מודל השתלת כליה אורתוטופית של חולדה לדחיית כליאה

השתלת כליה אורתוטופית של חולדות היא מודל חשוב לחקר המנגנון של דחיית אלוגרפט כלייתי במחקרים פרה-קליניים ועשויה לסייע בפיתוח גישה חדשנית לשיפור ההישרדות ארוכת הטווח של אלוגרפטים כלייתיים. אנסטומוזיס מקצה לקצה של כליות בניתוח זה מונע איסכמיה של פלג הגוף התחתון ואת הפקקת של ורידים נחותים, בעוד שאנסטומוזיס של השופכן בשיטת מנהרה מקצה לקצה מפחיתה את דליפת השתן לאחר הניתוח ואת הפיתול של השופכן. שיטה זו מספקת תובנה לגבי חקירת המנגנונים של דחייה חיסונית ופציעה של אלוגרפטים כלייתיים לאחר השתלת כליה.

התחילו על ידי חתך הבטן באמצעות מספריים כירורגיים לאורך קו האמצע מהסימפיזה פוביס ועד התת-אקסיפואיד. לאחר מכן פתח את החתך באמצעות נסוג. מוציאים את המעיים מהצד הימני של החתך ועוטפים אותם בגאזה לחה כדי למנוע מהם להתייבש.

ואז לחשוף את הכליה השמאלית. נתקו את עורק הכליה השמאלי ואת הווריד באמצעות מיקרו-מלקחיים ומטושים מכותנה בהגדלה של פי 20. Ligate ולעבור את וריד יותרת הכליה ואת וריד איברי המין במידת הצורך.

נתקו את השופכן בעזרת מיקרו-מלקחיים, תוך שמירה על רקמות החיבור ההיקפיות כדי להבטיח אספקת דם לשופכן. דיסוציאציה וקוצץ או ליגייט את אבי העורקים כחמישה מילימטרים מעל עורק הכליה השמאלי עם מהדק כלי דם או תפר מונופילמנט פוליאמיד 4-0. לאחר מכן להעביר את וריד הכליה השמאלי דיסטלי לשילוב של וריד איברי המין השמאלי ווריד יותרת הכליה.

באמצעות מחט אזמל של 24 מדים, שטפו את הכליה מאבי העורקים שמתחת לעורק הכליה השמאלי עם תמיסת UW קרה כקרח בתוספת 100 יחידות למיליליטר הפרין עד שהדם דוהה בצבעו. טרנסקט את עורק הכליה השמאלי ליד אבי העורקים, ואז תעביר את השופכן ליד שלפוחית השתן ונתק את הכליה בעזרת מיקרו-מלקחיים ומספריים. שמור על הכליה השמאלית של התורם בתמיסת UW קרה כקרח.

פחות מהגדלה של פי 20, נתקו את עורק הכליה השמאלי ואת וריד הכליה של החולדה המקבלת באמצעות צמר גפן מטושים ומיקרו-מלקחיים. ליגט את וריד יותרת הכליה ואת וריד איברי המין במידת הצורך. חותכים את עורק הכליה השמאלי ואת וריד הכליה בשורש באמצעות מלחציים מיקרו-וסקולריים, ואז מעבירים את עורק הכליה ואת וריד הכליה במרחק שלושה מילימטרים מהמהדק המיקרו-וסקולרי.

נתקו וליקטו את השופכן השמאלי בערך שניים עד שלושה סנטימטרים מתחת לכליה עם 8-0 תפר מונופילמנט פוליאמיד ומתעלה עליו בקשירת קשר. נתחו את מקבלי הכליה השמאלית המקומית על ידי ניתוק הכליה בעזרת מיקרו-מלקחיים ומספריים. שתלו את הכליה התורמת בפוסה הכליתית השמאלית של החולדה המקבלת והניחו קרח סביב הכליה התורמת המושתלת.

עברו להגדלה של פי 45, ולאחר מכן אנסטומוס העורק הכלייתי והווריד הכלייתי של התורמים לעורק הכליות וווריד הכליות של המקבלים בתבנית מקצה לקצה באמצעות 10-0 תפרים מונופילמנט פוליאמידים. כדי לאנסטומוז את עורק הכליה עם תפרים מופרעים, הניחו את תפרי השהייה בשעה 12 ושש תנוחות של אנסטומוזיס. תפר באופן שווה צד אחד של האנסטומוזיס בין שני תפרים להישאר עם שניים עד שלושה תפרים.

הופכים את תפרי השהייה ובאופן דומה תופרים את הצד השני של האנסטומוזה בין שני תפרי השהייה עם שניים עד שלושה תפרים. כדי לאנסטומיז את וריד הכליה עם תפרים רציפים, הניחו את תפרי השהייה בעמדות השעה שש ו -12 של האנסטומוזה. תפר צד אחד של האנסטומוזיס ממצב השעה 12 עם ארבעה עד חמישה תפרים באמצעות התפרים הפועלים.

הפוך את תפרי השהייה ובאופן דומה, תפר את הצד השני של האנסטומוזה ממצב השעה שש. יש להפיג מחדש את הכליה התורמת על ידי שחרור המהדק המיקרו-וסקולרי הלא פולשני של וריד הכליה, לזהות את אתרי הדימום ולבצע תפרים נוספים במידת הצורך. לאחר מכן, שחררו את המהדק המיקרו-וסקולרי הלא פולשני של עורק הכליות, זיהו את אתרי הדימום ועשו תפרים נוספים במידת הצורך.

פחות מפי 20 הגדלה, ליגטה או תפירה של קצה השופכן התורם עם תפר מונופילמנט פוליאמיד 4-0 כגרירה כדי לגרור את הקצה דרך המנהרה של שלפוחית השתן של המקבלים. לתקן את השופכן התורם עם שלפוחית השתן של המקבלים על ידי תפירת האדוונטיציה של השופכן התורם עם שכבת השרירים של שלפוחית השתן של המושתלים בחוץ בארבע תנוחות שוות ערך באמצעות 8-0 תפר מונופילמנט פוליאמיד. לאחר מכן, העבירו את קצה השופכן התורם עם התפר מחוץ לשלפוחית השתן של המקבלים ואפשרו לשופכן התורם להתכווץ בחזרה לשלפוחית השתן של המקבלים.

מכניסים את המעיים בחזרה לחלל הבטן וסוגרים את החתך הבטני עם תפרים רציפים בשכבת השריר ולאחר מכן בשכבת העור עם תפר מונופילמנט פוליאמיד 4-0. בשעה עשרה שבועות לאחר ההשתלה, צביעת המטוקסילין ואאוזין וצביעת הסטת חומצה תקופתית חשפו טרשת גלומרולרית, פיברוזיס אינטרסטיציאלי, ניוון צינורי וטרשת עורקים אינטרסטיציאלית באלוגרפט הכליות בניגוד לכליית האיזוגרפט. צביעת כסף הראתה את העיבוי של קרום המרתף הגלומרולרי בכליית האלוגרפט בהשוואה לכליית האיזוגרפט, מה שמעיד על הצלחת מודל השתלת הכליה האורתוטופית של החולדה.

מכיוון שהחור הווסקולרי של הכליה הוא דק מאוד, כדי למנוע את התפירה הלא נכונה, זכור לבצע את האנסטומוזיס בשדה ההגדלה הגבוהה.