המחברים לא תודות לך

פרוטוקול המחקר אושרה על ידי ועדת האתיקה של האקדמיה ראייה נמוכים, בכל המקצועות חתם על הסכמה בכתב על פי הצהרת הלסינקי. זה מחקר קיבלה אישור מוסרי פתח תקווה וגם אוניברסיטאות שפילד.
הערה: הקריטריונים והדרה של חולי ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש לקבל שתל אוטולוגי של suprachoroidal על ידי טכניקת השחזור רשתית Limoli (LRRT) מתוארת בטבלה1.
1. אבחון של חולי ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש
<ol><li>לברר את האבחנה עם קונאפוקלית סריקת לייזר ophthalmoscope, SD-אוקטובר שלי.</li>
	<li>הערך BCVA של כל קבוצה עבור ומרחוק מרחק. מדד VA החזון ליד (תקריב) בנקודות (נק). BCVA בזמן 0 (T0), 90 (T90), וכולן 180 ימים (T180) לעומת לימוד רטינופתיה סוכרתית טיפול מוקדם (EDTRS) תרשימים 4 מטרים logMAR.</li>
	<li>Mesopic scotopic, חשמליות הרשומה, פעילות התאים photopic, או ארג פלאש, על-פי בסטנדרטים שנקבעו בשנת 2009 על ידי האגודה הבינלאומית קליניים אלקטרופיזיולוגיה של חזון (ISCEV)11.</li>
</ol>2. ההרדמה
הערה: תקן הזהב בהרדמה במהלך LRRT היא הרדמה מקומי, מחוזקת על-ידי sub-לגלף קוצים של הסתננות של הרדמה וטשטוש. במקרים מסוימים, הרדמה כללית היא עדיפה.
<ol><li>להשיג את הקרנית, הרדמה conjunctival על-ידי החלת הרדמה מקומית אקטואלי החדירו dropwise 15-20 דקות לפני הניתוח עם לידוקאין ב 4%, ropivacaine-1%.</li>
	<li>להזריק הרדמה על-ידי הסתננות ישירות לתוך sub-conjunctival של subtenon רווחים.</li>
	<li>השתמש חדירה מקומי באזור הבטן, לפני ובינות לרקמה מופק, והן את תת-conjunctival ו- sub-לגלף קוצים של הרווחים, 12 מ מ לימבוס. לאמץ הרדמה מקומית של carbocaine או marcain מעורבב עם 1200 IU אפינפרין.</li>
	<li>לספק הרגעה פוסט ניתוחית דרך ההרדמה, אשר יכול להתבצע כראוי באמצעות פנטניל כמו משכך כאבים נרקוטיים דרך boli קטנות חוזרות ונשנות. המינון הוא בדרך כלל 0.025 mg פנטניל עם 1 מ ג של midazolam לכל בולוס.</li>
</ol>3. Limoli רשתית שיקום טכניקת הכנה
הערה: טכניקה זו מייצגת משתנה של ההתערבות של פלאז שבו השומן autologous מסלולית מושתלים ב subscleral שטח1,6,7,12. תאי המושתל בניתוח יכול לייצר GFs רבים עם neurotrophic ו- angiotrophic הרקמה הסובבת, דמית העין ולאחר רשתית18,19,20,21,22 ,23,24,25. LRRT, המרחק בין תאים עצמיים המושתל דמית העין הוא מופחת על-ידי sclerectomy עמוק, ועל איזור המגע בין גבעול דמית העין היא מורחבת כדי לקדם את הפרשה תא עצמיים paracrine לתוך זרימת חיבור9, 10,14.
<ol><li>ביצוע חיטוי נאות של כל עין לפני הניתוח עם הרכבה הסלולר בין דמית העין ו בסקלרה, הליך שנקרא בטכניקת שיקום רשתית Limoli (LRRT)15,16,17.</li>
	<li>להשתיל את ADSCs, מתקבל על ידי קולמן. et al. , הטכניקה של לורנס (איור 1) של שומן בבטן, ב SVF16,1715,שטח sovrachoroidal.</li>
	<li>Pedicle אדיפוז לחדור עם טסיות נגזר ג'ל PRP מושגת באמצעות השלבים הבאים.</li>
	<li>צנטריפוגה6,דם12 ולאסוף טסיות דם עשיר פלזמה (PRP). הגירוי degranulation טסיות גורמת לשחרור GF pedicle אדיפוז6,12.</li>
</ol>4. פרטים טכניים ואסטרטגיה
הערה: רקמת השומן נאסף, מטוהרים מן השכבה התת עורית בטן של המטופלים, על פי ה לורנס וקולמן טכניקה17(טבלה של חומרים).
<ol><li>באופן ידני קציר 10 מ"ל של רקמות שומן מן השכבה התת עורית הבטן של כל מטופל, השימוש בצינורית בוטה של 3 מ מ מחובר מזרק נעילה, על פי ה לורנס וקולמן טכניקה17 (דמויות 2A/2B).</li>
	<li>הפרד SVF טהור של רקמת שומן בדם, שמן, שמן, נוזל על ידי צנטריפוגה למשך 5 דקות ב g 1,500 x ב- 20 ° C (איור 2C). SVF הוא עשיר מאוד של ADSCs17.</li>
	<li>לאסוף 8 מ"ל של דם היקפיים אנושי עם מחט 22 גר', בשפופרת נפרד להכנה PRP.</li>
	<li>Centrifuge הדם שנאספו במשך 5 דקות ב g x 1,500 ב- 20 ° C (איור 2D). ב- LRRT, התוצאה שינויים שהתפתח יותר ההישרדות של השתל שומן עצמיים, התפשטות ADSC, אשר מעדיף זלוף חיבור מוגברת, ו של אפנון מקיף יותר של הפעולה של גורמים אלו המופרשים רק שומן7, 11,17.</li>
	<li>לבנות את הכיס suprachoroidal (פרטים נוספים בשלב 4, 4.4 מסוים ואת 4.5) כדי להכיל את השתל המתקבל שומן מסלולית וירווה נפח שיורית זו כיס בתערובת של ADSCs לבין SVF PRP, שהושג על-פי לורנס ו קולמן טכניקה17.</li>
</ol>5. Suprachoroidal בשתל מאת LRRT (טכניקת השחזור Limoli רשתית): הליך כירורגי, פרטים טכניים
<ol><li>לעגן את sclera 6-0 בתפר משי, ליד לימבוס נחות-טמפורלית.</li>
	<li>תפתח את החלל מתחת ללחמית ו- subtenonian ב- 11 מ מ לימבוס נחות-זמנית, באמצעות 5.5" מספריים מעוגלים ווסטקוט Tenetomy.</li>
	<li>הכנס את המדחק conjunctival Limoli-באזיל במרחב הזה כדי להפוך לשדה כירורגי scleral.</li>
	<li>מראש באמצעות סכין סהרון 5 מ מ זווית שיקוע, לחתוך דש בצד בסקלרה-8 מ מ, מ לימבוס. הציר דש היא תמיד רדיאלי, בצד שמאל של המנתח.</li>
	<li>ברביע נחות-טמפורלית, ב- 8 מ מ לימבוס, לפתוח דלת scleral עמוק של-5 מ"מ בצד על ידי ציר רדיאלי באמצעות עם הסכין חרמש, המשופעת בזווית למעלה. לבצע את sclerectomy בעומק נאותה כדי להציג את צבע צפחה דמית.</li>
	<li>ליצור פער על-ידי הסרת operculum קטן בחלקו האחורי של הכנף, על מנת להקל על זרימת הדם בשתל suprachoroidal הבאים.</li>
	<li>לחלץ עם מלקחיים ophthalmological השומן מסלולית מפרצה מעל השריר המלוכסן נחות. ודא שהשומן שחולצו vascularized הוא מספיק כדי לאפשר לו לשרוד לאחר ההשתלה שלו.</li>
	<li>הנח בעדינות הכנף שומן עצמיים על המיטה חיבור ו התפר עם חיבור סיבי polyglactin 6/0 בקצה הפרוקסימלית של הדלת.</li>
	<li>תפר הכנף scleral כדי להימנע דחיסה pedicle השמן או על הקערות התזונתי.</li>
	<li>לחדור stroma של pedicle שמן עם 1 מ ל ג'ל PRP (מתקבל על ידי צנטריפוגה של החומר בדם, ההפרדה של רכיב, ושל טסיות degranulation26) באמצעות בצינורית זוויתי (30 מעלות) של 30 גרם.</li>
	<li>להכין את הצדדים של הלחמית התפר. לאחר מכן, הסר את המדחק conjunctival.</li>
	<li>תפר הלחמית, באמצעות סיבים polyglactin 6/0.</li>
	<li>לפני הסגירה, השאר רווח כדי להוסיף לתוך המרחב subscleral, בין הכנף, דמית בשתל חיבור, צינורית קטנה פלסטיק גמיש עם השתל שומן עצמיים.</li>
	<li>להרוות את החלל שיורית בין השתלת שומן עצמיים, דמית העין, scleral מדפים עם 0.5 cc SVF (עשיר של ADSCs), שהוכנו בעבר שלב 3.2, על ידי צינורית פלסטיק גמיש קטנה, מוכנס לתוך הכיס scleral.</li>
	<li>לאחר קולח המרחב שיורית, סגור את התפר.</li>
	<li>לאחר הניתוח, לנהל שלושה ימים של טיפול אנטיביוטי עם 500 מ ג azithromycin. בנוסף, מספקים העין ושחרור טיפול בשילוב אנטיביוטיקה, סטרואידים, כגון כלורמפניקול ו- Betamethasone, בערך 15-20 ימים. הערה: בשתל מורכב של תאי שומן, ADSCs מתוך SVF ולאחר PRP עכשיו התקבל26. לצמצם את המרחק בין תאים עצמיים המושתל דמית העין מאת sclerectomy עמוק כדי לעורר הפרשת paracrine תאים עצמיים לזרם חיבור. לאותה מטרה, הרחב את שטח המגע בין גבעול דמית העין.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Daftarian, N., Kiani, S., Zahabi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+therapy+for+retinal+disorders.">Regenerative therapy for retinal disorders.</a> J. Ophthalmic Vis. Res. 5, 250-264 (2010).</li><li>Thanos, C., Emerich, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+of+neurotrophic+factors+and+therapeutic+proteins+for+retinal+diseases.">Delivery of neurotrophic factors and therapeutic proteins for retinal diseases.</a> Expert. Opin. Biol. Ther. 5, 1443-1452 (2005).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+protection+of+photoreceptors+from+light+damage+by+pigment+epithelium-derived+factor.">In vivo protection of photoreceptors from light damage by pigment epithelium-derived factor.</a> Inv. Ophthalmol. Vis. Sci. 42, 1646-1652 (2001).</li><li>Bhutto, I., Lutty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+age-related+macular+degeneration+(AMD):+Relationships+between+the+photoreceptor/retinal+pigment+epithelium/Bruch's+membrane/choriocapillaris+complex.">Understanding age-related macular degeneration (AMD): Relationships between the photoreceptor/retinal pigment epithelium/Bruch's membrane/choriocapillaris complex.</a> Mol. Aspects Med. 33 (4), 295-317 (2012).</li><li>McHarg, S., Brace, N., Bishop, P. N., Clark, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enrichment+of+Bruch's+membrane+from+human+donor+eyes.">Enrichment of Bruch's membrane from human donor eyes.</a> J. Vis. Exp. (105), (2015).</li><li>Kevy, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+growth+factor+enriched+autologous+platelet+gel.">Preparation of growth factor enriched autologous platelet gel.</a> Transactions of the Society for Biomaterials 27th Annual Meeting. , (2001).</li><li>Schaffler, A., Buchler, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+review:+adipose+tissue-derived+stromal+cells-basic+and+clinical+implications+for+novel+cell-based+therapies.">Concise review: adipose tissue-derived stromal cells-basic and clinical implications for novel cell-based therapies.</a> Stem Cells. 25, 818-882 (2007).</li><li>Filatov, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+therapy.">Tissue therapy.</a> Med. Gen. Fr. 11, 3-5 (1951).</li><li>Pelaez, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinitis+pigmentosa.">Retinitis pigmentosa.</a> Cuban experience. , (1997).</li><li>Meduri, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+basic+fibroblast+growth+factor+on+the+retinal+degeneration+of+B6(A)-+Rperd12/J+(retinitis+pigmentosa)+mouse:+a+morphologic+and+ultrastructure+study.">Effect of basic fibroblast growth factor on the retinal degeneration of B6(A)- Rperd12/J (retinitis pigmentosa) mouse: a morphologic and ultrastructure study.</a> ARVO 2007 Annual Meeting. , (2007).</li><li>Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Morales, M. U., Nebbioso, M., Limoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+Study+on+Electrophysiological+Changes+After+Cellular+Autograft+in+Age-Related+Macular+Degeneration.">Preliminary Study on Electrophysiological Changes After Cellular Autograft in Age-Related Macular Degeneration.</a> Medicine. 93 (29), 355 (2014).</li><li>Tischler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+rich+plasma:+The+use+of+autologous+growth+factors+to+enhance+bone+and+soft+tissue+grafts.">Platelet rich plasma: The use of autologous growth factors to enhance bone and soft tissue grafts.</a> N. Y. State Dent. J. 68, 22 (2002).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells.">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Mol. Biol. Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li><li>Lin, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+administration+of+orbital+fat-derived+stem+cells+promotes+corneal+tissue+regeneration.">Topical administration of orbital fat-derived stem cells promotes corneal tissue regeneration.</a> Stem Cell Res. Ther. 4 (3), 72 (2013).</li><li>Limoli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+retinal+cell-neurorigeneration.+Principles,+applications+and+perspectives.">The retinal cell-neurorigeneration. Principles, applications and perspectives.</a> The growth factors. , 159-206 (2014).</li><li>Coleman, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+of+care+for+liposuction.">Guidelines of care for liposuction.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 45, 438-447 (2001).</li><li>Lawrence, N., Coleman, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposuction.">Liposuction.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 47, 105-108 (2002).</li><li>Kamao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+retinal+pigment+epithelium+cell+sheets+aiming+for+clinical+application.">Characterization of human induced pluripotent stem cell-derived retinal pigment epithelium cell sheets aiming for clinical application.</a> Stem Cell Reports. 23 (2), 205-218 (2014).</li><li>Dang, Y., Zhang, C., Zhu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+therapies+for+age-related+macular+degeneration:+the+past,+present,+and+future.">Stem cell therapies for age-related macular degeneration: the past, present, and future.</a> Clin. Interv. Aging. 10, 255-264 (2015).</li><li>Nebbioso, M., Livani, M. L., Steigerwalt, R. D., Panetta, V., Rispoli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retina+in+rheumatic+diseases:+Standard+full+field+and+multifocal+electroretinography+in+hydroxychloroquine.">Retina in rheumatic diseases: Standard full field and multifocal electroretinography in hydroxychloroquine.</a> Clin. Exp. Optom. 94 (3), 276-283 (2011).</li><li>Wang, P., Mariman, E., Renes, J., Keijer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+secretory+function+of+adipocytes+in+the+physiology+of+white+adipose+tissue.">The secretory function of adipocytes in the physiology of white adipose tissue.</a> J. Cell. Physiol. 216, 3-13 (2008).</li><li>Chen, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF-Mediated+Proliferation+of+Human+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells.">VEGF-Mediated Proliferation of Human Adipose Tissue-Derived Stem Cells.</a> PloS One. 8, 73673 (2013).</li><li>Bagchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+is+important+for+brown+adipose+tissue+development+and+maintenance.">Vascular endothelial growth factor is important for brown adipose tissue development and maintenance.</a> FASEB J. 27, 3257-3271 (2013).</li><li>Carron, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultured+human+retinal+pigment+epithelial+cells+differentially+express+thrombospondin-1,+-2,+-3,and+-4.">Cultured human retinal pigment epithelial cells differentially express thrombospondin-1, -2, -3,and -4.</a> Int. J. Biochem. Cell. Biol. 32, 1137-1142 (2000).</li><li>Kim, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+pigment+epithelium-derived+factor+(PEDF)+and+vascular+endothelial+growth+factor+(VEGF)+in+sickle+cell+retina+and+choroid.">Expression of pigment epithelium-derived factor (PEDF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in sickle cell retina and choroid.</a> Exp. Eye Res. 77, 433-445 (2003).</li><li>Limoli, P. G., Limoli, C., Vingolo, E. M., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+surgery+and+growth+factors+in+dry+age-related+macular+degeneration:+visual+prognosis+and+morphological+study.">Cell surgery and growth factors in dry age-related macular degeneration: visual prognosis and morphological study.</a> Oncotarget. 7 (30), 46913-46923 (2016).</li><li>Ueki, Y., Reh, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EGF+stimulates+M&#252;ller+glial+proliferation+via+a+BMP-dependent+mechanism.">EGF stimulates M&#252;ller glial proliferation via a BMP-dependent mechanism.</a> Glia. 61, 778-789 (2013).</li><li>Kozlowski, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RPE+cell+senescence:+A+key+contributor+to+age-related+macular+degeneration.">RPE cell senescence: A key contributor to age-related macular degeneration.</a> Med. Hypotheses. 78, 505-510 (2012).</li><li>Schneider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hematopoietic+factor+G-CSF+is+a+neuronal+ligand+that+counteracts+programmed+cell+death+and+drives+neurogenesis.">The hematopoietic factor G-CSF is a neuronal ligand that counteracts programmed cell death and drives neurogenesis.</a> J. Clin. Invest. 115, 2083-2098 (2015).</li><li>Yin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oncomodulin+is+a+macrophage-derived+signal+for+axon+regeneration+in+retinal+ganglion+cells.">Oncomodulin is a macrophage-derived signal for axon regeneration in retinal ganglion cells.</a> Nat. Neurosci. 9, 843-852 (2006).</li></ol>

הציג-2015 ארוו, מאי 3-7-דנוור - ארה ב.

המטרה העיקרית של מחקר זה היה להעריך השתל suprachoroidal של adipocytes, ADSCs SVF ולאחר PRP יכול לשפר VA ורגישות הרשתית בעיניים מושפעות AMD יבש לאורך זמן. המטרה העיקרית נוספת הייתה להפגין תופעות טיפוליות אפשריות של תאים אלה, בהתבסס על הספרות האחרונות, מאז פרה מספר מחקרים הראו כי טיפול מבוסס-GF יכול להיות שימושי עבור הטיפול הרפואי במחלות מספר.
למעשה, מחקרים הראו עצמיים האנושי המושרה גזע pluripotent (iPSC) יכול לייצג מקור הסלולר עבור השתל, מכוון הפיגמנט ברשתית אפיתל (RPE) התחדשות רקמות טיפול החלפת AMD18, 19. גליונות תאים אלה נוצרים כמו טפט אשר יכול לבטא סמני RPE טיפוסי ולהציג מקוטב GF הפרשת, מראה יכולת phagocytotic, כמו גם גנים דפוסים דומים לאלה של יליד RPE18,19 . לאחר ההשתלה, פרימטים אנושיות עצמיים iPSC-RPE תא גליונות הראה גם המערכת החיסונית דחייה או גידול היווצרות18,19.
המחקר הנוכחי מציג כמה מאפיינים שונים. ניתחנו ישירות העיניים האנושיות מושפעות AMD יבשה אם התא בשתל suprachoroidal יכול לשפר ביצועים ויזואליים.
חוץ מזה, sovrachoroidal שתל של תאים עצמיים על פי LRRT הוכיחה תמיד כדי להיות בטוחים. אנחנו אף פעם לא רשומים כורוידאלית תת רשתית, בצקת מקולרית, הרשתיות, או בעיות אחרות ברשתית במהלך השנה הראשונה לפרסם התערבות. מצד שני, ניתוחים לא הולם יכול תיאורטית להוביל לחירור של דמית עם דימום שלאחר מכן, אך במחקר שלנו עין לא נגרם נזק. עם זאת, ניתן לקבל דימום תת-conjunctival הוא נספג מחדש בדרך כלל תוך מספר ימים, אינו מציג שוב כמו סיבוך.
המחקרים האחרונים סיפקו ראיות המלמדות על עלייה משמעותית בערכים ארג scotopic, BCVA, שלי, 90, 180 ימים פוסט שתל אוטולוגי. עם זאת, העלייה היה גדול אם הממוצע עובי הרשתית (RTA) שהוקלט על ידי SD-אוקטובר11,גבוה26. הוא האמין כי תאי המושתל בניתוח יכול לייצר GFs שמסביב רקמות, דמית העין ולאחר רשתית, ויש להם מאפיינים neurotrophic, angiotrophic, כגון בסיסי פיברובלסט גורם גידול (bFGF), כלי הדם צמיחה אנדותל (VEGF) , פיגמנט-אפיתל-derived factor (PEDF), אינטרלויקין (IL), פקטור המושבה-מגרה מקרופאג (M-CSF), פקטור המושבה-מגרה גרנולוציט-מקרופאג (GM-CSF) ו פקטורי גדילה היפרדות (PlGF), בעוד טסיות לייצר נגזר טסית לגדול פקטור דם (PDGF), נגזר טסית אנגיוגנזה פקטור (PDAF), ועוד6,7,12,13,21
מיקום השתל ליד דמית העין הוא האמין כדי לאפשר את GFs המיוצר להזין את זרימת חיבור, כדי להגיע תא אנדותל רצפטורים, RPEs, מולר תאים, photoreceptors, ולבסוף לתקשר איתם. ב- LRRT, האלמנטים המושתל אוטולוגי שימושיים, כל אחד בדרכו, ההתחדשות. תאי השומן לייצר bFGF, גורם הגדילה באפידרמיס (EGF), פקטורי גדילה דמויי אינסולין 1 (IGF-1), איל, גורם הצמיחה הפיכת β (TGF-β), PEDF, אדיפונקטין21. ADSCs לייצר bFGF, VEGF, M-CSF, GM-CSF, PlGF, TGF-β, גורם הגדילה hepatocyte (דבורה שחר), IGF-1, IL, ו6,angiogenin7. טסיות הדם לייצר PDGF, IGF-1, TGF-β, VEGF, bFGF, EGF, PDAF ו6,thrombospondin (כפית)12.
כמה גורמים לקדם התחדשות אנדותל, ולעורר כמה התפשטות ADSC, וכך העדפה השומן autologous והן adipocyte הישרדות, בעוד אחרים לעכב neovascular תהליכים22,23,24. PEDF ו- bFGF טובה הישרדות קולט אור, ואילו EGF מפעילה פעולתה על תאים מולר על ידי מפעילה שעתוק bFGF אנדוגני ועירור ADSCs להגדיל פעילות הפרשה שלהם,25,27. למרות GFs המופרשים בדרך כלל RPEs, זה אינו מתרחש ב maculopathy מנוונת כתוצאה RPE/choriocapillaris מורכבים. הפרשת Paracrine GF על ידי השתלת תאים תורמת העדפה הישרדות קולט אור, choriocapillaris28. יתר על כן, M-CSF, GM-CSF, ו IL יש השפעות אנטי דלקתיות, chemotactic על מקרופאגים, אשר מעורבים חיסול של שאריות תאים intraretinal, פונקציה פיזיולוגית מתבצעת על ידי RPEs29,30.
סוגי תאים הושתל מאחורי דמית העין יכול להבטיח קבוע הפרשת GF בזרם חיבור. GFs יכול מגיעים אל תאי הרשתית דמית אינטראקציה עם קולטני ממברנה שלהם, ולבסוף להפעיל על מסלול תאיים. הנתונים שהוצגו מראים כי LRRT יכול להגביר זלוף חיבור ו- trophism קולט אור לא רק דרך אינטראקציות קולטן bFGF, אלא גם באמצעות גירוי על ידי תאים מולר, RPEs ו photoreceptors ברשתית. כתוצאה מכך, שינויים בביטוי הגנים ועל ההשפעה antiapoptotic הסופי יכול להסביר את neuroenhancement. מנגנון הסלולר זה ביסוד את היכולת לשפר את הביצועים חזותי, כפי שמודגש על הממצאים הקליניים בקבוצה המושתל. לסיכום, LRRT יכול להיות שימושי לשמר את הפונקציה חזותי של חולים מושפעות AMD יבש בטווח הארוך.
אולם, כפי הראו במחקרים קודמים, ארג קונוס-רוד רוד ארג מראים מתאם משמעותי ביותר עם RTA, בזמן זה לא המקרה של חרוט ארג. זו יכולה להיות מוסברת על ידי העובדה כי הפונקציה fovea מופיע לסיכון, למרות אמצעי האחסון מקולרי ב- AMD יבש ממשיך להיות קבוע, לפחות בשלבים הראשונים26. בפתולוגיה זו, trophism ברשתית שיורית נמדדת RTA יכול להיות קריטריון prognostic לטיפול LRRT, מאז תוצאות טובות יותר שכיחים יותר אצל חולים עם RTA שווה או גדול מ מיקרומטר 25026. ערכת GF זמין יכול לגרום neuroenhancement, היקף אשר הוא יחסי לנוכחות של אזורים עם יותר cellularity, כפי שנרשם על ידי פעילות חשמלית26. בשלב מאוחר יותר, cellularity רקמות המסכן לא תוותר השפעה טיפולית במקרה זה הוא ביקש לאחר ההליך, עקב הגומלין נדיר של קולטן GF-הממברנה.
השלבים הבאים של מחקר זה יחייב הגיוס של מספר גדול יותר של נושאים עם וי אי גדול, קיבוע המרכזית על-ידי הערכת סטטיסטית כל הבדיקות חיוני הדרוש כדי לוודא הטכניקה חוקית לחקור את ההשפעות הביוכימי. אפשר לטעון כי הגדלת תא trophism באה לידי ביטוי לפעילות תא חזותי, נמדדת באופן אובייקטיבי ארג, BCVA ושלי11. GF מבוסס טיפול יכול לספק טיפול עדכניים, סלקטיבי, בטוח, סביר במחלות ophthalmologic.

טיפול בתאי, המורכב הזרקה מקומית או מערכתית של גזע/ובתאים באזור הפגוע לטיפול בהפרעות כרוניות מרובות, מה משך תשומת לב בעשור האחרון1. מאז שנות ה-90, גורמי גדילה (GFs) נחקרו על תפקידו טיפולית פוטנציאל ניוון רשתית2. למעשה, תאים אנושיים רבים יכול לייצר GFs, שהינם חלבונים ספציפיים מסוגלים לחסום או להאט אפופטוזיס, כלומר, מוות מתוכנת של תאים3.
זה ידוע כי יבש הקשורות לגיל ניוון מקולרי (AMD) הוא מחלה ברשתית מנוונת איפה מוות תאי הדרגתית ובלתי הפיכה כרוכה פגיעה בשכבת קולט אור, וכתוצאה מכך איבוד תפקיד הראייה המרכזית4. AMD היא הגורם המוביל לעיוורון בקרב אנשים מעל גיל 55 המדינות המפותחות, חשבונות עבור 80% של כל degenerations מקולרי, שחסרה טיפול יעיל עד כה.
מספר מחקרים הראו כי ישנם מקורות שונים שמהם ניתן להשיג GFs עצמיים. אלה מהווים לסוגי תאים שונים, לרבות אדיפוז סטרומה תאים שמקורם שומן מסלולית טסיות נגזר טסית דם עשיר פלזמה (PRP), נגזר שומן בתאי גזע (ADSCs) כלול השבר בכלי הדם סטרומה (SVF) של רקמת שומן5 6, ,7. בערכה GF הנוכחית מבטיחה neuroenhancement ברשתית, מחקר שנערך על ידי Filatov, Meduri, פלאז ולאחר Limoli הוכיחה כי השתלת שומן עצמיים (AFT) הוא יעיל8,9,10.
יתר על כן, מחקר קודם הראה שיפור משמעותי בנתונים electroretinogram (ארג), הקליט שתל אוטולוגי של suprachoroidal פוסט, יובש בעיניים מושפעות AMD11. הרקמה בניתוח המושתל בחלל suprachoroidal מאופנן הפרשה paracrine של תאים ברשתית, עיכוב שלהם אפופטוזיס6,7,12. בהתחשב עובי השכבה החיצונית גרעינית, בחינה היסטולוגית של הרשתית של שרקנים הראו כי GFs יכולת השפעה עם מחלות על הרשתית. לכן, השימוש ישיר או עקיף של GFs יכול להביא פוטנציאל היתרונות הטיפוליים באמצעות יחס מאוזן בין מולקולרי inducers מעכבי6,7,12.
המטרה של שיטה זו היא להעריך השתל suprachoroidal של adipocytes, ADSCs SVF ו PRP יכול לשפר את הטוב מתוקן חדות ראייה (BCVA) ותגובות microperimetry (שלי) בעיניים מושפעות AMD יבש. מחקר זה נועד להפגין את האפקט הטיפולי של בשתל על בסיס הייצור GF שלה, על פי הספרות מצוטט6,7,12,13.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:680px;" width="681">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Blunt cannula, 3 mm.&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Mentor, Santa Barbara, CA.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Luer-LokTM syringe.&#160;</td>
			<td style="width:179px;">BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Regen-BCT tube.&#160;</td>
			<td style="width:179px;">RegenKit; RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:179px;">&#160;RegenPRP Centri. RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">BD Venflon Pro Safety 22G x 1.00 inch (0.9 mm x 25 mm).&#160;</td>
			<td style="width:179px;">BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">SPSS Statistics Version 19.0</td>
			<td style="width:179px;">IBM Corp., Armonk, NY, USA.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Confocal scanning laser ophthalmoscope&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Nidek Inc, Fremont, CA</td>
			<td style="width:119px;">Nidek F10&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Cirrus 5000 Spectral Domain-Optical Coherence Tomography</td>
			<td style="width:179px;">Carl Zeiss Meditec AG, Jena, Germany</td>
			<td style="width:119px;">&#160;SD-OCT&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Maia 100809 Microperimetry&#160;</td>
			<td style="width:179px;">CenterVue S.p.A., Padua, Italy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ocular electrophysiology electromedical system,</td>
			<td style="width:179px;">C.S.O., S.r.l., Scandicci, Italy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>&#160;Retimax for ERG&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

regenerative therapy by suprachoroidal cell autograft in dry age-related macular degeneration: preliminary in vivo report

מחקר זה נועד לבחון אם שתל suprachoroidal של תאים עצמיים יכול לשפר בצורה הטובה ביותר המתוקן חדות ראייה (BCVA) ואת התגובות microperimetry (שלי) בעיניים מושפע יבש הקשורות לגיל ניוון מקולרי (AMD) לאורך זמן באמצעות ייצור והפרשת גורמי גדילה (GFs) על הרקמה שמסביב. המטופלים חולקו באופן אקראי לקבוצת הלימוד כל אחד. כל החולים אובחנו עם AMD יבש ועם BCVA שווה או גדול מ- 1 לוגריתם של הזווית המינימלית של רזולוציה (logMAR). שתל אוטולוגי suprachoroidal על ידי טכניקת השחזור רשתית Limoli (LRRT) בוצע על קבוצה א' שכלל 11 עיניים מ- 11 מטופלים. הטכניקה בוצעה על ידי השתלת adipocytes, נגזר שומן בתאי גזע המתקבל על סטרומה השבר בכלי הדם, וכן טסיות של טסיות דם עשיר פלזמה במרחב suprachoroidal. לעומת זאת, קבוצה B, כולל העיניים 14 מתוך 14 חולים, שימש כקבוצת בקרה. עבור כל מטופל, האבחנה אומתה על ידי קונאפוקלית ophthalmoscope לייזר סריקה ו טומוגרפיה ספקטרלי תחום-אופטית קוהרנטית (SD-אוקטובר). קבוצה a, BCVA משופרת על ידי 0.581 כדי 0.504-90 יום, 0.376 logMAR-180 ימים (+32.20%) במשככי. יתר על כן, המבחן שלי עלה ב- dB 11.44 ל 12.59 dB ב 180 ימים. סוגי תאים שונים הושתל מאחורי דמית הצליחו להבטיח קבוע הפרשת GF בזרם חיבור. כתוצאה מכך, התוצאות מצביעות על כי חדות חזותית (וי אי) בקבוצה המושתל יכול להגביר יותר מאשר בקבוצת הביקורת לאחר שישה חודשים.

באמצעות ההליך המובאת כאן, שתי קבוצות המטופלים יבש מושפעות AMD, עם BCVA השווה או גדול מ- 1 לוגריתם של הזווית המינימלית של רזולוציה (logMAR), נרשמו המחקר. קבוצה A, כולל העיניים 11 מתוך 11 חולים, שתל אוטולוגי suprachoroidal שהתקבלו על-ידי Limoli רשתית שיקום טכניקה (LRRT), ואילו קבוצה ב', כולל 14 עיני 14 חולים, שימש כקבוצת בקרה.
מבחן t של סטודנט במבחן מרובע צ'י שימשו כדי להשוות, בהתאמה, הגיל הממוצע והמין בין קבוצות המחקר שני (טבלה 2). ניתוחים סטטיסטיים, ויזואליזציה של נתונים בוצעו לפני ואחרי ניתוח LRRT.
מבחן דרגה חתום Wilcoxon-מאן-ויטני בוצע כדי לקבוע אם ההבדלים מראש, שלאחר הטיפול היו משמעותיים. זו מבחן השערות ללא פרמטרי הוחל כדי להשוות בין שני מדגמים תלויים כאשר האוכלוסייה אי אפשר להניח יחולקו בדרך כלל, כמו במקרה זה. ערכים VA נמדדו בכל שלב של הניתוח. מובהקות סטטיסטית נקבע על ערך p <</c1>0.05.
11 עיני (6 צודק, 5 שמאל עיניים) לחולים 11 (7 זכר ו 4 נשים) לקביעת אבחנה קלינית של AMD יבש נבדק במחקר זה. גיל החולה נע בין 62 אל 84 שנים, עם עידן מתכוון 71.5 שנים (± 3.8 SD).
בטבלה 2 מספק מבט אחד מהפרופילים קליני של חולים שטופלו LRRT, ואת ערכי ממוצע שנרשם ב 0 (T0), 90 (T90) ו- 180 (T180) ימים לאחר הניתוח. תופעות לוואי דווחו תמיד כדי להבטיח בטיחות מרבית. ערכי הממוצע של לחץ תוך-עיני להקליט 0 (T0), 90 (T90) ו- 180 יום (T180) לאחר ניתוח איננה מתעדת כל שינוי משמעותי.
תוצאות לאחר הניתוח LRRT היו כדלקמן: קבוצה a, BCVA משתנה מ- 0.581 (T0) preoperatively 0.504-90 יום (T90), logMAR 0.376-180 ימים (T180) עם עלייה משמעותית של 35.20% (p < 0.01). בשליטה קבוצה ב', כולל 14 עיני 14 חולים, 7 זכרים ונקבות 7, עם והגיל הממוצע של שנים 80.4, SD ± 2.3, BCVA משתנה מ- 0.573 (T0) כדי 0.587 (T90), ולהקטין את 0.601 logMAR (T180) עם ממוצע שאינו משמעותי 4.72% (טבלה 2) (איור 3 ). קבוצה a, המבחן שלי גדלה באופן משמעותי מ dB 11.44 (T0) אל 12.59 dB (T180) (+9.58%) (איור 4), ואילו היה שיפור משמעותי בערכים לאחר הניתוח בקבוצה B.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56469/56469fig1.jpg"> איור 1 : ייצוג שתל אוטולוגי suprachoroidal. גורמי גדילה (GFs) המיוצר על ידי תאי אדיפוז, טסיות דם עשיר פלזמה (PRP), ולהגיע נגזר שומן בתאי גזע (ADSCs) ברקמות חיבור של הרשתית דרך אפיתל הפיגמנט ברשתית (RPE). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56469/56469fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56469/56469fig2.jpg"> איור 2 : הליך טכני. בצינורית ומשיכה עוקבות של רקמת שומן מאזור הבטן (לוח א'). הצינורית עוברת השומן התת עורית עם שאיפה קלה על ידי כ רפה בעברית תאי שומן לתוך לומן משלו (לוח ב'). לאחר צנטריפוגה, ישנן שלוש-שכבות של רקמת שומן: שמן (שכבה גבוהה), שומן הומוגנית (שכבת ביניים), נוזל הדם (שכבה נמוכה יותר) (לוח C). לבחון את הצינור עם דם מיד לאחר צנטריפוגה. שלוש שכבות: פלזמה המסכן טסיות (PPP), טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) ואריתרוציטים (לוח D). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56469/56469fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56469/56469fig3.jpg"> איור 3 : מחירי תוקנה חדות ראייה (BCVA) ביבש הקשורות לגיל ניוון מקולרי (AMD). שינוי קבוצה A לאחר שתל אוטולוגי של suprachoroidal על ידי טכניקת השחזור רשתית Limoli (LRRT), וכן קבוצת הביקורת (בדוק), נמדד הזמן 0 (T0), 90 (T90) ו- 180 (T180) ימים. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56469/56469fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56469/56469fig4.jpg"> איור 4 : Microperimetry (שלי) לחולה בקבוצת א יבש הקשורות לגיל ניוון מקולרי (AMD) שישה חודשים לאחר בטכניקת שיקום רשתית Limoli (LRRT). שלי גדל מ 11.44 dB (T0) כדי 12.59 dB (T180) (+9.58%). צבע סולם שבין 0 ל- 36 ב- dB. קיבוע יציבות: יציב, יציב יחסית, לא יציב. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56469/56469fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>קריטריוני ההכללה</td>
			<td>ההשתלה?</td>
		</tr>
<tr>
<td>נושאים קווקזי</td>
			<td>שגיאות השבירה עם המקבילה כדורית > ד 6</td>
		</tr>
<tr>
<td>המשתתפים ניזונים היטב</td>
			<td>סימנים של AMD exudative על ידי SD-אוקטובר ו פא</td>
		</tr>
<tr>
<td>אבחון על ידי SD-אוקטובר, אפי, פא</td>
			<td>הפרעות עינית: CT, GL, על, MP, VM, CRD, וכו '.</td>
		</tr>
<tr>
<td>מדיד VA</td>
			<td>טראומה עינית</td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA ≥1 logMAR</td>
			<td>מחלות מערכתיות: MS; המשטרה; DM; רואד; HD; דלקת כלי דם</td>
		</tr>
<tr>
<td>IOP נורמלי</td>
			<td>יתר לחץ דם, סרטן ומחלות מערכתיות אחרות</td>
		</tr>
<tr>
<td>אזורי אחסון extrafoveal</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">LogMAR: לוגריתם של הזווית המינימלית של רזולוציה; SD-אוקטובר: טומוגרפיה ספקטרלי תחום-אופטית קוהרנטית; אפי: autofluorescence הדמיה; פא: מסתמים fluorescein; VA: חדות ראייה; IOP: לחץ תוך-עיני; D: diopters; CT: קטרקט; GL: גלאוקומה; על: לדלקת בעצה הראייה; MP: כיווץ מקולרי; VM: קרום neovascular; CRD: מחלת chorioretinal; MS: טרשת נפוצה; המשטרה: מחלת פרקינסון; מיט: סוכרת; RD: מחלות כליות; HD: מחלות הכבד.</td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1: קריטריונים והדרה לחולים יבש הקשורות לגיל ניוון מקולרי (AMD).
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>פרמטרים</td>
			<td>LRRT (n = 11)</td>
			<td>שליטה (n = 14)</td>
		</tr>
<tr>
<td>גיל (ממוצע)</td>
			<td>71.5 ±3.8SD</td>
			<td>80.4 ±2.3SD</td>
		</tr>
<tr>
<td>גיל (טווח)</td>
			<td>62 - 84</td>
			<td>73 - 79</td>
		</tr>
<tr>
<td>סקס</td>
			<td>F:4 M:7</td>
			<td>F:7 M:7</td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA T0</td>
			<td>0.581 logMAR</td>
			<td>0.573 logMAR</td>
		</tr>
<tr>
<td>(ממוצע)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA T0 (טווח)</td>
			<td>0.301 - 1.0</td>
			<td>0.0 - 1.0</td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA T90 (ממוצע)</td>
			<td>0.504 logMAR</td>
			<td>0.587 logMAR</td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA T90 (טווח)</td>
			<td>0.222 - 1</td>
			<td>0.0 - 1</td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA T180 (ממוצע)</td>
			<td>0.376 logMAR</td>
			<td>0.601 logMAR</td>
		</tr>
<tr>
<td>BCVA T180 (טווח)</td>
			<td>0.046 - 0.699</td>
			<td>0.0 - 1.0</td>
		</tr>
<tr>
<td>אחוז</td>
			<td>35.19</td>
			<td>4.72</td>
		</tr>
<tr>
<td>שינוי</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>ערך p</td>
			<td>< 0.01</td>
			<td>> 0.5</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="3">גיל ב שנים; n = החולים בקרות; SD = סטיית תקן; F = נקבה; M = זכר; BCVA = הטוב המתוקן חדות הראייה ב logMAR; T0 = בסיסית לפני הניתוח בשתל; T90 = 90 יום כירורגי פוסט בשתל; T180 = בשתל פוסט ניתוחי 180 ימים.</td>
		</tr>
</tbody></table>בטבלה 2: פרופילים קליניים מהחולים שנבדקו במחקר. ממוצע הערכים שהוקלט לפני (T0), 90 (T90), ו- 180 ימים (T180) לאחר בשתל התא על ידי טכניקת השחזור רשתית Limoli (LRRT) בחולים כל.

Watch this Scientific Journal Video about Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report at JoVE.com

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

משובי טיפול על ידי תא Suprachoroidal בשתל ב ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש: דוח ראשוני In Vivo

מטרת מחקר זה היא להעריך האם השתל suprachoroidal של שומן, נגזר תאי גזע הכלולים השבר בכלי הדם סטרומה, טסיות נגזר טסית דם עשיר פלזמה בטכניקת שיקום רשתית Limoli יכול לשפר את חדות הראייה, תגובות רגישות הרשתית בעיניים מושפע ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש.

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

regenerative-therapy-suprachoroidal-cell-autograft-dry-age-related

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

10.0K Views.  Low Vision Research Centre of Milan. מטרת מחקר זה היא להעריך האם השתל suprachoroidal של שומן, נגזר תאי גזע הכלולים השבר בכלי הדם סטרומה, טסיות נגזר טסית דם עשיר פלזמה בטכניקת שיקום רשתית Limoli יכול לשפר את חדות הראייה, תגובות רגישות הרשתית בעיניים מושפע ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש.

Video: Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

In Vivo Canine Muscle Function Assay

We describe a minimally-invasive and reproducible method to measure canine pelvic limb muscle strength and muscle response to repeated eccentric 
contractions. The pelvic limb of an anesthetized dog is immobilized in a stereotactic frame to align the tibia at a right angle to the femur. Adhesive wrap affixes the 
paw to a pedal mounted on the shaft of a servomotor to measure torque. Percutaneous nerve stimulation activates pelvic limb muscles of the paw to either push (extend) or 
pull (flex) against the pedal to generate isometric torque. Percutaneous tibial nerve stimulation activates tibiotarsal extensor muscles. Repeated eccentric (lengthening) 
contractions are induced in the tibiotarsal flexor muscles by percutaneous peroneal nerve stimulation. The eccentric protocol consists of an initial isometric contraction 
followed by a forced stretch imposed by the servomotor. The rotation effectively lengthens the muscle while it contracts, e.g., an eccentric contraction. During 
stimulation flexor muscles are subjected to an 800 msec isometric and 200 msec eccentric contraction. This procedure is repeated every 5 sec. To avoid fatigue, 4 min rest 
follows every 10 contractions with a total of 30 contractions performed.

In Vivo Canine Muscle Function Assay

We describe a minimally-invasive and painless method to measure canine hindlimb muscle strength and muscle response to repeated eccentric contractions.

In vivo Assay שרירים כלב פונקציה

We describe a minimally-invasive and reproducible method to measure canine pelvic limb muscle strength and muscle response to repeated eccentric 
...

Production and Detection of Reactive Oxygen Species (ROS) in Cancers

Reactive oxygen species include a number of molecules that damage DNA and RNA and oxidize proteins and lipids (lipid peroxydation). These reactive molecules contain an oxygen and include H2O2 (hydrogen peroxide), NO (nitric oxide), O2- (oxide anion), peroxynitrite (ONOO-), hydrochlorous acid (HOCl), and hydroxyl radical (OH-).
Oxidative species are produced not only under pathological situations (cancers, ischemic/reperfusion, neurologic and cardiovascular pathologies, infectious diseases, inflammatory diseases 1, autoimmune diseases 2, etc&hellip;) but also during physiological (non-pathological) situations such as cellular metabolism 3, 4. Indeed, ROS play important roles in many cellular signaling pathways (proliferation, cell activation 5, 6, migration 7 etc..). ROS can be detrimental (it is then referred to as "oxidative and nitrosative stress") when produced in high amounts in the intracellular compartments and cells generally respond to ROS by upregulating antioxidants such as superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) and glutathione (GSH) that protects them by converting dangerous free radicals to harmless molecules (i.e. water). Vitamins C and E have also been described as ROS scavengers (antioxidants).
Free radicals are beneficial in low amounts 3. Macrophage and neutrophils-mediated immune responses involve the production and release of NO, which inhibits viruses, pathogens and tumor proliferation 8. NO also reacts with other ROS and thus, also has a role as a detoxifier (ROS scavenger). Finally NO acts on vessels to regulate blood flow which is important for the adaptation of muscle to prolonged exercise 9, 10. Several publications have also demonstrated that ROS are involved in insulin sensitivity 11, 12.
Numerous methods to evaluate ROS production are available. In this article we propose several simple, fast, and affordable assays; these assays have been validated by many publications and are routinely used to detect ROS or its effects in mammalian cells. While some of these assays detect multiple ROS, others detect only a single ROS.

Production and Detection of Reactive Oxygen Species ROS in Cancers

Here we propose simple methods to test and evaluate the presence of reactive oxygen species in cells.

הפקה וזיהוי של מינים חמצן תגובתי (ROS) סרטן

Reactive oxygen species include a number of molecules that damage DNA and RNA and oxidize proteins and lipids (lipid peroxydation). These reactive ...

A Murine Model of Muscle Training by Neuromuscular Electrical Stimulation

Neuromuscular electrical stimulation (NMES) is a common clinical modality that is widely used to restore1, maintain2 or enhance3-5 muscle functional capacity. Transcutaneous surface stimulation of skeletal muscle involves a current flow between a cathode and an anode, thereby inducing excitement of the motor unit and the surrounding muscle fibers. 
NMES is an attractive modality to evaluate skeletal muscle adaptive responses for several reasons. First, it provides a reproducible experimental model in which physiological adaptations, such as myofiber hypertophy and muscle strengthening6, angiogenesis7-9, growth factor secretion9-11, and muscle precursor cell activation12 are well documented. Such physiological responses may be carefully titrated using different parameters of stimulation (for Cochrane review, see 13). In addition, NMES recruits motor units non-selectively, and in a spatially fixed and temporally synchronous manner14, offering the advantage of exerting a treatment effect on all fibers, regardless of fiber type. Although there are specified contraindications to NMES in clinical populations, including peripheral venous disorders or malignancy, for example, NMES is safe and feasible, even for those who are ill and/or bedridden and for populations in which rigorous exercise may be challenging. 
Here, we demonstrate the protocol for adapting commercially available electrodes and performing a NMES protocol using a murine model. This animal model has the advantage of utilizing a clinically available device and providing instant feedback regarding positioning of the electrode to elicit the desired muscle contractile effect. For the purpose of this manuscript, we will describe the protocol for muscle stimulation of the anterior compartment muscles of a mouse hindlimb.

A murine model of neuromuscular electrical stimulation (NMES), a safe and inexpensive clinical modality, to the anterior compartment muscles is described. This model has the advantage of modifying a readily available clinical device for the purpose of eliciting targeted and specific muscle contractions in mice.

דגם Murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular

Neuromuscular electrical stimulation (NMES) is a common clinical modality that is widely used to restore1, maintain2 or enhance3-5 muscle functional ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. Here, we describe a general protocol for cell labeling, imaging, and image processing. The technique is applicable to various cell types and animal models, although here we focus on a typical mouse model for tracking murine immune cells. The most important issues for cell labeling are described, as these are relevant to all models. Similarly, key imaging parameters are listed, although the details will vary depending on the MRI system and the individual setup. Finally, we include an image processing protocol for quantification. Variations for this, and other parts of the protocol, are assessed in the Discussion section. Based on the detailed procedure described here, the user will need to adapt the protocol for each specific cell type, cell label, animal model, and imaging setup. Note that the protocol can also be adapted for human use, as long as clinical restrictions are met.

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

We describe a general protocol for in vivo cell tracking using MRI in a mouse model with ex vivo labeled cells. A typical protocol for cell labeling, image acquisition processing and quantification is included.

בF-MRI 19 vivo למעקב סלולרי

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal vasculature of various eye diseases such as age-related macular degeneration (AMD). ICGA is especially useful to image the posterior choroidal vasculature of the eye due to its capability of penetrating through the pigmented layer with its infrared spectrum. ICGA time course can be divided into early, middle, and late phases. The three phases provide valuable information on the pathology of eye problems. Although time-course ICGA by intravenous (IV) injection is widely used in the clinic for the diagnosis and management of choroid problems, ICGA by intraperitoneal injection (IP) is commonly used in animal research. Here we demonstrated the technique to obtain high-resolution ICGA time-course images in mice by tail-vein injection and confocal scanning laser ophthalmoscopy. We used this technique to image the choroidal lesions in a mouse model of age-related macular degeneration. Although it is much easier to introduce ICG to the mouse vasculature by IP, our data indicate that it is difficult to obtain reproducible ICGA time course images by IP-ICGA. In contrast, ICGA via tail vein injection provides high quality ICGA time-course images comparable to human studies. In addition, we showed that ICGA performed on albino mice gives clearer pictures of choroidal vessels than that performed on pigmented mice. We suggest that time-course IV-ICGA should become a standard practice in AMD research based on animal models.

Indocyanine Green Angiography (or ICGA) performed by tail vein injection provides high quality ICGA time course images to characterize abnormalities in mouse choroid.

איתור ליקויים בChoroidal כלי דם במודל של עכברים של ניוון מקולרי הקשור בגיל בזמן הקורס Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal ...

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in vivo demonstration of such cells has only recently been attained. Here, in vivo imaging techniques to investigate the role of endogenous osteogenic stem/progenitor cells (OSPCs) and their progeny in bone repair are provided. Using osteo-lineage cell tracing models and intravital imaging of induced microfractures in calvarial bone, OSPCs can be directly observed during the first few days after injury, in which critical events in the early repair process occur. Injury sites can be sequentially imaged revealing that OSPCs relocate to the injury, increase in number and differentiate into bone forming osteoblasts. These methods offer a means of investigating the role of stem cell-intrinsic and extrinsic molecular regulators for bone regeneration and repair.

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Quantitative measurement of bone progenitor function in fracture healing requires high resolution serial imaging technology. Here, protocols are provided for using intravital microscopy and osteo-lineage tracking to sequentially image and quantify the migration, proliferation and differentiation of endogenous osteogenic stem/progenitor cells in the process of repairing bone fracture.

עוקב<em&gt; בvivo</em&gt; הדמיה של תאי גזע / אב osteogenic במהלך תיקון שבר

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in ...

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The current treatments for OA pain such as NSAIDS or opiates are neither sufficiently effective nor devoid of detrimental side effects. Animal models of OA are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms and define novel pharmacological targets for therapy. Currently available models of OA in rodents include surgical and chemical interventions into one knee joint. The monoiodoacetate (MIA) model has become a standard for modelling joint disruption in OA in both rats and mice. The model, which is easier to perform in the rat, involves injection of MIA into a knee joint that induces rapid pain-like responses in the ipsilateral limb, the level of which can be controlled by injection of different doses. Intra-articular injection of MIA disrupts chondrocyte glycolysis by inhibiting glyceraldehyde-3-phosphatase dehydrogenase and results in chondrocyte death, neovascularization, subchondral bone necrosis and collapse, as well as inflammation. The morphological changes of the articular cartilage and bone disruption are reflective of some aspects of patient pathology. Along with joint damage, MIA injection induces referred mechanical sensitivity in the ipsilateral hind paw and weight bearing deficits that are measurable and quantifiable. These behavioral changes resemble some of the symptoms reported by the patient population, thereby validating the MIA injection in the knee as a useful and relevant pre-clinical model of OA pain.
The aim of this article is to describe the methodology of intra-articular injections of MIA and the behavioral recordings of the associated development of hypersensitivity with a mind to highlight the necessary steps to give consistent and reliable recordings.

Osteoarthritis (OA), or degenerative joint disease, is a debilitating condition associated with pain that remains only partially controlled by available analgesics. Animal models are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms. Here we describe the methodology for the monoiodoacetate model of OA pain in the mouse.

מודל Monoiodoacetate של אוסטיאוארתריטיס כאב העכבר

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

חסך בתאי עכבר מן xenografts גידול האנושי משפר משמעותי ניתוח במורד זרם של תאי יעד

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. It has become important to measure a person's activities in daily life, and not just measure their capacity for activity in the structured environment of a clinic or laboratory. A wearable sensor that is now enabling measurement of daily movement is the accelerometer. Accelerometers are commercially-available devices resembling large wrist watches that can be worn throughout the day. Data from accelerometers can quantify how the limbs are engaged to perform activities in peoples' homes and communities. This report describes a methodology to collect accelerometry data and turn it into clinically-relevant information. First, data are collected by having the participant wear two accelerometers (one on each wrist) for 24 h or longer. The accelerometry data are then downloaded and processed to produce four different variables that describe key aspects of upper limb activity in daily life: hours of use, use ratio, magnitude ratio, and the bilateral magnitude. Density plots can be constructed that visually represent the data from the 24 h wearing period. The variables and their resultant density plots are highly consistent in neurologically-intact, community-dwelling adults. This striking consistency makes them a useful tool for determining if upper limb daily performance is different from normal. This methodology is appropriate for research studies investigating upper limb dysfunction and interventions designed to improve upper limb performance in daily life in people with stroke and other patient populations. Because of its relative simplicity, it may not be long before it is also incorporated in clinical neurorehabilitation practice.

This protocol describes a method to quantify upper limb performance in daily life using wrist-worn accelerometers.

שיטה לכימות ביצוע גפיים עליונים ב Daily Life בעזרת מדי תאוצה

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...

Mechanical Micronization of Lipoaspirates for Regenerative Therapy

Stromal vascular fraction (SVF) has become a regenerative tool for various diseases; however, legislation strictly regulates the clinical application of cell products using collagenase. Here, we present a protocol to generate an injectable mixture of SVF cells and native extracellular matrix from adipose tissue by a purely mechanical process. Lipoaspirates are put into a centrifuge and spun at 1,200 x g for 3 min. The middle layer is collected and separated into two layers (high-density fat at the bottom and low-density fat on the top). The upper layer is directly emulsified by intersyringe shifting, at a rate of 20 mL/s for 6x to 8x. The emulsified fat is centrifuged at 2,000 x g for 3 min, and the sticky substance under the oil layer is collected and defined as the extracellular matrix (ECM)/SVF-gel. The oil on the top layer is collected. Approximately 5 mL of oil is added to 15 mL of high-density fat and emulsified by intersyringe shifting, at a rate of 20 mL/s for 6x to 8x. The emulsified fat is centrifuged at 2,000 x g for 3 min, and the sticky substance is also ECM/SVF-gel. After the transplantation of the ECM/SVF-gel into nude mice, the graft is harvested and assessed by histologic examination. The result shows that this product has the potential to regenerate into normal adipose tissue. This procedure is a simple, effective mechanical dissociation procedure to condense the SVF cells embedded in their natural supportive ECM for regenerative purposes.

Here, we present a protocol to obtain stromal vascular fraction from adipose tissue through a series of mechanical processes, which include emulsification and multiple centrifugations.

Micronization מכני של Lipoaspirates לטיפול רגנרטיבית

Stromal vascular fraction (SVF) has become a regenerative tool for various diseases; however, legislation strictly regulates the clinical application of ...

משובי טיפול על ידי תא Suprachoroidal בשתל ב ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש: דוח ראשוני In Vivo

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video