Evaluación de cribado de alto rendimiento de la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS) mediante colorante de fluorescencia de dihidroetidio (DHE)

Nuestro laboratorio estudia el impacto de los contaminantes ambientales, como los metales pesados, en la función hepática y las enfermedades relacionadas con la producción de especies reactivas de oxígeno. Este protocolo tiene como objetivo medir cuantitativamente los niveles de ROS en las células utilizando una sonda de fluorescencia de dihidroetidio. Este protocolo utiliza una plataforma de cribado de alto contenido para medir cuantitativamente los niveles de especies de ROS intracelulares en líneas hepatocelulares.

Medir el nivel de ROS intercelulares con precisión es de vital importancia en el estudio toxicológico de alto rendimiento, que es un área clave de interés en nuestro laboratorio. La fluorescencia DHE es un método muy específico para medir los niveles totales de ROS, particularmente dirigido al radical superóxido, lo que le da una ventaja significativa sobre otras sondas de fluorescencia ROS comúnmente utilizadas. Además, este protocolo ofrece la capacidad única de medir el nivel total de ROS celular en una plataforma de alto rendimiento.

Nuestro protocolo es una opción robusta y reproducible para caracterizar la producción total de ROS intracelular. Los enfoques de alto rendimiento para medir los niveles de ROS son útiles en una variedad de estudios, como la toxicología, la detección de fármacos y la biología del cáncer, que serán nuestro enfoque en el futuro.