOB-DTPA] risultante non principalmente dalla lipofilia ma piuttosto sarebbe necessario fornire più ampie informazioni sulla biodistribuzione così come la stabilità in vivo di 68 Ga [EOB suoi epatobiliare di assorbimento ulteriori esperimenti in soggetti o cellule viventi -DTPA]. Complessivamente, la domanda come agente di imaging per la perfusione e la fase epatobiliare precoce è immaginabile.

Acido gadoxetico, un nome comune per il complesso di Gd (III) del ligando EOB-DTPA 1, è un agente di contrasto utilizzato frequentemente nell&#39;imaging epatobiliare risonanza magnetica (MRI). 2,3 Grazie al suo assorbimento specifico epatociti del fegato e un&#39;alta percentuale di escrezione epatobiliare consente la localizzazione di lesioni focali e tumori epatici. 2-5 Tuttavia, alcune limitazioni della tecnica MRI (ad esempio, tossicità dei mezzi di contrasto, limitata applicabilità nei pazienti con impianti claustrofobia o metallo) richiedono uno strumento diagnostico alternativa . Tomografia ad emissione di positroni (PET) è un metodo di imaging molecolare, in cui viene somministrata una piccola quantità di una sostanza radioattiva (tracciante), su cui la sua distribuzione nel corpo è registrato da uno scanner PET. 6 PET è un metodo dinamico che consente per alta risoluzione spaziale e temporale delle immagini così come quantificazione dei risultati, senza doveraffrontare gli effetti collaterali degli agenti di contrasto per MRI. Il valore informativo delle informazioni metaboliche ottenuto può essere ulteriormente aumentata combinazione con dati anatomici ricevuti da metodi di imaging addizionali, come più comunemente realizzato da immagini ibrida con la tomografia computerizzata (CT) in scanner PET / CT. La struttura chimica di un tracciante adatto per PET deve includere un isotopo radioattivo che funge da emettitore positroni. Positroni hanno una breve durata in quanto si annichilano quasi immediatamente con gli elettroni dei gusci atomo di tessuto circostante. Con annientamento due fotoni gamma 511 keV con direzione opposta del movimento sono emessi, che sono registrati dallo scanner PET. 7,8 Per formare un tracciante, nuclidi PET possono essere legati covalentemente ad una molecola, come avviene in 2-deoxy- 2- [18 F] fluoroglucose (FDG), il PET tracciante più ampiamente utilizzato. 7 Tuttavia, un nuclide può anche formare legami di coordinazione a uno o più leganti (ad esempio, [68 Ga] -DOTATOC 9,10) o essere applicato come sali inorganici disciolti (ad esempio, [18 F] sodio fluoruro 11). Complessivamente, la struttura del tracciante è fondamentale in quanto determina il comportamento biodistribuzione, metabolismo ed escrezione. Un adatto nuclide PET deve combinare caratteristiche favorevoli come conveniente energia positrone e disponibilità così come un&#39;emivita adeguata per l&#39;indagine previsto. Il 68 Ga nuclide è diventata una forza essenziale nel campo della PET negli ultimi due decenni. 12,13 Ciò è dovuto principalmente alla sua disponibilità attraverso un sistema di generatore, che permette etichettatura sul posto indipendentemente dalle vicinanze di un ciclotrone. In un generatore, la madre nuclide 68 Ge viene assorbito su una colonna da cui figlia nuclide 68 Ga viene eluito e successivamente etichettata per un chelante adeguato. 6,14 Poiché il 68 Ga nuclide esiste come trivalent cazione proprio come Gd (III) 10,13, chelanti EOB-DTPA con 68 Ga invece produrrebbe un complesso con la stessa carica negativa complessiva come acido gadoxetico. Di conseguenza, che il 68 Ga tracciante potrebbe combinare una caratteristica simile specificità del fegato con l&#39;idoneità per l&#39;imaging PET. Sebbene l&#39;acido gadoxetico viene acquistato e somministrato come sale disodico, nel contesto seguente si farà riferimento ad esso come Gd [EOB-DTPA] e dal complesso non radioattivo Ga (III) come Ga [EOB-DTPA], o 68 Ga [ EOB-DTPA] nel caso della componente radiomarcato per motivi di convenienza. Per valutare la loro applicabilità come traccianti per PET, complessi metallici radioattivi devono essere esaminate estesamente in vitro, in vivo o ex vivo esperimenti prima. Per determinare l&#39;idoneità per un rispettivo problema medico, varie caratteristiche traccianti come comportamento biodistribuzione e profilo di liquidazione, la stabilità, la specificità degli organi e delle cellule o Tissue l&#39;assorbimento bisogno di essere indagato. A causa del loro carattere non invasivo, le determinazioni in vitro sono spesso eseguiti prima di esperimenti in vivo. È generalmente riconosciuto che DTPA e suoi derivati ​​sono limitatamente idonee come chelanti per 68 Ga causa di questi complessi privi inerzia cinetica, con conseguente decomposizione comparabilmente veloce quando somministrati in vivo. 14-20 Questo è principalmente causata da apo transferrina fungendo da concorrente per 68 Ga nel plasma. Tuttavia, abbiamo studiato questo nuovo tracciante per quanto riguarda la sua possibile applicazione nel campo dell&#39;imaging epatobiliare, in cui le informazioni di diagnostica possono essere fornite in pochi minuti dopo l&#39;iniezione 3,4,21-23, quindi non necessariamente richiedono stabilità tracciante a lungo termine. A questo scopo abbiamo isolato EOB-DTPA da acido gadoxetico e inizialmente eseguito la complessazione con Ga naturale (III), che esiste come miscela di due isotopi stabili, 69 Ga e 71 </sup&gt; Ga. Il complesso così ottenuto servito come campione non radioattivo per il seguente chelazione del 68 Ga. Abbiamo usato stabilito metodi e contemporaneamente valutato la loro idoneità per determinare l&#39;efficienza 68 Galabeling di EOB-DTPA e di indagare la lipofilia della nuova 68 Ga tracciante e la sua stabilità in diversi media.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">primovist</td>
			<td style="width:180px;">Bayer</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">0.25 M</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">gallium(III) chloride</td>
			<td style="width:180px;">Sigma-Aldrich Co.</td>
			<td style="width:119px;">450898</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">water (deionized)</td>
			<td style="width:180px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>&#160;tap water deionizing equipment by Auma-Tec GmbH</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">hydrochloric acid 12 M</td>
			<td style="width:180px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">20252.29</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">sodium hydroxide</td>
			<td style="width:180px;">Polskie Odczynniki Chemiczne S.A.</td>
			<td style="width:119px;">810925429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">oxalic acid</td>
			<td style="width:180px;">Sigma-Aldrich Co.</td>
			<td style="width:119px;">75688</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ethyl acetate</td>
			<td style="width:180px;">Brenntag GmbH</td>
			<td style="width:119px;">10010447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">silica gel</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.10832.9025</td>
			<td>Geduran Si 60 0,063-0,2 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">TLC silica gel 60 F254</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.16834.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">methanol</td>
			<td style="width:180px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">20903.55</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ethanol</td>
			<td style="width:180px;">Brenntag GmbH</td>
			<td style="width:119px;">10018366</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">eiethylether</td>
			<td style="width:180px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">23807.468</td>
			<td>stored over KOH plates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ammonia solution (25 %)</td>
			<td style="width:180px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">1133.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">pH electrode</td>
			<td style="width:180px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">662-1657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">stirring and heating unit</td>
			<td style="width:180px;">Heidolph</td>
			<td style="width:119px;">505-20000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">pump</td>
			<td style="width:180px;">Ilmvac GmbH</td>
			<td style="width:119px;">322002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">frit</td>
			<td style="width:180px;">-</td>
			<td style="width:119px;">custom design</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NMR spectrometer</td>
			<td style="width:180px;">Bruker Coorporation</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Ultra Shield 400</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">mass spectrometer</td>
			<td style="width:180px;">Thermo Fisher Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">elemental analyser</td>
			<td>Hekatech GmbH Analysentechnik</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>EuroVector EA 3000 CHNS</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">deuterated water D2O</td>
			<td style="width:180px;">euriso-top</td>
			<td style="width:119px;">D214</td>
			<td>99,90 % D</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name</td>
			<td style="width:180px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:681px;">Material/Equipment required for labeling procedures</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">68Ge/68Ga generator</td>
			<td style="width:180px;">ITG Isotope Technologies Garching GmbH</td>
			<td style="width:119px;">A150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">pump and dispenser system</td>
			<td style="width:180px;">Scintomics GmbH</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Variosystem</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">hydrochloric acid 30 % (suprapur)</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.00318.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">water (ultrapur)</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.01262.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">sodium chloride (suprapur)</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.06406.0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">sodium acetate (suprapur)</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.06264.0050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">glacial acetic acid (suprapur)</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.00066.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">sodium citrate dihydrate</td>
			<td style="width:180px;">VEB Laborchemie Apolda</td>
			<td style="width:119px;">10782</td>
			<td>&#62;98.5%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PS-H+ Cartridge (S)</td>
			<td style="width:180px;">Macherey-Nagel</td>
			<td style="width:119px;">731867</td>
			<td>Chromafix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">apo-Transferrin</td>
			<td style="width:180px;">Sigma-Aldrich Co.</td>
			<td style="width:119px;">T2036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PBS&#160; buffer (tablets)</td>
			<td style="width:180px;">Sigma-Aldrich Co.</td>
			<td style="width:119px;">79382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">human serum</td>
			<td style="width:180px;">Sigma-Aldrich Co.</td>
			<td style="width:119px;">H4522</td>
			<td>from human male AB plasma</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">flasks, columns etc.</td>
			<td style="width:180px;"></td>
			<td style="width:119px;">custom design</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">pH electrode</td>
			<td style="width:180px;">Knick Elektronische Messger&#228;te GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td style="width:119px;">765-Set</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">binary pump (HPLC)</td>
			<td style="width:180px;">Hewlett-Packard</td>
			<td style="width:119px;">G1312A (HP 1100)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">UV Vis detector (HPLC)</td>
			<td style="width:180px;">Hewlett-Packard</td>
			<td style="width:119px;">G1315A (HP 1100)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">radioactive detector (HPLC)</td>
			<td style="width:180px;">EGRC Berthold</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">HPLC C-18-PFP column</td>
			<td style="width:180px;">Advanced Chromatography Technologies Ltd.</td>
			<td style="width:119px;">ACE-1110-1503/A100528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">HPLC glass vials</td>
			<td style="width:180px;">GTG Glastechnik Graefenroda GmbH</td>
			<td style="width:119px;">8004-HP-H/i3&#181;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">pipette</td>
			<td style="width:180px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">plastic vials</td>
			<td style="width:180px;">Sarstedt AG &#38; Co.</td>
			<td style="width:119px;">6542.007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">plastic vials</td>
			<td style="width:180px;">Greiner Bio-One International GmbH</td>
			<td style="width:119px;">717201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">activimeter</td>
			<td style="width:180px;">MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Isomed 2010</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">tweezers</td>
			<td style="width:180px;"></td>
			<td style="width:119px;">custom design</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">incubator</td>
			<td style="width:180px;">Heraeus Instruments GmbH</td>
			<td style="width:119px;">51008815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">vortex mixer</td>
			<td style="width:180px;">Fisons</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Whirlimixer</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">centrifuge</td>
			<td style="width:180px;">Heraeus Instruments GmbH</td>
			<td style="width:119px;">75003360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">gamma well counter</td>
			<td style="width:180px;">MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Isomed 2100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">water for chromatography</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.15333.2500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">acetonitrile for chromatography</td>
			<td style="width:180px;">Merck KGaA</td>
			<td style="width:119px;">1.00030.2500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">trifluoroacetic acid</td>
			<td style="width:180px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">91707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">TLC radioactivity scanner</td>
			<td style="width:180px;">raytest Isotopenmessger&#228;te GmbH</td>
			<td style="width:119px;">B00003875</td>
			<td>equipped with beta plastic detector</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

investigations on the ga(iii) complex of eob-dtpa and its 68ga radiolabeled analogue

Abbiamo dimostrato un metodo per l&#39;isolamento di EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris (carbossimetil) -4- (etossibenzile) Acido -undecanedioic) dalla sua Gd (III) e protocolli per preparazione del suo romanzo non radioattiva, cioè, naturale Ga (III) così come radioattivo 68 complesso Ga. Il legante, nonche la Ga (III) sono stati caratterizzati mediante spettroscopia di risonanza magnetica nucleare (NMR), spettrometria di massa e analisi elementare. 68 Ga è stato ottenuto con un metodo eluizione standard da un / 68 generatore 68 Ge Ga. Gli esperimenti per valutare l&#39;efficienza di 68 Ga-etichettatura dei EOB-DTPA a pH sono stati eseguiti 3,8-4,0. tecniche di analisi stabilito la radio TLC (cromatografia su strato sottile) e HPLC della radio (cromatografia liquida ad alte prestazioni) sono stati utilizzati per determinare la purezza radiochimica del tracciante. Come prima indagine di lipofilia 68 Ga traccianti &#39;la ottanolo / acqua distributioCoefficiente di 68 specie Ga presenti in una soluzione a pH 7,4 è stato determinato mediante un metodo di estrazione. In vitro misure di stabilità del tracciante in vari media a pH fisiologico state eseguite, rivelando diversi tassi di decomposizione.

Il ligando EOB-DTPA e Ga non radioattivo (III) sono stati analizzati mediante 1 H e 13 C {1} H spettroscopia NMR, spettrometria di massa e analisi elementare. I risultati riportati in Tabella 1 e rappresentati nelle figure 1-6 verifica la purezza delle sostanze. Eluizione del generatore 68 Ge / 68 Ga ha prodotto soluzioni di 400-600 MBq 68 Ga. I risultati descritti procedura di etichettatura nella formazione della desiderata tracciante 68 Ga [EOB-DTPA], indicati come Radio HPLC picco esibendo un tempo di ritenzione di 2,8 min (Figura 7). Il confronto con il tempo di ritenzione del campione Ga [EOB-DTPA] nel rivelatore UV-vis a 220 nm (2,7 min, Figura 8) conferma etichettatura successo. Mancanza di coordinamento 68 Ga è rilevato come la radio picco al 2,1 min (Figura7). L&#39;efficienza 68 Ga-etichettatura di EO-BDTPA è stata studiata determinando la resa etichettatura in funzione della concentrazione di ligando mediante HPLC (Figura 9). Le rese sono state determinate in triplice copia e deviazioni standard sono state calcolate. A seconda del pH e la concentrazione di anioni presenti in soluzione, non coordinate o non etichettati 68 Ga può esistere in varie specie, ad esempio, gallati o idrossido insolubile. 31 L&#39;espressione generica &quot;connessione 68 Ga&quot; 32 viene utilizzato per tutti etichettati non specie in soluzione se l&#39;idrossido, che è generalmente indicato come &quot;colloidale 68 Ga&quot;. Sotto le condizioni di analisi descritte, libera 68 Ga muove con il solvente (R f = 1,0) su una lastra TLC. Colloidale 68 Ga non può essere rilevato tramite HPLC, mentre su una piastra TLC appare come un&#39;attivitàall&#39;origine (R f = 0). Un cromatogramma rappresentativo di una piastra TLC analizzato con uno scanner di radioattività TLC è mostrato in Figura 10. Il tracciante presenta il comportamento di ritenzione diversa, a seconda che un campione di soluzione di etichettatura (pH 3,8-4,0, R f = 0,3) o un campione fisiologico pH (R f = 0.5) è stato analizzato. Per studiare la stabilità del tracciante, appena etichettati 68 Ga [EOB-DTPA] è stato aggiunto a campioni di pH fisiologico, contenente diluito PBS (phosphate concentrazione 5,5 mM, A), eccesso di apo transferrina (1,6 mg / ml in PBS diluito con una concentrazione di fosfato di 0,8 mM, B) e siero umano (C) rispettivamente. Nel corso del tempo, la purezza radiochimica (RCP t) di tracciante nei campioni è stata determinata mediante TLC. La percentuale di tracciante intatto è stato calcolato come rapporto tra RCP tai rispettivi punti di tempo e RCP 0 al punto di partenza (Tabella 2). Questo è stato necessario a causa delle soluzioni di etichettatura contenenti tracciante delle diverse RCP 0 (93-96%). La percentuale così standardizzata di tracciante intatto è raffigurata come una funzione del tempo nella Figura 11. Per la determinazione dei campioni acquosi LoGD di tracciante in una soluzione PBS diluito sono stati preparati. I campioni sono stati mescolati con n-ottanolo, centrifugati e successivamente aliquote sono state rimosse per determinare la concentrazione di attività in entrambe le fasi. Valori di attività e successivo calcolo LoGD ne vengono illustrate nella Tabella 3. Il valore medio LoGD è 3.54 ± 0.08. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig1.jpg" /> Figura 1. 1 H-NMR Spettro di EOB-DTPA. &lt;<html> / strong&gt; Lo spettro è stato registrato in D 2 O a 400.1 MHz. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig1large.jpg" target="_blank">Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="figura 2" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig2.jpg" /> Figura 2. 13 C {1} H-NMR spettro di EOB-DTPA. Lo spettro è stato registrato in D 2 O a 100,6 MHz. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig2large.jpg" target="_blank">Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig3.jpg" /> Figura 3. MS di EOB-DTPA (Elettrospray (ESI), metanolo, modalità negativa).54334fig3large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig4.jpg" /> Figura 4. 1 H-NMR spettro di Ga [EOB-DTPA]. Lo spettro è stato registrato in D 2 O a 400.1 MHz. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig4large.jpg" target="_blank">Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig5.jpg" /> Figura 5. 13 C {1} H-NMR spettro di Ga [EOB-DTPA]. Lo spettro è stato registrato in D 2 O a 100,6 MHz. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig5large.jpg" target="_blank">Si prega di fare clic su di lei</a><html> e per vedere una versione più grande di questa figura. <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig6.jpg" /> Figura 6. MS di Ga [EOB-DTPA] (ESI, metanolo, modalità negativa), insieme ad una rappresentazione dettagliata del modello isotopo del picco molecolare. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig6large.jpg" target="_blank">Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig7.jpg" /> Figura 7. Rappresentante HPLC cromatogramma di un campione di 68 Ga [EOB-DTPA] contenente in parti scoordinato 68 Ga, registrata dal rivelatore di radioattività. Non coordinata 68 Ga presenta un tempo di ritenzione di 2,1 min, mentre viene rilevato il tracciante al 2,8 min .target = &quot;_ blank&quot;&gt; Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig8.jpg" /> Figura 8. Rappresentante HPLC cromatogramma della sostanza di riferimento Ga [EOB-DTPA], come rilevato nel canale UV-vis a 220 nm. Il tempo di ritenzione dello standard freddo è 2.7 min. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig8large.jpg" target="_blank">Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 9" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig9.jpg" /> Figura 9. Rappresentazione di 68 efficienza Ga-etichettatura dei EOB-DTPA. La resa di etichettatura, come determinato mediante HPLC viene tracciata in funzione della concentrazione di EOB-DTPA (22-29 MBq attività di partenza, pH 3,8-4.0, 5 min, RT). La deviazione standard è rappresentato da barre di errore. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig9large.jpg" target="_blank">Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig10.jpg" /> Figura 10. Rappresentante TLC cromatogramma rivelando diverse 68 specie Ga. Un campione di 68 Ga [EOB-DTPA] a diluito PBS (concentrazione di fosfati 5,5 mm, pH = 7.4) è stata analizzata dopo 110 minuti di incubazione. Distribuzione Esempi di colloidale 68 Ga (R f = 0), 68 Ga [EOB-DTPA] (R f = 0,5) e la connessione 68 Ga (R f = 1,0) su una lastra TLC 70 millimetri, come rilevato da uno scanner radioattività TLC è presentata. Conti sono decadimento corretti. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig10large.jpg" target="_blank">Cliccate qui per visualizzare un più grande</a>versione di questa figura. <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig11.jpg" /> Figura 11. Determinazioni di stabilità di 68 Ga [EOB-DTPA] in diversi media. Il decadimento corretti percentuale standardizzata di tracciante intatto come determinato tramite TLC, è raffigurato come una funzione del tempo. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54334/54334fig11large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura .</a> <img alt="Tabella 1" src="/files/ftp_upload/54334/54334table1.jpg" /> Tabella 1. Risultati delle NMR spettroscopica, MS e analisi elementari eseguite per EOB-DTPA e Ga [EOB-DTPA]. Intensità relative dei picchi MS sono espressi in%, l&#39;assegnazione a picchi vengono riportate tra parentesi quadre. I valori CHN Elemental erano calculata per C 23 H 33 N 3 O 11 · H 2 O (EOB-DTPA) e (NH 4) 0.75 H 1.25 [C 23 H 28 GaN 3 O 11] · 2H 2 O (Ga [EOB-DTPA]). <img alt="Tabella 2" src="/files/ftp_upload/54334/54334table2.jpg" /> Tabella 2. determinazione di stabilità di 68 Ga [EOB-DTPA] in diversi mezzi di comunicazione. L&#39;RCP di 68 Ga [EOB-DTPA] nei media A, B e C è stata determinata mediante TLC in determinati intervalli di tempo. La composizione dei campioni è dato come percentuali in% del tracciante / libera 68 Ga / colloidali 68 Ga. La percentuale di tracciante intatto è standardizzato come rapporto di RCP t / RCP 0. RCP 0 è la rispettiva RCP del tracciante at = 0 min. . Tabella 3. Determinazione LoGD Decay corretti valori alfa 0, X di tre aliquote (x = 1, 2, 3) rimosso da ogni fase (W: acquosa, O: n n-octanolo) di un campione. Tutte le attività sono espressi in cpm. LoGD è calcolato come descritto nel paragrafo 5 del protocollo. L&#39;esperimento è stato ripetuto due volte.

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Investigations on the GaIII Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue

Una procedura per l&#39;isolamento di EOB-DTPA e successiva complessazione con Ga naturale (III) e 68 Ga è presentato qui, nonché un&#39;attenta analisi di tutti i composti e ricerche sull&#39;efficienza etichettatura, la stabilità in vitro e l&#39;ottanolo / acqua coefficiente di distribuzione del complesso radiomarcato.

Indagini su GA (III) Complesso di EOB-DTPA e la sua<sup&gt; 68</sup&gt; Ga marcata radioattivamente analogico

We demonstrate a method for the isolation of EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris(carboxymethyl)-4-(ethoxybenzyl)-undecanedioic acid) from its Gd(III) ...

investigations-on-ga-iii-complex-eob-dtpa-its-68ga-radiolabeled

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Chemistry

Investigations on the Ga(III) Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue

9.9K Views.  University Hospital Jena.  Una procedura per l'isolamento di EOB-DTPA e successiva complessazione con Ga naturale (III) e 68 Ga è presentato qui, nonché un'attenta analisi di tutti i composti e ricerche sull'efficienza etichettatura, la stabilità in vitro e l'ottanolo / acqua coefficiente di distribuzione del complesso radiomarcato. 

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LabVIEW-operated Novel Nanoliter Osmometer for Ice Binding Protein Investigations

Ice-binding proteins (IBPs), including antifreeze proteins, ice structuring proteins, thermal hysteresis proteins, and ice recrystallization inhibition proteins, are found in cold-adapted organisms and protect them from freeze injuries by interacting with ice crystals. IBPs are found in a variety of organism, including fish1, plants2, 3, arthropods4, 5, fungi6, and bacteria7. IBPs adsorb to the surfaces of ice crystals and prevent water molecules from joining the ice lattice at the IBP adsorption location. Ice that grows on the crystal surface between the adsorbed IBPs develops a high curvature that lowers the temperature at which the ice crystals grow, a phenomenon referred to as the Gibbs-Thomson effect. This depression creates a gap (thermal hysteresis, TH) between the melting point and the nonequilibrium freezing point, within which ice growth is arrested8-10, see Figure 1. One of the main tools used in IBP research is the nanoliter osmometer, which facilitates measurements of the TH activities of IBP solutions. Nanoliter osmometers, such as the Clifton instrument (Clifton Technical Physics, Hartford, NY,) and Otago instrument (Otago Osmometers, Dunedin, New Zealand), were designed to measure the osmolarity of a solution by measuring the melting point depression of droplets with nanoliter volumes. These devices were used to measure the osmolarities of biological samples, such as tears11, and were found to be useful in IBP research. Manual control over these nanoliter osmometers limited the experimental possibilities. Temperature rate changes could not be controlled reliably, the temperature range of the Clifton instrument was limited to 4,000 mOsmol (about -7.5 &deg;C), and temperature recordings as a function of time were not an available option for these instruments.
We designed a custom-made computer-controlled nanoliter osmometer system using a LabVIEW platform (National Instruments). The cold stage, described previously9, 10, contains a metal block through which water circulates, thereby functioning as a heat sink, see Figure 2. Attached to this block are thermoelectric coolers that may be driven using a commercial temperature controller that can be controlled via LabVIEW modules, see Figure 3. Further details are provided below. The major advantage of this system is its sensitive temperature control, see Figure 4. Automated temperature control permits the coordination of a fixed temperature ramp with a video microscopy output containing additional experimental details.
To study the time dependence of the TH activity, we tested a 58 kDa hyperactive IBP from the Antarctic bacterium Marinomonas primoryensis (MpIBP)12. This protein was tagged with enhanced green fluorescence proteins (eGFP) in a construct developed by Peter Davies' group (Queens University)10. We showed that the temperature change profile affected the TH activity. Excellent control over the temperature profile in these experiments significantly improved the TH measurements. The nanoliter osmometer additionally allowed us to test the recrystallization inhibition of IBPs5, 13. In general, recrystallization is a phenomenon in which large crystals grow larger at the expense of small crystals. IBPs efficiently inhibit recrystallization, even at low concentrations14, 15. We used our LabVIEW-controlled osmometer to quantitatively follow the recrystallization of ice and to enforce a constant ice fraction using simultaneous real-time video analysis of the images and temperature feedback from the sample chamber13. The real-time calculations offer additional control options during an experimental procedure. A stage for an inverted microscope was developed to accommodate temperature-controlled microfluidic devices, which will be described elsewhere16.
The Cold Stage System
The cold stage assembly (Figure 2) consists of a set of thermoelectric coolers that cool a copper plate. Heat is removed from the stage by flowing cold water through a closed compartment under the thermoelectric coolers. A 4 mm diameter hole in the middle of the copper plate serves as a viewing window. A 1 mm diameter in-plane hole was drilled to fit the thermistor. A custom-made copper disc (7 mm in diameter) with several holes (500 &mu;m in diameter) was placed on the copper plate and aligned with the viewing window. Air was pumped at a flow rate of 35 ml/sec and dried using Drierite (W.A. Hammond). The dry air was used to ensure a dry environment at the cooling stage. The stage was connected via a 9 pin connection outlet to a temperature controller (Model 3040 or 3150, Newport Corporation, Irvine, California, US). The temperature controller was connected via a cable to a computer GPIB-PCI card (National instruments, Austin, Texas, USA).

Ice binding proteins (IBPs), also known as antifreeze proteins, inhibit ice growth and are a promising additive for use in the cryopreservation of tissues. The main tool used to investigate IBPs is the nanoliter osmometer. We developed a home-designed cooling stage mounted on an optical microscope and controlled using a custom-built LabVIEW routine. The nanoliter osmometer described here manipulated the sample temperature in an ultra-sensitive manner.

LabVIEW a comando nanolitri osmometro Novel per le indagini Protein Ice rilegatura

Ice-binding proteins (IBPs), including antifreeze proteins, ice structuring proteins, thermal hysteresis proteins, and ice recrystallization inhibition ...

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Chimica

Reductive Electropolymerization of a Vinyl-containing Poly-pyridyl Complex on Glassy Carbon and Fluorine-doped Tin Oxide Electrodes

Controllable electrode surface modification is important in a number of fields, especially those with solar fuels applications. Electropolymerization is one surface modification technique that electrodeposits a polymeric film at the surface of an electrode by utilizing an applied potential to initiate the polymerization of substrates in the Helmholtz layer. This useful technique was first established by a Murray-Meyer collaboration at the University of North Carolina at Chapel Hill in the early 1980s and utilized to study numerous physical phenomena of films containing inorganic complexes as the monomeric substrate. Here, we highlight a procedure for coating electrodes with an inorganic complex by performing reductive electropolymerization of the vinyl-containing poly-pyridyl complex onto glassy carbon and fluorine doped tin oxide coated electrodes. Recommendations on electrochemical cell configurations and troubleshooting procedures are included. Although not explicitly described here, oxidative electropolymerization of pyrrole-containing compounds follows similar procedures to vinyl-based reductive electropolymerization but are far less sensitive to oxygen and water.

A procedure for performing reductive electropolymerization of vinyl-containing compounds onto glassy carbon and fluorine doped tin-oxide coated electrodes is presented. Recommendations on electrochemical cell configurations and troubleshooting procedures are included. Although not explicitly described here, oxidative electropolymerization of pyrrole-containing compounds follows similar procedures to vinyl-based reductive electropolymerization.

Riduttiva elettropolimerizzazione di un Poly-piridil Complex-vinile contenente on Glassy carbonio e fluoro-drogato Tin Oxide Elettrodi

Controllable electrode surface modification is important in a number of fields, especially those with solar fuels applications. Electropolymerization is ...

Photochemical Oxidative Growth of Iridium Oxide Nanoparticles on CdSe@CdS Nanorods

We demonstrate a procedure for the photochemical oxidative growth of iridium oxide catalysts on the surface of seeded cadmium selenide-cadmium sulfide (CdSe@CdS) nanorod photocatalysts. Seeded rods are grown using a colloidal hot-injection method and then moved to an aqueous medium by ligand exchange. CdSe@CdS nanorods, an iridium precursor and other salts are mixed and illuminated. The deposition process is initiated by absorption of photons by the semiconductor particle, which results with formation of charge carriers that are used to promote redox reactions. To insure photochemical oxidative growth we used an electron scavenger. The photogenerated holes oxidize the iridium precursor, apparently in a mediated oxidative pathway. This results in the growth of high quality crystalline iridium oxide particles, ranging from 0.5 nm to about 3 nm, along the surface of the rod. Iridium oxide grown on CdSe@CdS heterostructures was studied by a variety of characterization methods, in order to evaluate its characteristics and quality. We explored means for control over particle size, crystallinity, deposition location on the CdS rod, and composition. Illumination time and excitation wavelength were found to be key parameters for such control. The influence of different growth conditions and the characterization of these heterostructures are described alongside a detailed description of their synthesis. Of significance is the fact that the addition of iridium oxide afforded the rods astounding photochemical stability under prolonged illumination in pure water (alleviating the requirement for hole scavengers).

A protocol for the photochemical oxidative growth of small crystalline iridium oxide nanoparticles on the surface of CdSe@CdS seeded rod nanoparticles is presented.

Fotochimica ossidativa crescita di Iridium ossido di nanoparticelle su CdSe @ CdS Nanorods

We demonstrate a procedure for the photochemical oxidative growth of iridium oxide catalysts on the surface of seeded cadmium selenide-cadmium sulfide ...

Synthesis and Characterization of Supramolecular Colloids

Control over colloidal assembly is of utmost importance for the development of functional colloidal materials with tailored structural and mechanical properties for applications in photonics, drug delivery and coating technology. Here we present a new family of colloidal building blocks, coined supramolecular colloids, whose self-assembly is controlled through surface-functionalization with a benzene-1,3,5-tricarboxamide (BTA) derived supramolecular moiety. Such BTAs interact via directional, strong, yet reversible hydrogen-bonds with other identical BTAs. Herein, a protocol is presented that describes how to couple these BTAs to colloids and how to quantify the number of coupling sites, which determines the multivalency of the supramolecular colloids. Light scattering measurements show that the refractive index of the colloids is almost matched with that of the solvent, which strongly reduces the van der Waals forces between the colloids. Before photo-activation, the colloids remain well dispersed, as the BTAs are equipped with a photo-labile group that blocks the formation of hydrogen-bonds. Controlled deprotection with UV-light activates the short-range hydrogen-bonds between the BTAs, which triggers the colloidal self-assembly. The evolution from the dispersed state to the clustered state is monitored by confocal microscopy. These results are further quantified by image analysis with simple routines using ImageJ and Matlab. This merger of supramolecular chemistry and colloidal science offers a direct route towards light- and thermo-responsive colloidal assembly encoded in the surface-grafted monolayer.

A protocol for the synthesis and characterization of colloids coated with supramolecular moieties is described. These supramolecular colloids undergo self-assembly upon the activation of the hydrogen-bonds between the surface-anchored molecules by UV-light.

Sintesi e caratterizzazione di supramolecolari colloidi

Control over colloidal assembly is of utmost importance for the development of functional colloidal materials with tailored structural and mechanical ...

On-line Analysis of Nitrogen Containing Compounds in Complex Hydrocarbon Matrixes

The shift to heavy crude oils and the use of alternative fossil resources such as shale oil are a challenge for the petrochemical industry. The composition of heavy crude oils and shale oils varies substantially depending on the origin of the mixture. In particular they contain an increased amount of nitrogen containing compounds compared to the conventionally used sweet crude oils. As nitrogen compounds have an influence on the operation of thermal processes occurring in coker units and steam crackers, and as some species are considered as environmentally hazardous, a detailed analysis of the reactions involving nitrogen containing compounds under pyrolysis conditions provides valuable information. Therefore a novel method has been developed and validated with a feedstock containing a high nitrogen content, i.e., a shale oil. First, the feed was characterized offline by comprehensive two-dimensional gas chromatography (GC &#215; GC) coupled with a nitrogen chemiluminescence detector (NCD). In a second step the on-line analysis method was developed and tested on a steam cracking pilot plant by feeding pyridine dissolved in heptane. The former being a representative compound for one of the most abundant classes of compounds present in shale oil. The composition of the reactor effluent was determined via an in-house developed automated sampling system followed by immediate injection of the sample on a GC &#215; GC coupled with a time-of-flight mass spectrometer (TOF-MS), flame ionization detector (FID) and NCD. A novel method for quantitative analysis of nitrogen containing compounds using NCD and 2-chloropyridine as an internal standard has been developed and demonstrated.

A method combining comprehensive two-dimensional gas chromatography with nitrogen chemiluminescence detection has been developed and applied to on-line analysis of nitrogen containing compounds in a complex hydrocarbon matrix.

Analisi on-line dei composti contenenti azoto in matrici idrocarburi complessi

The shift to heavy crude oils and the use of alternative fossil resources such as shale oil are a challenge for the petrochemical industry. The ...

Preparation of Chitosan-based Injectable Hydrogels and Its Application in 3D Cell Culture

The protocol presents a facile, efficient, and versatile method to prepare chitosan-based hydrogels using dynamic imine chemistry. The hydrogel is prepared by mixing solutions of glycol chitosan with a synthesized benzaldehyde terminated polymer gelator, and hydrogels are efficiently obtained in several minutes at room temperature. By varying ratios between glycol chitosan, polymer gelator, and water contents, versatile hydrogels with different gelation times and stiffness are obtained. When damaged, the hydrogel can recover its appearances and modulus, due to the reversibility of the dynamic imine bonds as crosslinkages. This self-healable property enables the hydrogel to be injectable since it can be self-healed from squeezed pieces to an integral bulk hydrogel after the injection process. The hydrogel is also multi-responsive to many bio-active stimuli due to different equilibration statuses of the dynamic imine bonds. This hydrogel was confirmed as bio-compatible, and L929 mouse fibroblast cells were embedded following standard procedures and the cell proliferation was easily assessed by a 3D cell cultivation process. The hydrogel can offer an adjustable platform for different research where a physiological mimic of a 3D environment for cells is profited. Along with its multi-responsive, self-healable, and injectable properties, the hydrogels can potentially be applied as multiple carriers for drugs and cells in future bio-medical applications.

Here we describe a facile preparation of chitosan-based injectable hydrogels using dynamic imine chemistry. Methods to adjust the hydrogel&#8217;s mechanical strength and its application in 3D cell culture are presented.

Preparazione di idrogeli iniettabili a base di chitosano e la sua applicazione nella coltura cellulare 3D

The protocol presents a facile, efficient, and versatile method to prepare chitosan-based hydrogels using dynamic imine chemistry. The hydrogel is ...

Molten-Salt Synthesis of Complex Metal Oxide Nanoparticles

The development of feasible synthesis methods is critical for the successful exploration of novel properties and potential applications of nanomaterials. Here, we introduce the molten-salt synthesis (MSS) method for making metal oxide nanomaterials. Advantages over other methods include its simplicity, greenness, reliability, scalability, and generalizability. Using pyrochlore lanthanum hafnium oxide (La2Hf2O7) as a representative, we describe the MSS protocol for the successful synthesis of complex metal oxide nanoparticles (NPs). Furthermore, this method has the unique ability to produce NPs with different material features by changing various synthesis parameters such as pH, temperature, duration, and post-annealing. By fine-tuning these parameters, we are able to synthesize highly uniform, non-agglomerated, and highly crystalline NPs. As a specific example, we vary the particle size of the La2Hf2O7&#160;NPs by changing the concentration of the ammonium hydroxide solution used in the MSS process, which allows us to further explore the effect of particle size on various properties. It is expected that the MSS method will become a more popular synthesis method for nanomaterials and more widely employed in the nanoscience and nanotechnology community in the upcoming years.

Here, we demonstrate a unique, relatively low-temperature, molten-salt synthesis method for preparing uniform complex metal oxide lanthanum hafnate nanoparticles.

Sali fusi sintesi di nanoparticelle di ossido di metallo complesso

The development of feasible synthesis methods is critical for the successful exploration of novel properties and potential applications of nanomaterials. ...

Extraction of Lignin with High &#946;-O-4 Content by Mild Ethanol Extraction and Its Effect on the Depolymerization Yield

Lignin valorization strategies are a key factor for achieving more economically competitive biorefineries based on lignocellulosic biomass. Most of the emerging elegant procedures to obtain specific aromatic products rely on the lignin substrate having a high content of the readily cleavable &#946;-O-4 linkage as present in the native lignin structure. This provides a miss-match with typical technical lignins that are highly degraded and therefore are low in &#946;-O-4 linkages. Therefore, the extraction yields, and the quality of the obtained lignin are of utmost importance to access new lignin valorization pathways. In this manuscript, a simple protocol is presented to obtain lignins with high &#946;-O-4 content by relatively mild ethanol extraction that can be applied to different lignocellulose sources. Furthermore, analysis procedures to determine the quality of the lignins are presented together with a depolymerization protocol that yields specific phenolic 2-arylmethyl-1,3-dioxolanes, which can be used to evaluate the obtained lignins. The presented results demonstrate the link between lignin quality and potential for the lignins to be depolymerized into specific monomeric aromatic chemicals. Overall, the extraction and depolymerization demonstrates a trade-off between the lignin extraction yield and the retention of the native aryl-ether structure and thus the potential of the lignin to be used as the substrate for the production of chemicals for higher-value applications.

Here, we present a protocol to perform ethanol extraction of lignin from several biomass sources. The effect of the extraction conditions on the lignin yield and &#946;-O-4 content are presented. Selective depolymerization is performed on the obtained lignins to obtain high aromatic monomer products.

Estrazione della lignina con alto contenuto di β-O-4 da etanolo lieve estrazione ed il relativo effetto sul rendimento depolimerizzazione

Lignin valorization strategies are a key factor for achieving more economically competitive biorefineries based on lignocellulosic biomass. Most of the ...

Analysis of Complex Molecules and Their Reactions on Surfaces by Means of Cluster-Induced Desorption/Ionization Mass Spectrometry

Desorption/Ionization Induced by Neutral SO2 Clusters (DINeC) is employed as a very soft and efficient desorption/ionization technique for mass spectrometry (MS) of complex molecules and their reactions on surfaces. DINeC is based on a beam of SO2 clusters impacting on the sample surface at low cluster energy. During cluster-surface impact, some of the surface molecules are desorbed and ionized via dissolvation in the impacting cluster; as a result of this dissolvation-mediated desorption mechanism, low cluster energy is sufficient and the desorption process is extremely soft. Both surface adsorbates and molecules of which the surface is composed of can be analyzed. Clear and fragmentation-free spectra from complex molecules such as peptides and proteins are obtained. DINeC does not require any special sample preparation, in particular no matrix has to be applied. The method yields quantitative information on the composition of the samples; molecules at a surface coverage as low as 0.1 % of a monolayer can be detected. Surface reactions such as H/D exchange or thermal decomposition can be observed in real-time and the kinetics of the reactions can be deduced. Using a pulsed nozzle for cluster beam generation, DINeC can be efficiently combined with ion trap mass spectrometry. The matrix-free and soft nature of the DINeC process in combination with the MSn capabilities of the ion trap allows for very detailed and unambiguous analysis of the chemical composition of complex organic samples and organic adsorbates on surfaces.

Neutral SO2 clusters of low kinetic energy (&#60; 0.8 eV/constituent) are used to desorb complex surface molecules such as peptides or lipids for further analysis by means of mass spectrometry using an ion trap mass spectrometer. No special sample preparation is required, and real-time observation of reactions is possible.

Analisi delle molecole complesse e delle loro reazioni sulle superfici mediante mezzi di desorpazione/spettrometria di massa indotta da cluster

Desorption/Ionization Induced by Neutral SO2 Clusters (DINeC) is employed as a very soft and efficient desorption/ionization technique for mass ...

Synthesis of Functionalized Magnetic Nanoparticles, Their Conjugation with the Siderophore Feroxamine and its Evaluation for Bacteria Detection

In the present work, the synthesis of magnetic nanoparticles, its coating with SiO2, followed by its amine functionalization with (3-aminopropyl)triethoxysilane (APTES) and its conjugation with deferoxamine, a siderophore recognized by Yersinia enterocolitica, using a succinyl moiety as a linker are described.
Magnetic nanoparticles (MNP) of magnetite (Fe3O4) were prepared by solvothermal method and coated with SiO2 (MNP@SiO2) using the St&#246;ber process followed by functionalization with APTES (MNP@SiO2@NH2). Then, feroxamine was conjugated with the MNP@SiO2@NH2 by carbodiimide coupling to give MNP@SiO2@NH2@Fa. The morphology and properties of the conjugate and intermediates were examined by eight different methods including powder X-Ray diffraction (XRD), Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), Raman spectroscopy, X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), transmission electron microscopy (TEM) and energy dispersive X-Ray (EDX) mapping. This exhaustive characterization confirmed the formation of the conjugate. Finally, in order to evaluate the capacity and specificity of the nanoparticles, they were tested in a capture bacteria assay using Yersinia enterocolitica.

This work describes protocols for the preparation of magnetic nanoparticles, its coating with SiO2, followed by its amine functionalization with (3-aminopropyl)triethoxysilane (APTES) and its conjugation with deferoxamine using a succinyl moiety as a linker. A deep structural characterization description and a capture bacteria assay using Y. enterocolitica for all the intermediate nanoparticles and the final conjugate are also described in detail.

Sintesi di nanoparticelle magnetiche funzionalizzate, la loro coniugazione con la feroxamina Sideroforo e la sua valutazione per il rilevamento dei batteri

Indagini su GA (III) Complesso di EOB-DTPA e la sua

Riepilogo

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