התחילו בחבישת מסכה, כיסוי שיער וחלוק מעבדה נקי או פילינג. לאחר מכן, הניחו את העכבר המרדים על משטח נקי המופרד מאזור הניתוח והתאימו לו חרוט אף המספק 1.5% איזופלורן עם 21% חמצן. לאחר מכן להזריק buprenorphine תת עורית לתוך אזור החזה צוואר הרחם גבי.
כמו כן להזריק הפרין intraperitoneally כדי למנוע היווצרות פקקת במהלך תקופת החסימה. החל משחה אופתלמית על העיניים כדי למנוע נזק לקרנית ולהסיר שיער מהבטן הגחונית באמצעות קוצץ. העבר את העכבר לשמיכת המים המחוממת באזור הניתוח.
שוב, התאימו אותו לקונוס אף המספק איזופלורן. לאחר מכן, מקם את העכבר בשכיבה גבית ולאבטח את הגפיים לשולחן עם סרט כירורגי. עקוב אחר טמפרטורת הגוף של החיה באמצעות מדחום רקטלי ספציפי למכרסמים.
לאחר חיטוי יסודי של הבטן, בצע בדיקת צביטת בוהן כדי לוודא שבעל החיים מורדם לחלוטין. לבסוף, ללבוש כפפות סטריליות ולעטוף את אתר הניתוח. ראשית, בצע חתך בטני גחוני בקו האמצע של שלושה עד חמישה סנטימטרים בעור באמצעות להב אזמל מספר 15.
יש להפריד 0.5 ס"מ מקצה העור מהחיתולית התחתונה של השריר כדי לאפשר מיקום סיכות מאוחר יותר. לאחר מכן ממשיכים את החתך דרך דופן הבטן לאורך האלבה הליניארית באמצעות מספריים מיקרו טעונות קפיץ ומניחים משחזר. מניחים רפידות גזה סטריליות טבולות במי מלח סטריליים חמים סביב אזור הניתוח.
הסר את המעי הדק מחלל הבטן. הפכו אותו בגולגולת ומשמאל לבעל החיים, והניחו אותו על הרפידות הלחות. מניחים עוד כרית גזה לחה על הרקמות כדי למנוע התייבשות.
אתר את העורק המזנטרי העליון, או SMA, גחוני לווריד הנבוב התחתון caudal לעורק הצליאק וגולגולת לעורק הכליה. נתחו אותו הרחק מרקמת החיבור שמסביב. הניחו קליפ מיקרו-וסקולרי א-טראומטי לאורך בסיס ה-SMA במקום בו הוא מסתעף מאבי העורקים הבטני.
אמת איסכמיה של המעי הדק על ידי ציון שינוי הצבע מוורוד לבן חיוור. להחזיר את הקרביים למקומם המקורי בתוך חלל הבטן למשך התקופה האיסכמית. הסר את retractor ולכסות את החתך עם גזה לחה.
לאחר פרק זמן של 45 דקות של איסכמיה, הסר את הקליפ המסתיר. אמת את שיקום זרימת הדם על ידי התבוננות בפעימה מזנטרית וצבע סמוק. יש למרוח מלח סטרילי חם תוך צפקי כדי לשמור על הידרציה מתאימה.
לאחר מכן לסגור את שרירי הבטן עם תפר 6-0 polyglactin 910. יש לתת bupivacaine באופן מקומי לאורך קו חתך השריר להקלה על הכאב. סגור את העור עם סיכות כירורגיות או קליפסים לפצע.
החזירו את העכבר לתא חם על שמיכת מים במחזור. תן לעכבר להתאושש במשך 90 דקות ועקוב אחר העכבר לאיתור סימני כאב או מצוקה. לאחר ביצוע המתת חסד הומנית, לאסוף את הרקמות הרצויות כגון אונות הכבד, כולל האונות הצדדיות השמאליות, החציון השמאלי והחציון הימני.
לאחר מכן לאסוף את שתי הכליות. חותכים את הכליה השמאלית לאורכה ואת הכליה הימנית כחתך רוחב. לבסוף, לאסוף את כל אורך המעי הדק והגס.
כדי לחלק את מקטעי המעי הדק למקטעים באורך שווה, קפלו את המעי הדק לצורת Z כאשר הקו העליון הוא התריסריון, הקו האמצעי הוא הג'ג'ונום, והשורה התחתונה היא האילאום. החלק הנותר של המעי הוא המעי הגס. לשטוף את לומן של קטעי המעי עם מלוחים באמצעות מזרק 10 מיליליטר מודבק עם אנגיוקטטר 20 מד.
לאחר מכן, חתכו את אורך המעיים באמצעות מספריים לניתוח מיקרו והניחו כל קטע מעיים שטוח כאשר הצד הלומינלי פונה כלפי מעלה. בעזרת מזרק של שלושה מיליליטר המודבק במחט של 27 מד, מורחים בנדיבות 10% פורמלין חוצץ טיפה כדי לצפות את כל אורך הרירית. לאחר מכן גלגלו כל מקטע סביב קיסם, וודאו שהחלק הפרוקסימלי יוצר את החלק הפנימי של הגליל והלומן פונה לחלק הפנימי.
לאחר גלגול, המעי צריך להיראות כמו גליל שוויצרי. הניחו את הפנים הספירליות של הגליל השוויצרי הבודד כלפי מעלה בתוך קלטות הרקמה המסומנות בנפרד. לבסוף, הניחו את הרקמות בבקבוקונים מסומנים מלאים ב-10% פורמלין חוצץ כדי לקבע אותן בטמפרטורת החדר.
לאחר IRI במעי, צביעת H&E של הג'ג'ונום והאילאום מעכברים בקבוצת הדמה הראתה וילי ארוך ודק ללא עיוות. ואילו חלקים מהעכברים בקבוצת IRI הציגו אזורים של נמק ודימום עם קהות ועיוות של הווילי הנותר. יתר על כן, נזק מיקרוסקופי לכל שלושת מקטעי המעי הקטנים עבור בעלי חיים שעברו IRI גדל באופן משמעותי בהשוואה לאלה שעברו לפרוטומיה דמה.
