El sistema de alimentación de Aplysia se ha utilizado durante mucho tiempo como un sistema modelo para el estudio del control motor y la biomecánica de cuerpo blando. Sin embargo, los músculos profundos dentro de la pinza de alimentación han sido inaccesibles para la manipulación in vivo. Esta cirugía nos permite acceder a estos músculos en animales de comportamiento intactos.
Esto no sólo nos permite el acceso in vivo por primera vez, sino que la técnica implica una sola incisión a una sola parte de una, lo que significa que el daño a las otras regiones es relativamente pequeño. La mejor preparación es hacer disecciónes cuidadosas de la masa bucal y familiarizarse a fondo con la anatomía. Seleccione un animal activo ofreciéndole algas marinas y confirmando que los intervalos de mordida no son mayores de cinco segundos.
10 minutos después de la anestesia, suavemente intente insertar un alfiler en la branquia y el rinoforo, verificando que estos no se retraigan para asegurar una anestesia suficiente. Asegúrese de que los labios de la estén lisos, lo que indica que las mandíbulas están completamente relajadas. De esta manera, el odontóforo se expone.
En el caso de que aparezcan arrugas en los labios, los labios y la mandíbula del animal no están suficientemente relajados para el procedimiento quirúrgico. Consulte el manuscrito para obtener consejos sobre cómo inducir la relajación de los labios. Coloque la de modo que la cabeza cuelgue hacia abajo, permitiendo que la masa bucal se asiente contra las mandíbulas.
Aplique presión con el pulgar y el dedo índice para empujar la masa bucal hacia las mandíbulas, manteniendo la masa bucal en su lugar. Gire la mandíbula para que sean visibles. Al mismo tiempo, mantener la presión sobre la masa bucal para que la proa de la masa bucal sea visible a través de las mandíbulas.
Trabaje suavemente las puntas de los fórceps contundentes en la hendidura del odontóforo y utilícelas para palanca de la superficie radular a través de las mandíbulas. Si las mandíbulas no están suficientemente relajadas, utilice los fórceps para agarrar suavemente el borde de la hendidura para ayudar a este proceso. Una vez expuesta la superficie, trabaje las mandíbulas despejadas de la parte anterior de la superficie radular alrededor del perímetro.
Esto hace que el odontóforo sea menos propenso a retraerse. Asegúrese de que no más de la mitad de las paredes del odontóforo estén expuestas. Una vez que la superficie radular esté completamente expuesta, coloque la bajo un microscopio de disección para la cirugía.
Para los científicos con menos experiencia, utilice una banda ancha de goma y una tercera mano para estabilizar las mandíbulas y la superficie radular para la cirugía. Coloque la superficie radular de modo que el lado hendido se dirija al investigador. Sujete suavemente la superficie radular cerca de la base radular para que se cree un pliegue horizontal perpendicular al pliegue anatómico.
Utilice tijeras finas para cortar a través de este pliegue, haciendo una incisión a lo largo del pliegue anatómico. Extienda esta incisión inicial a tres a cinco centímetros para permitir el acceso al interior de la masa bucal. Ajuste la luz para que apunte directamente hacia atrás a través de esta incisión.
Parte los bordes de la incisión para que la parte posterior del lumen del odontóforo y las finas hebras verticales del músculo I7 sean visibles. Alcanza la incisión. Agarre ambas hebras de I7 y tire de ellos hacia arriba a través de la incisión, donde tanto del músculo se puede cortar como es práctico.
Una vez realizadas las lesiones, agarre los tentáculos anteriores y empújelos hacia abajo sobre la superficie radular para devolver la a su configuración original. Colocar animales postquirúrgidos en un ambiente protegido con buen flujo de agua. Asegúrese de que los animales estén alerta y respondan el día después de la cirugía.
El primer o segundo día después de la cirugía, los animales comienzan a alimentarse. Para realizar una lesión de fibra sub radular después de una incisión quirúrgica, inserte la punta de una hoja de bisturí recta pequeña a través de la incisión con el borde afilado inclinado hacia arriba. Raspa suavemente las finas fibras musculares de la parte inferior de la superficie radular.
A continuación, realice la atención postoperatoria como se realizó anteriormente. En este estudio anatómico, las lesiones falsas no tuvieron ningún efecto significativo en el ancho de la abertura en el pico de mordida. Mientras que tanto las lesiones fibrosas I7 como sub-radulares redujeron significativamente el ancho de la mordida.
Lo más importante a recordar es que los labios y las mandíbulas del animal están completamente relajados antes de intentar empujar el agarrador a través de las mandíbulas. Lo más probable es que tanto I7 como las fibras subrcionalulares sean músculos multifuncionales y sólo hemos identificado ciertos aspectos del comportamiento al que contribuyen. Además, esta técnica de prolongado el odontóforo da acceso a porciones enteras de la anatomía que antes eran inaccesibles.
Además de abrir regiones anatómicas y biomecánica de cuerpo blando, esperamos que esto sirva de base para otros investigadores que están trabajando con estructuras blandas que de otro modo podrían ser difíciles de investigar.
