משלוח אלקטרופסטי לγ-חומצה עמינח בוטירית (נגבה) לפוקוס אפילפטי מונע התקפים בעכברים

הפרוטוקול שלנו מנצל את הממשל המקומי של נוירוטרנסמיטר מעכבות המתרחשים באופן טבעי גאבא באמצעות מכשיר חדשני מאוד, אשר יכול להציע פתרון חדש בטיפול בהתקפים אפילפטיים. משאבת היונים המיקרו-ארופילית מאפשרת לנו שליטה מדויקת מאוד על מתי בדיוק והיכן אנו מספקים תרופות. ניתן לשנות מסירה אלקטרופורטית מושחלת במדויק כדי למקד מחלות נוירולוגיות אחרות.

יתרון נוסף של טכניקת אספקת התרופות הזו הוא שיש עליית לחץ זניחה מאוד בשקע אספקת התרופות כי אין נוזל שבאמת מועבר. במקום זאת, זה רק מולקולות התרופה עצמם. מאז לוקליזציה קרובה של הבדיקות יהווה את הבעיה הגדולה ביותר, זה מאוד מומלץ לבדוק את זוויות היישור שלהם ומיצוב עם בדיקות דמה במסגרת הסטריאוטוקסית.

התחל על ידי תיקון הראש של עכבר הרדמה במסגרת סטריאוטוקסית ושימוש במחט מד 30 להזריק משכך כאבים מקומי תת עורית באתר החתך המתוכנן. לאחר חמש דקות, השתמש באזמל כדי לבצע חתך קו האמצע בגולגולת. ולהשתמש במדפים עדין כדי לסגת בעדינות את העור.

מהדקים את העור עם מלחציים של בולדוג סרופין. ולנקות את משטח הגולגולת החשוף של fascia. באמצעות מקדחה שיניים עם קצת מקדחה עגולה ועגולה של 0.4 מילימטר, לקדוח חור בגולגולת מעל המוח הקטן עד דורה גלוי.

מניחים את מברג הקרקע לתוך החור ולהשתמש מברג מדויק כדי להפוך את הבורג עד שהוא מגיע לראש המוח הקטן. באמצעות המסגרת הסטריאוטוקסית, למדוד את הקואורדינטות הסטריאוטוקסיות עבור אזור המוח הרצוי ולהשתמש במקדחה שנקבעה במהירות גבוהה כדי לדלל אזור בקוטר של מילימטר עד אחד עד שני מילימטרים של הגולגולת, בערך באזור היעד, עד שנותר קרום עצם דק ומלוטש היטב. לאחר מכן, השתמש מחט מחוברת בהתאמה אישית כדי להסיר את דורה ולהוסיף טיפה של מלוחים לתוך החור וכתוצאה מכך.

להכנסת גשושית סיליקון רב-ערוצית, הנח את החללית על הזרוע הסטריאוטוקסית המחוברת למחזיק מגנטי והצב את הזרוע ליד המסגרת הסטריאוטוקסית. הגדר את הזרועות הסטריאוטאקסיות בזווית קלה של 20 מעלות לפני הירך האחורית כדי להשאיר מקום מספיק למיקום שני השתלים האחרים. ולחבר את הגשוש לשלב הראש ובורג הקרקע.

השתמש בזרוע הסטריאוטקסית המדויקת למיקרון כדי להוריד באיטיות את גשושית הסיליקון לתוך ההיפוקמפוס וליזום את תוכנת ההקלטה כדי להקליט את האותות העצביים החשמליים תוך הזזת גשושית הסיליקון הרב-ערוצית מראש קליפת המוח עד להגשת המיקום הגבי הממוקד. לאחר מכן, תעד בו זמנית את האות הפוטנציאלי של השדה המקומי משכבות קליפת המוח וההיפוקמפוס במהלך החדירה על מסך המחשב ולהשתמש בפעילות האדווה בשכבה הפירמידלית של היווצרות ההיפוקמפוס בפוטנציאל השדה המקומי המתועד כסמן של אזור היעד. למילוי משאבת היונים המיקרופלואידית, חברו את הצינורות לתוך הכניסה של המשאבה ומלאו את הגשוש בתסמת גאבא טוחנת 0.05.

הסר את הצינורות, וסגור את הכניסה עם עטיפת סרט פרפין ולהבטיח כי משאבת היונים microfluidic מחוברת היטב למחזיק. יש לדאוג בעת הרכבה המחזיק לזרוע micromanipulator לפני חיבור מוביל חשמלי ליחידת מדידת המקור. עם הזרוע הסטריאוטוקסית בזווית בינונית-משנית של 20 מעלות, מנמיכים את המשאבה לאט עם תנועות אקסיאליות קרוב ככל האפשר לבדיקה מבלי לתת למשאבה להתכופף, עד שהמשאבה מגיעה לקואורדינטת הגב 1200 מיקרומטר שליליים מפני השטח של קליפת המוח.

כהכנה אינדוקציה התקף, להסיר את רכזת מחט מתכת של מזרק 10 מיקרוליטר ולתקן micropipette borosilicate על קצה המזרק. מקם את הרכזת מעל קצה המיקרופיקט ומקם את המזרק בזווית של 20 מעלות לאורך מדיאלי. השתמש במשאבת microinjection אוטומטית כדי לטעון 500 עד 1000 nanoliters של 50 מילימולרית אמינו-פטרידין מלא בנוזל השדרתי המלאכותי לתוך המזרק ולהוריד את מיקרופיאט הזכוכית למיקום קואורדינטת דורסוונטר.

להזריק 250 nanoliters של הפתרון לתוך המוח וליזום את ההקלטה בתוכנה. לאחר מכן, לצפות במסך ולחכות ספייק interictal הראשון להופיע לפני החלת וולט אחד בין המקור ואת היעד במשך 100 שניות על ושנייה אחת את במשך 30 מחזורים כדי לספק את הפתרון גאבא. לוקליזציה מדויקת של השתלים מסייעת בהקלטת פוטנציאל השדה המקומי ההיפוקמפוס, גרימת התקפי ההיפוקמפוס הקטנים, ואספקת גאבא עם תחילת ההתקפים.

כמו כן, ניתן לאמת את לוקליזציה של השתלים לאחר כל ניסוי על ידי היסטולוגיה פוסט הוק. כאן, דוגמה של כאשר אירועים דמויי התקף ניתן לעצור עם המסירה של גאבא על ידי החללית העצבית הרומן, שילוב החללית microfluidic מוצג. כאשר ארבעה aminopyridine הוזרק לתוך שטח גדול יותר או על החלק העליון של קליפת המוח, התקפים אפילפטיים הפך הכללה, כך גאבא נמסר לא היה מסוגל לשנות את היקף ההתקפים אפילפטיים.

יש לציין כי למסירה של יוני נתרן לא הייתה השפעה משמעותית על ארבע הפעילות הנגרמת על ידי אמינו-פירידין. אז פרוטוקול זה יכול להיות שימושי עבור כל ניתוח סטריאוטוקסי הכולל השתלת בדיקות שבירות מרובות. בעזרת משאבת היונים המיקרופלואידית, ניתן להציג מינים אחרים במולקולות טעונות לטיפול לא רק באפילפסיה, אלא במחלות נוירולוגיות אחרות.

אספקה אלקטרופורטית בהתממשקות רקמות מציגה גישה חדשה באופן כללי של אספקת מינים לכל רקמה רכה. יש לדאוג במיוחד בעת החלת 4AP, שכן הוא רעלן וגרם לאפילפסיה.