אינדוקציה והערכה של דיסקינזיות הנגרמות על ידי לבודופה במודל חולדות של מחלת פרקינסון

הפרוטוקול שלנו מספק שיטה מפורטת לאינדוקציה אמינה ודירוג מקיף של דיסקינזיה הנגרמת על ידי לבודופה במודל חולדה של מחלת פרקינסון. היתרון העיקרי של סולם הדירוג של dyskinesia שלנו הוא שהוא מאפשר כימות הן של עוצמת התנועה הלא רצונית החריגה הנתונה והן של כמות הזמן המושקעת בהפגנת התנהגות זו. מודלים מהימנים של בעלי חיים של דיסקינזיה הנגרמת על ידי לבודופה הם קריטיים בהגשמת המטרה הסופית של מציאת טיפולים יעילים כדי להפחית או לחסל את תופעת הלוואי אצל אנשים עם מחלת פרקינסון.

התחילו את ההכנה לניסוי על ידי שקלול חולדות מדי שבוע כדי לחשב את כמות התרופות המתאימה על סמך השינויים במשקל. ספקו לחולדות פינוקים מלאים מבחינה תזונתית וטעימים במיוחד. ביום הראשון של הטיפול ב-L-DOPA, העברת חולדות לדיור יחיד שסופק עם הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים אישרה העשרה.

ולשמור על חולדות לתוך הדיור היחיד לאורך כל המחקר כדי למנוע התערבות עמיתים בהערכות ההתנהגותיות. בימי הדירוג של הדיסקינזיה, הסירו את בקבוקי המים, מתלי המזון וההעשרה בכלוב כדי למנוע הפרעה להערכות ההתנהגותיות, והניחו את הכלובים על מתלה חוטי פלדה בזווית של כ-45 מעלות, ואז הפכו את תגי הזיהוי כלפי מעלה. לפני הזרקת L-DOPA, הוסיפו את הנפח המתאים של מלח סטרילי לתערובת L-DOPA ובנסרזיד במשקל מראש בבקבוקון הענברי וניערו היטב במשך 10 שניות.

מיד לאחר ההכנה, מלאו את הנפח הנדרש של תערובת L-DOPA-Benserazide עבור כל בעל חיים במזרקים בודדים המורכבים במחט של 26 מדים ותייגו כל מזרק בזיהוי בעל חיים בודד. לאחר הבאת הכלוב הראשון לספסל ההזרקה, הסר את החולדה מהכלוב שלה כדי להניח אותה על משטח ההזרקה. השתמשו ביד הלא-דומיננטית כדי לרסן את הראש והכתפיים של החולדה עם כף היד על המשטח ולקשקש את העור על הגב מעל עצם השכמה עם האגודל והאצבע.

השתמש ביד הדומיננטית כדי להזריק נפח L-DOPA לתוך הרווח התת עורי בין האצבעות, תוך שמירה על המחט מקבילה לגוף כדי למנוע הזרקה תוך שרירית. לאחר ההזרקה, הזיזו את החולדה לתוך הכלוב. לאחר מכן, הגדר את הטיימר למשך דקה עד שתיים וחזור על ההליך תוך הזרקת חולדה אחת כל דקה עד שתי דקות עד שכל החולדות מוזרקות.

ביום הדירוג, מקם טיימר ליד הכלוב כדי לצפות בעוצמת ההתנהגות של דיסקינזיה או LID הנגרמת על ידי לבודופה תוך הערכת התדירות של כל התנהגות נתונה במהלך תקופת הדירוג. דרג את העוצמה והתדירות של תנועות הדיסקינזיה הדיסטוניות וההיפרקינטיות, כולל ההתחלה הראשונית של התנהגות LID, התנהגות שיא ושלב הירידה במספר נקודות הזמן הרצוי. אם אתם משתמשים במרווחי דירוג של דקה אחת, הגדירו טיימר לדקה אחת כדי לדרג את החולדה הראשונה והמשיכו את הדירוג דרך כל החולדות במרווחים של דקה אחת.

דירוג ה-LID עבור התנהגויות לא רצוניות חריגות בחולדות הפרקינסון סווג כך שיכלול את העוצמה והתדירות של ההתנהגויות. מגוון של תנועות לא רצוניות חריגות, כולל התנהגויות דיסטוניות, היפרקינטיות וסטריאוטיפיות נצפו בחולדות. הניתוח הייצוגי מספק דוגמה לנתונים המוצגים כמינון שיא של LID לאורך כל ציר הזמן של הניסוי ולוח הזמנים של המינונים.

מינון השיא LID הוגדר כתקופה שבה ציון ה-LID הממוצע הקבוצתי היה הגבוה ביותר. בנוסף, נתוני דירוג LID נבחנו על פני כל קורס זמן דירוג יומי בריכוזי L-DPOA שונים כאשר הקבוצות התאחדו והתווו כבעלי חיים בודדים. ניתן להשתמש ברקמה לאחר המוות מנבדקים שעברו הערכה התנהגותית כדי לחקור מנגנונים מולקולריים הקשורים לדיסקינזיות הנגרמות על ידי לבודופה, ואת ההשפעה של התערבויות טיפוליות על מנגנונים מולקולריים כאלה.

מודלים של בעלי חיים של דיסקינזיה הנגרמת על ידי לבודופה היו שימושיים בהבהרת מספר מנגנונים שנחשבו כבסיס למחלה התנהגותית זו. הבנה זו הובילה להערכה פרה-קלינית וקלינית של מספר מטרות.