Esta metodología ayuda a abordar preguntas clave en el campo de la alergia y la inmunología, específicamente aquellas que se ocupan de los fenotipos que pueden estar asociados con los cambios de temperatura corporal. Las principales ventajas de esta técnica son que es barata, no invasiva, y no requiere anestesia. Las implicaciones de esta técnica permiten a los investigadores reducir el estrés y el dolor de los ratones durante la medición de la temperatura, al tiempo que eliminan los efectos de la anestesia, y/o visualizar fenotipos conductuales.
Para medir la temperatura corporal del ratón después de la anestesia, confirme la sedación por frecuencia respiratoria o inmovilidad y agarre el ratón por la nuca con un dedo índice y el pulgar y la cola con un dedo meñique. Mientras sostiene el ratón paralelo a la superficie del banco de laboratorio, coloque un sensor termómetro infrarrojo debajo del abdomen inferior con la superficie plana externa del termómetro de dos a cinco milímetros de distancia de la superficie del abdomen entre los dos pezones superiores. A continuación, presione el gatillo del termómetro para medir la temperatura del animal, teniendo cuidado de mantener el ratón y el termómetro estables.
Para medir la temperatura corporal del ratón sin anestesia, levante el ratón por el centro de la cola y exponga el abdomen. Permita que el ratón se afiresca a una superficie de borde recta con sus sierras delanteras y sostenga el gatillo para medir la temperatura. Alternativamente, permita que el ratón se afianza en el borde recto superior del termómetro y haga que el ratón se siente en la superficie plana externa del termómetro con su abdomen justo sobre el sensor infrarrojo durante la medición de la temperatura.
Para una sensibilización de anafilaxia sistémica pasiva, utilice una jeringa de un mililitro equipada con una aguja de calibre 26 para inyectar 200 microlitros de Anti-Dinitropol recién preparado, o DNP, IgE en PBS, en el peritoneo de cada animal receptor justo lateral a la línea media entre los pezones más inferiores y segundos más inferiores. 24 horas después de la inyección, mida la temperatura corporal de cada animal receptor como se ha demostrado y cargue una jeringa de un mililitro equipada con una aguja de calibre 30 con 100 microlitros de albúmina sérica humana DNP recién preparada. Para inducir la anafilaxia sistémica pasiva, inserte la aguja en el lado medial del ojo en un ángulo superficial apuntando detrás del ojo e inyecte todo el volumen de solución por vía intravenosa en el seno venoso retro-orbital.
A continuación, coloque el ratón solo en una jaula de recuperación con monitoreo hasta la recumbencia completa, y mida la temperatura corporal y la actividad cada 10 minutos durante 70 minutos. Los ratones sensibilizados con IgE demuestran una caída máxima de temperatura de tres grados Centígrados a los 20 minutos, mientras que los ratones de control PBS presentan una caída máxima de 1,1 grados centígrados en el mismo período de tiempo después del desafío. Las observaciones conductuales también se pueden realizar en animales no anestesiados para evaluar la relación entre las caídas de temperatura observadas y la actividad del ratón.
En este desafío representativo de alergia a los alimentos con ratones, el grupo de control de PBS demostró una caída significativa de la temperatura 10 minutos después del desafío en comparación con el grupo tratado con inhibidores de 2CA. La evaluación de las puntuaciones de actividad y las disminuciones de temperatura de este desafío de alergia alimentaria reveló una correlación estadísticamente significativa entre los dos conjuntos de datos. Después de este procedimiento, se pueden realizar otros experimentos que implican mediciones de temperatura corporal del ratón para responder preguntas adicionales con respecto a los fenotipos conductuales que están asociados con el cambio de temperatura corporal.
