Los autores reconocen las siguientes fuentes de financiación: Else Kröner-Fresenius-Stiftung (Tienush Rassaf); Donación de Hans und Gertie Fischer Stiftung (Tienush Rassaf), de la Facultad de medicina de la Universidad de Duisburg-Essen, Alemania (Tienush Rassaf, Lars Michel); Berta de Ernst-und Grimmke-Stiftung (Christos Rammos).

Todos los experimentos se realizaron en conformidad y cumplimiento con todas las regulaciones relevantes ("Convenio Europeo para la protección de los animales vertebrados utilizados para experimentales y otros fines científicos (Directiva 2010/63/UE) y cuidado de los animales fue en conformidad con las directrices. Todos los experimentos se han realizado con ratones C57BL/6JRj machos a la edad de 6 meses.
1. preparación
<ol><li>Preparar un microscopio quirúrgico y una almohadilla de calefacción así como una sonda rectal para monitorear la temperatura del cuerpo. Limpiar y esterilizar todos los instrumentos quirúrgicos.</li>
	<li>Preparar 2 piezas de 10 cm hilo de seda 5-0 para ligadura de vasos, 5 cm de hilo de polipropileno 6-0 y tubo de silicona de 2 mm para la ligadura de la LCA.</li>
	<li>Preparar la cubeta de calibración del catéter de PV por calentar previamente a 37 º C y preparar un 100 μl jeringa Hamilton llena con 15% de cloruro de sodio (NaCl) en H2O para la calibración de solución salina.</li>
	<li>Catéter de lugar el PV (3 cm, F 1,4) en 37 º C precalentado 0.9% NaCl en H2O (solución salina) por lo menos 30 min antes de la medición. Conectar el catéter al dispositivo de adquisición de datos y conectar el dispositivo a un convertidor analógico/digital. Conectar ambos dispositivos a una computadora.</li>
	<li>Configurar el software. Realizar presión guiada por el software de calibración y calibración de conductancia según lo exigido por el flujo de trabajo guiado por el software8.</li>
</ol>2. anestesia y Analgesia
<ol><li>Anestesiar el ratón utilizando ketamina 100 mg/kg de peso corporal y xilacina clorhidrato 10 mg/kg de peso corporal por inyección intraperitoneal. Al principio de I / cirugía R, administre buprenorfina de peso cuerpo de 0,05 mg/kg por vía intraperitoneal para mantener la analgesia.</li>
	<li>Después de 10 min, realizar una intubación endotraqueal con un catéter de 20 G intravenoso (iv) y ventilar el ratón con 40% de oxígeno (O2) y (v) el 2% de isoflurano. Definir los parámetros de ventilación adecuada (por ejemplo, 220 μl volumen de movimiento, 150/min para un ratón C57BL/6JRj de 25-30 g).</li>
	<li>Continuamente monitor cuerpo via rectal sonda de temperatura. Sujete el ratón sobre la placa caliente con la cabeza apuntando hacia el investigador. Temperatura corporal normal de ratón es 36.5-38 ° C. Mantener la temperatura corporal en 1 grado de ajuste de temperatura de la placa caliente.</li>
</ol>3. izquierda cateterismo Ventricular
<ol><li>Desinfectar el pecho y el cuello con tres peelings alternas de betadine y 70% de alcohol.  Espere a desinfectante de la piel se seque. Quitar el pelo en el pecho mediante un pequeño sistema animal.</li>
	<li>Realizar una incisión mediana longitudinal 10 mm 5 mm debajo del labio inferior hacia el esternón con pequeñas tijeras quirúrgicas.</li>
	<li>Disecar la parte izquierda y derecha de la glándula submaxilar vía contundente preparación usando un fórceps. Separar el tejido muscular y grasa en la región paratraqueal derecha para exponer la arteria carótida derecha comuna. Movilizar y separar el vaso para una longitud total de 5-10 mm de tejido conectivo a través de una cuidadosa preparación contundente junto a la nave con un fórceps curvado. Nota: Evite la manipulación mecánica del nervio vago o del cuerpo carótida en todo momento ya que esto puede causar bradicardia e hipotensión severa.</li>
	<li>Pasar los dos hilos de seda dispuestos bajo el buque. Ligar el vaso distal con un nudo apretado y un nudo flojo en la región proximal de expuestos que todavía permite el paso del catéter.</li>
	<li>Fijar los hilos del nudo (apretado) craneal al lado de la cabeza de los ratones al aplicar una tensión ligera sobre el buque, Esto facilitará la introducción del catéter. Coloque una pinza vascular de pinza sobre el vaso proximal proximal del nudo suelto reversible bloquear el flujo de sangre.</li>
	<li>Realizar una incisión en forma de cuña 1 mm proximal al nudo craneal para abrir el vaso con micro tijeras. Nota: Una pequeña gota de sangre indica la correcta ejecución de este paso.</li>
	<li>Inserte el catéter cuidadosamente para 10 mm. comienzo de grabación de datos de la sonda. Nota: Que se extiende la incisión con unas pinzas puede facilitar este proceso.</li>
	<li>Extraer la pinza vascular. Añadir 1-2 gotas de solución salina a la incisión para facilitar el movimiento del catéter. Seguir introduciendo el catéter por aproximadamente otro 10 mm. Después de pasar el nudo proximal con la punta del sensor, sujete el nudo cuidadosamente justo lo suficiente para prevenir reflujo junto con las partes más delgadas del catéter la sangre sin afectar el movimiento del catéter. Nota: El tamaño del sensor en la punta del catéter evita el reflujo de sangre al extraer la pinza vascular.</li>
	<li>Suavemente seguir introduciendo el catéter hasta análisis de presión muestran la presión arterial perfil indicando que el catéter se coloca en la aorta (Figura 3A). Nota: El catéter alcanza la válvula aórtica se indicará por resistencia a la luz y el movimiento sincronizado de pulso del catéter.</li>
	<li>Al experimentar resistencia tratando de avanzar a través de la válvula aórtica, tire el catéter nuevamente 5 mm y avance hasta la cateterización del LV se indicarán en un cambio en el análisis de PV como presión diastólica llegará a 0 - 20 mmHg (figura 3B). Tenga en cuenta cambios en el volumen de control para confirmar más lejos colocación ventricular izquierda de la punta del sensor (figura 3). Sujetar más firmemente el nudo proximal para evitar el movimiento del catéter.</li>
</ol>4. isquemia/reperfusión cirugía
<ol><li>Realizar incisión de la piel del esternón caudal hacia la axila izquierda para una longitud total de 15 mm. proceder con contundente preparación de las capas dos musculares hasta que las costillas pueden ser visualizadas.</li>
	<li>Abrir el tórax a través de incisión entre la tercera y cuarta costilla izquierda. Use los ganchos quirúrgicos para acceder al pericardio. Resecar el pericardio por encima del corazón. Antes de continuar con la ligadura de la LCA, esperar 30 s sin tocar el animal para registrar datos de PV para análisis válido.</li>
	<li>Localizar el ACV emergentes bajo la aurícula izquierda y descendente en el lado izquierdo del corazón hacia el ápice. Utilizar una sutura de polipropileno 6-0 para rodear a la arteria con un lazo de 2 mm por debajo de la aurícula izquierda. Colocar un tubo de silicona pequeño debajo del lazo y un nudo apretado arriba. Nota: Gris que da vuelta miocardio Distal sirve como control positivo para ACV oclusión6. I / cirugía de R debe realizarse dentro de 5 minutos independientemente del investigador operativo.</li>
	<li>Cortar la sutura en 1 mm de longitud. Los ganchos quirúrgicos y cerrar manualmente las capas de músculo por encima de la incisión. Esperar 45 minutos mientras se graban continuamente datos de PV.</li>
	<li>Después de 45 minutos, vuelva a abrir la incisión y retire el tubo de silicona para inducir a la reperfusión. Datos de registro para otro 20 minutos. Nota: Un cambio a un color rojo como se ve antes de isquemia indica reperfusión exitosa.</li>
</ol>5. calibración
Nota: La calibración de la instalación de catéter de fotovoltaica consta de 4 pasos obligatorios, dos de los cuales tienen que realizarse después de la medición. Calibración debe repetirse después de cada experimento para garantizar resultados válidos.
<ol><li>Realizar la calibración de presión y calibración de conductancia antes del experimento tal como se describe en paso 1.5.</li>
	<li>Realizar la calibración a salina cuando todavía se coloca el catéter en el ventrículo izquierdo después de que termine el experimento sí mismo. Localizar la vena yugular derecha lateral de la arteria carótida en la zona preparada. Inyectar 10 μl 25% NaCl en H2O a través de un Hamilton jeringa mientras que los datos de grabación.</li>
	<li>Calcular la calibración mediante el software de adquisición, destacando la fase ascendente en la curva de volumen (figura 5). Repita este proceso para un total de 3 veces. Evitar la pérdida de sangre después de la extracción de la jeringa utilizando una pinza vascular para comprimir rápidamente la punción.</li>
	<li>Realizar la calibración de volumen para calibrar la adquisición de datos de volumen por el análisis de volúmenes estandarizados. Obtener sangre de ratón de aproximadamente 500 μl de punción cardiaca con una jeringa de 1 mL heparinizada ligeramente (por ejemplo, 5 μl heparina 200 de IE). Tire hacia atrás el catéter PV 10-15 mm para evitar dañar el catéter.</li>
	<li>Llene la sangre obtenida en la cubeta de calibración previamente calentadas de 37 ° C (figura 5A). Evite las burbujas ya que puede interferir con los resultados. Añadir la punta del catéter en cada pozos y registro datos. Obtener una curva estándar mediante el análisis guiado por el software (figura 5B). Repita el proceso para un total de 3 veces.</li>
	<li>Eutanasia a ratones por exsanguinación o dislocación cervical mientras que suficiente anestesia isoflurano se mantiene en todo momento.</li>
</ol>6. Análisis de datos
<ol><li>Después de completar los pasos de calibración, realice análisis de datos guiado por software. Por lo tanto, destacar la sección correspondiente (por lo menos diez ciclos) dentro de la sección de análisis de Flujo de trabajo de PV y realizar análisis de línea de base. Excluir los ciclos con desviaciones por ventilación o manipulación si es necesario (figura 3D).</li>
	<li>Realizar análisis de línea de base de PV antes de paso de la válvula aórtica (sólo la presión arterial), inmediatamente antes y después de la obstrucción de la LCA. Continuar realizando análisis de línea de base de PV y en intervalos de 5 minutos mientras que la isquemia y después de la reperfusión. Al final del experimento, realizar análisis de datos de presión después de la retracción del catéter desde el ventrículo izquierdo (presión arterial).</li>
	<li>Analizar por lo menos 10 ciclos consecutivos para evitar el error de muestreo. Cuando está experimentando fuerte interferencia de obtener valores con la ventilación, interrupción transitoria de la ventilación para un máximo de 5 s pueden considerarse.</li>
	<li>Utilice los siguientes parámetros que son calculados en el Análisis de línea de base (figura 3D) para caracterizar la función del VI:<ol>
<li>Volumen (μL) de la carrera</li>
		<li>Fracción de eyección: volumen de movimiento / diastólica final volumen (%)</li>
		<li>Gasto cardiaco: volumen de movimiento * frecuencia cardíaca (μL/min)</li>
		<li>Índice cardiaco: salida cardíaca / área de superficie (µL/(min*cm²) del cuerpo</li>
		<li>Movimiento de trabajo: la zona de la curva PV (mmHg * μL)</li>
		<li>Presión máxima (PMÁX); Presión media (Pmean)</li>
		<li>dP/dt máxima (mmHg/s) como un parámetro de función sistólica del VI</li>
		<li>min dP/dt (mmHg/s) como un parámetro para el cumplimiento de la LV</li>
		<li>Constante de tiempo de relajación isovolumétrica: Tau (ms)</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sanchis-Gomar, F., Perez-Quilis, C., Leischik, R., Lucia, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+coronary+heart+disease+and+acute+coronary+syndrome.">Epidemiology of coronary heart disease and acute coronary syndrome.</a> Annals of Translational Medicine. 4 (13), 256 (2016).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Myocardial+Infarction.">Acute Myocardial Infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>McNamara, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+in-hospital+mortality+in+patients+with+acute+myocardial+infarction.">Predicting in-hospital mortality in patients with acute myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 68 (6), 626-635 (2016).</li><li>Kurian, G. A., Rajagopal, R., Vedantham, S., Rajesh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Oxidative+Stress+in+Myocardial+Ischemia+and+Reperfusion+Injury+and+Remodeling:+Revisited.">The Role of Oxidative Stress in Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury and Remodeling: Revisited.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , (2016).</li><li>Turer, A. T., Hill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+and+rationale+for+therapy.">Pathogenesis of myocardial ischemia-reperfusion injury and rationale for therapy.</a> American Journal of Cardiology. 106 (3), 360-368 (2010).</li><li>Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+approach+to+remote+ischemic+preconditioning+and+ischemic+preconditioning+against+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of Biological Methods. 3 (4), (2016).</li><li>Respress, J. L., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transthoracic+echocardiography+in+mice.">Transthoracic echocardiography in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (39), (2010).</li><li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats.">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li><li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+catheterization+in+mice+to+measure+the+pressure+volume+relationship:+Investigating+the+Bowditch+effect.">Cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: Investigating the Bowditch effect.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52618 (2015).</li><li>Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Langendorff+perfused+isolated+mouse+heart+model+of+global+ischemia-reperfusion+injury:+Impact+of+ischemia+and+reperfusion+length+on+infarct+size+and+LDH+release.">Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: Impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).</li><li>Task Force on the management of ST-segment elevation acute myocardial infarction of the European Society of Cardiology (ESC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation.">ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation.</a> European Heart Journal. 33 (20), 2569-2619 (2012).</li><li>Shigemitsu, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction+due+to+left+main+coronary+artery+occlusion.+Therapeutic+strategy.">Acute myocardial infarction due to left main coronary artery occlusion. Therapeutic strategy.</a> Japanese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 50 (4), 146-151 (2002).</li></ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

PV monitorización de la hemodinámica del LV en infarto agudo de miocardio sirve como un método novedoso para la evaluación en tiempo real en vivo de shock cardiogénico y deterioro de la función del LV en I / lesiones R. Cateterización de la PV puede proporcionar un amplio espectro de parámetros con respecto a la función sistólica y diastólica del VI. Además de los parámetros volumétricos de LV típicamente obtenidos por ecocardiografía o resonancia magnética (volúmenes de cámara, EF, volumen sistólico y gasto cardiaco), análisis de PV da un perfil más completo de la función del LV simultáneamente proporcionando medidas de sistólica del LV rendimiento (contractilidad dP/dt, tiempos de trabajo) y cumplimiento del LV (-dP/dt, Tau) como un parámetro de función diastólica.
Como la insuficiencia cardiaca aguda en pacientes con infarto agudo de miocardio es un predictor crítico temprana hospitalaria morbilidad y mortalidad2, monitoreo de deterioro hemodinámico agudo y shock cardiogénico en infarto agudo de miocardio puede servir de una herramienta valiosa para la identificación de posibles mecanismos de protección en un entorno experimental.
Varios factores resultados para ser crítica para la adquisición de datos exitosa. Anestesia estable era crucial para datos válidos de la PV desde isoflurano mostró que un efecto fuerte cardiodepressive con gotas de presión, LV EF y volumen de movimiento. Preparación atraumática de la arteria carótida fue importante para evitar la hipovolemia por pérdida de sangre. Además, la compresión o lesión del nervio vago y el cuerpo carotídeo puede resultar en deterioro severo de la hemodinámica.
Salina calibración y calibración de cubeta parecen ser un paso crítico para mantener datos válidos. Para la calibración de solución salina, la inyección de solución de NaCl al 15% condujo a mayor conductancia indicada por un aumento temporal en el volumen (figura 5). Mantener la misma velocidad cuando inyectar era crucial para datos estables. Al realizar la calibración de la cubeta, era importante evitar burbujas dentro de las cubetas para garantizar resultados válidos.
Los datos obtenidos de PV además indican la importancia de una adquisición simultánea de datos de presión y volumen para una caracterización hemodinámica válido puesto que la presión solo los datos no mostraron significativos cambios durante todo el experimento (Figura 4A ). El análisis combinado de PV ofrece ambos parámetros de línea de base para la función sistólica del VI (e.g., fracción de eyección) así como parámetros de contractilidad (dP/dt) del LV y LV relax (-dP/dt, Tau).
Curiosamente, la obstrucción aguda de lo ACV en pacientes causa un déficit severo de la función del VI con la necesidad inmediata de soporte hemodinámico mecánico y generalmente se asocia a una alta mortalidad tasa11,12. La oclusión del ACV en ratones mostraron menos deterioro hemodinámico y muerte asociada a oclusión de LCA durante el procedimiento no fue observada. Como un signo de que persiste estabilidad hemodinámica durante la isquemia, la presión arterial sistólica del LV era estable en todo momento (Figura 4A). Sin embargo, este efecto podría deberse a trompas más distales en ratones frente a obstrucciones de ACV en los seres humanos.
Tomados en conjunto, en tiempo real hemodinámica monitorización de infarto agudo de miocardio en ratones podría servir como nuevo método para el estudio de mecanismos cardioprotectores en severa disfunción ventricular con el objetivo de mejorar el tratamiento de la fase temprana de pacientes agudos infarto del miocardio.

La enfermedad cardiovascular es la causa más común de muerte en la civilización occidental1. Infarto agudo de miocardio es un evento crítico, que se asocia con alta mortalidad aguda y crónica2. Aunque la revascularización es alcanzado vía emergencia intervención coronaria percutánea (PCI), la mortalidad sigue siendo alta, particularmente dentro de las primeras 48 h después del inicio de los síntomas en pacientes con infarto agudo de miocardio3. Shock cardiogénico causado por la reducción aguda de la función del ventrículo izquierda (VI) es una causa importante de mortalidad hospitalaria en estos pacientes3. Esta reducción temprana en función del VI es causada por daño miocárdico después de isquemia y reperfusión. Este supuesto la isquemia/reperfusión (me / R) lesión está mediada por cambios en el metaboloma celular como la exagerada generación de especies de oxígeno reactivo4,5.
Para explorar posibles mecanismos de protección conduce a una disminución en el daño miocárdico en un entorno de preclínico, modelos de ratón confiables son esenciales incluyendo los métodos para la evaluación del post-/ R LV función6. En este contexto, la ecocardiografía transtorácica7 y la proyección de imagen de resonancia magnética (MRI)6 son ampliamente utilizados para fenotipado funcional8,9. Sin embargo, estos métodos no son adecuados para la evaluación de la disfunción ventricular severa y shock cardiogénico en el infarto de miocardio agudo constante y directamente no muestran datos sobre la presión del LV. El aparato Langendorff en corazón aislado de un ensayo ex vivo proporciona información acerca de los pathomechanisms subyacentes de la temprano-fase I / R lesión10. Este método es limitado debido a su incapacidad para reproducir en vivo mecanismos adaptativos tales como la regulación del sistema nervioso autónomo o de regulación hormonal y homeostasis acido-base. No hay actualmente ningún método para un fenotipo funcional completa de shock cardiogénico y la disfunción ventricular izquierda durante un curso del miocardio I / lesiones R.
Forma sincronizada con la combinación de cateterismo de presión-volumen (PV) y oclusión transitoria quirúrgica principal arteria coronaria izquierda (LCA) puede ser beneficioso pero técnicamente desafiantes. Estable hemodinámica extracardiaca durante mi lesión R son esenciales para obtener resultados válidos desde inestable pérdida de anestesia o de la sangre podría influir fuertemente los resultados. Una novela enfoque hemodinámico phenotyping de I / R lesiones via PV LV cateterismo transitorio ACV oclusión y podría traer nuevas perspectivas en el shock cardiogénico y disfunción ventricular en infarto agudo de miocardio y servir como un método para análisis futuros sobre cardioprotección.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="762">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Calibration cuvette</td>
			<td style="width:164px;">Millar instruments</td>
			<td style="width:119px;">910-1049</td>
			<td style="width:243px;">Calibration cuvette</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Contura professional hair trimmer</td>
			<td style="width:164px;">Wella</td>
			<td style="width:119px;">HS-60</td>
			<td>Small animal shaving system</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Eclipse Needle 27G</td>
			<td style="width:164px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">REF 305770</td>
			<td>27G needle</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Forceps</td>
			<td style="width:164px;">FST</td>
			<td>11203-25, 11069-08, 11616-15, 11506-12, 11051-10</td>
			<td style="width:243px;">Surgical forceps</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Forceps</td>
			<td style="width:164px;">Aesculap Braun</td>
			<td>BN731R, BD 311R</td>
			<td style="width:243px;">Surgical forceps</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Foris FS2434</td>
			<td style="width:164px;">Eizo</td>
			<td style="width:119px;">0FTD2033</td>
			<td>Monitor</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Hamilton Syringe 100 &#181;l needle</td>
			<td style="width:164px;">Hamilton</td>
			<td style="width:119px;">80621</td>
			<td>100&#181;l syringe with needle</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Heated Small animal OP table</td>
			<td style="width:164px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">15001</td>
			<td>Heated OP table</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Heparin-Natrium 25000</td>
			<td style="width:164px;">Ratiopharm</td>
			<td style="width:119px;">N68542.04</td>
			<td>Heparin</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Ketamin 10% 100 mg/ml</td>
			<td style="width:164px;">bela-pharm</td>
			<td style="width:119px;">FS1670041</td>
			<td>Ketamin</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Labchart Pro 8 + Pro modules</td>
			<td style="width:164px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;">MLS260/8</td>
			<td>PV data analysis software</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">LAS EZ</td>
			<td style="width:164px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">LAS EZ</td>
			<td>Microscope camera software</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Leica IC80 HD</td>
			<td style="width:164px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">IC80 HD</td>
			<td>Microscope camera</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Leica M80</td>
			<td style="width:164px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">M80</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Micro-tip catheter transducer</td>
			<td style="width:164px;">Millar instruments</td>
			<td style="width:119px;">SPR-839</td>
			<td>PV catheter</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">MiniVent</td>
			<td style="width:164px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">845</td>
			<td>ventilation</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">MPVS Ultra</td>
			<td style="width:164px;">Millar instruments</td>
			<td style="width:119px;">PL3508B48/M</td>
			<td>PV catheter data acquisition device</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Octenisept</td>
			<td style="width:164px;">Sch&#252;lke</td>
			<td style="width:119px;">20000832-A</td>
			<td>disinfectant</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Plastipak 1ml</td>
			<td style="width:164px;">PD</td>
			<td style="width:119px;">REF 303172</td>
			<td>1ml syringe</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">PowerLab 8/35</td>
			<td style="width:164px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;">PL3508</td>
			<td>analog/digital converter</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Prolene 6-0</td>
			<td style="width:164px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">XNEH7814.P31</td>
			<td>Polypropylene suture</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Retraction Kit</td>
			<td style="width:164px;">FST</td>
			<td>18200-20</td>
			<td>retraction of surgical situs</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Seraflex 5-0</td>
			<td style="width:164px;">Naila</td>
			<td style="width:119px;">IC108000</td>
			<td>silk suture</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Small and micro-scissors</td>
			<td style="width:164px;">FST Essen</td>
			<td style="width:119px;">14059-11, 15007-08, 14064-11</td>
			<td>Surgical scissors</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Small silicon tube</td>
			<td style="width:164px;">Reichelt Chemietechnik</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>tube for LCA occlusion</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Sodium Chloride</td>
			<td style="width:164px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S7653</td>
			<td>Sodium Chloride</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">testo 108</td>
			<td style="width:164px;">testo</td>
			<td>5631080</td>
			<td>rectal thermometer</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Thinkcentre desktop computer</td>
			<td style="width:164px;">Lenovo</td>
			<td style="width:119px;">PC0EJS2V</td>
			<td>Computer</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Vasofix Safety 20G</td>
			<td style="width:164px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;">4269110S-01</td>
			<td>intubation catheter</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:237px;">Windows 10</td>
			<td style="width:164px;">Microsoft</td>
			<td style="width:119px;">KW9-00240</td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Xylazin 2%</td>
			<td style="width:164px;">Ceva</td>
			<td style="width:119px;">6324464.00.00</td>
			<td>Xylazine hydrochloride</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time pressure-volume analysis of acute myocardial infarction in mice

Infarto agudo de miocardio puede llevar a insuficiencia cardiaca aguda y shock cardiogénico. La evaluación de la hemodinámica es crítica para la evaluación de cualquier enfoque terapéutico potencial contra la disfunción ventricular izquierda aguda (LV). Actuales modalidades de la proyección de imagen (por ej., ecocardiografía y la proyección de imagen de resonancia magnética) tienen varias limitaciones, ya que datos sobre presión de LV no pueden medirse directamente. Cateterismo de LV en ratones sometidos a oclusión coronaria podría servir como un método novedoso para una evaluación en tiempo real de la función del LV.
Al principio del procedimiento, ratones fueron anestesiados seguida de intubación endotraqueal. Para la cateterización de LV, la arteria carótida derecha fue expuesta mediante incisión media del cuello. El catéter fue introducido y colocado en la cavidad del LV. Se realizó toracotomía izquierda y la arteria coronaria principal izquierda (LCA) fue ligada. Para inducir la reperfusión, la sutura fue lanzada después de 45 min Pressure-volume de datos se registraron en todo momento.
Ligadura del ACV causó una disminución en la función sistólica del LV que se manifiesta en una reducción del 30% en cardiaco, volumen sistólico y fracción de eyección del LV (EF). DP/dt máxima como un parámetro para la contractilidad del LV se redujo también significativamente y función diastólica fue severamente deteriorada (dP/dt mínima -40%). Reperfusión en un período de 20 minutos no condujo a una recuperación completa de función del VI.
Análisis en tiempo real de presión-volumen sirven como un procedimiento válido para supervisar la función cardiaca durante el infarto agudo de miocardio en los ratones. Mantenimiento de la anestesia estable y un enfoque quirúrgico estandarizado fue crucial para garantizar resultados válidos. Como la fase temprana del infarto agudo de miocardio es crítica para la morbilidad y mortalidad, el método de delineado podría ser beneficioso para la evaluación preclínica de nuevas estrategias de cardioprotección.

Después de la cateterización del LV, ligadura reversible de ACV fue realizada por 45 minutos seguido de 10 minutos de la reperfusión. Datos de PV se registran en todos tiempos (figura 1).
Correcta colocación del catéter de PV fue confirmada mediante la obtención de la característica gráfica de PV LV (figura 2A). Colocación del catéter del LV demostró la gama de presión ventricular típica con un mínimo de 0 - 20 mmHg mientras que la falsa colocación del PV-catéter en la aorta habría demostrado una curva típica de la presión arterial con una presión mínima de 30-60 mmHg (presión arterial diastólica ) y una pequeña excursión al final de la sístole, lo que indica la válvula aórtica de cierre (figura 3B y 3C). Oclusión exitosa del CLP fue confirmada visualmente por palidez del miocardio LV distal (figura 2B).
Después de la obstrucción de la LCA, datos de PV fue adquiridos en intervalos de 5 minutos. Análisis de datos de presión no demostraron ningún cambio en la presión sistólica máxima LV, indicando perfusión periférica conservada y anestesia estable (Figura 4A). Análisis del volumen LV revelaron una disminución significativa en ambos EF (52% vs. 40%, p = 0.008) y volumen de movimiento absoluto (Figura 4B y 4C). Estos cambios se sucedieron dentro de la fase temprana de la isquemia y los datos funcionales del LV permanecidos invariable en la fase tardía de la isquemia. DP/dt máxima como un parámetro de la contractilidad del LV demostró una reducción del 30% en ratones sometidos a isquemia miocárdica. Trabajo de movimiento fue 30% reducido (figura 4 y 4E). Como un parámetro de función diastólica, dP/dt mínimo significativamente disminuyó indicando cumplimiento LV deteriorada (figura 4F). Visualmente se validó la reperfusión por la extracción del tubo de silicona. Reperfusión no mostró cambios significativos en el análisis de los datos de PV durante un periodo de 20 min (Figura 4A-4D). Animales funcionan Sham no mostraron una reducción significativa en el LV parámetros sistólicos o diastólicos (figura 4I-4J).
Al final de adquisición de datos, se realizaron cubeta calibración y calibración salina (figura 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57621/57621fig1v3.jpg"> Figura 1: esquema del método. Secuencia de la cateterización (LV) ventricular izquierda, oclusión de la arteria coronaria principal izquierda (LCA) y reperfusión.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57621/57621fig2.jpg"> Figura 2: procedimientos quirúrgicos. (A) cateterización ventricular izquierda a través de la arteria carótida común derecha. (B) obstrucción de la arteria coronaria principal izquierda con tubo de polipropileno sutura y silicio. <a href="/files/ftp_upload/57621/57621fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57621/57621fig3.jpg"> Figura 3: datos de presión-volumen representante. (A) presión arterial representante indique una presión mínima de > 30 mmHg y una excursión típica en el final de la sístole que indica cierre de la válvula aórtica. (B) representante dejó la presión ventricular diastólica valores de datos que muestra < 20 mmHg. (C) diagrama de presión-volumen ventricular izquierda representativa. (D) captura de pantalla de software PV base análisis. <a href="/files/ftp_upload/57621/57621fig3large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57621/57621fig4.jpg"> Figura 4: datos de presión/volumen en ratones sometidos a isquemia/reperfusión. (A) sistólica ventricular la presión arterial (Pmax) a la izquierda. (B) izquierda ventricular (LV) fracción de eyección (fe) (%). Volumen de movimiento (C) LV (μL). (D) máximo dP/dT (dP/dt máx) (mmHg/s). Trabajo de carrera (E) LV (SW). (F) mínimo dP/dt (min dP/dt) (mmHg/s). (G) constante de tiempo de relajación isovolumétrica Tau (ms). Volumen/presión (H) del diagrama antes y 45 minutos después de la inducción de isquemia. (-J) Movimiento de volumen (SV) (μL) y dP/dt máxima (dP/dt máx) (mmHg/s) en animales funcionan sham en comparación a los animales después de 15/30 min de isquemia. Datos (A-G) se presentan como media ± SEM. * p < 0,05 vía estudiante t-test o ratio emparejado-prueba de t, n = (A + D-G) de 4 ratones/grupo) o n = 3 ratones/grupo (B, C). + 45: 45 min de isquemia; REP: reperfusión. <a href="/files/ftp_upload/57621/57621fig4large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57621/57621fig5.jpg"> Figura 5: calibración de Post hoc. (A) esquema de la cubeta de calibración. Volumen en μl. (B) análisis de regresión lineal representativo de los datos de volumen obtenidos al realizar la calibración de la cubeta. Datos de volumen representativo (C) después de la inyección de 10 μl de cloruro de sodio 25% en H2O en la vena yugular derecha para realizar la calibración a salina. <a href="/files/ftp_upload/57621/57621fig5large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

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Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Infarto agudo de miocardio en ratones induce cambios agudos pero incompletamente caracterizados en función del ventrículo izquierda (VI). Cateterismo de LV en ratones sometidos a oclusión coronaria sirve como un método novedoso para una evaluación en tiempo real de la función del LV.

Análisis en tiempo real de presión-volumen del infarto agudo de miocardio en ratones

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

real-time-pressure-volume-analysis-acute-myocardial-infarction

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

9.0K vistas.  University Hospital Essen. Infarto agudo de miocardio en ratones induce cambios agudos pero incompletamente caracterizados en función del ventrículo izquierda (VI). Cateterismo de LV en ratones sometidos a oclusión coronaria sirve como un método novedoso para una evaluación en tiempo real de la función del LV.

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Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Infarto agudo de miocardio en ratas

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Investigación

Medicina

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

La inducción de infarto de miocardio en adultos de pez cebra Uso de Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Resonancia magnética y PET en modelos de ratón de infarto de miocardio

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Infarto de miocardio y la evaluación de resultados funcionales en los cerdos

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Mínimo procedimiento quirúrgico invasivo de inducir infarto de miocardio en ratones

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

La evaluación de resultado primaria en un modelo porcino de infarto agudo de miocardio

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

El infarto de miocardio en ratones recién nacidos, un modelo de regeneración cardiaca

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

Digital PCR para cuantificar la circulación MicroRNAs en infarto agudo de miocardio y enfermedades cardiovasculares

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

Biventricular Assessment of Cardiac Function and Pressure-Volume Loops by Closed-Chest Catheterization in Mice

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) generated by recording both pressure and volume during cardiac catheterization are vital when assessing both systolic and diastolic cardiac function. Left and right heart function are closely related, reflected in ventricular interdependence. Thus, recording biventricular function in the same animal is important to get a complete assessment of cardiac function. In this protocol, a closed chest approach to cardiac catheterization consistent with the way catheterization is performed in patients is adopted in mice. While challenging, the closed chest strategy is a more physiological approach, because opening the chest results in major changes in preload and afterload that create artifacts, most notably a fall in systemic blood pressure. While high-resolution echocardiography is used to assess rodents, cardiac catheterization is invaluable, particularly when assessing diastolic pressures in both ventricles.
Described here is a procedure to perform invasive, closed chest, sequential left and right ventricular pressure-volume (PV) loops in the same animal. PV loops are acquired using&#160;admittance technology with a mouse pressure-volume catheter and pressure-volume system acquisition. The procedure is described, beginning with the neck dissection, which is required to access the right jugular vein and the right carotid artery, to the insertion and positioning of the catheter, and finally the data acquisition. Then, the criteria required to ensure the acquisition of high-quality PV loops are discussed. Finally, the analysis of the left and right ventricular PV loops and the different hemodynamic parameters available to quantify systolic and diastolic ventricular function are briefly described.

Presented here is a protocol to assess biventricular heart function in mice by generating pressure-volume (PV) loops from the right and left ventricle in the same animal using closed chest catheterization. The focus is on the technical aspect of surgery and data acquisition.

Evaluación biventricular de la función cardíaca y de los asas presión-volumen mediante cateterismo torácico cerrado en ratones

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) ...

Utilizing Percutaneous Ventricular Assist Devices in Acute Myocardial Infarction Complicated by Cardiogenic Shock

Cardiogenic shock is defined as persistent hypotension, accompanied by evidence of end organ hypo-perfusion. Percutaneous ventricular assist devices (PVADs) are used for the treatment of cardiogenic shock in an effort to improve hemodynamics. Impella is currently the most common PVAD and actively pumps blood from the left ventricle into the aorta. PVADs unload the left ventricle, increase cardiac output and improve coronary perfusion. PVADs are typically placed in the cardiac catheterization laboratory under fluoroscopic guidance via the femoral artery when feasible. In cases of severe peripheral arterial disease, PVADs can be implanted through an alternative access. In this article, we summarize the mechanism of action of PVAD and the data supporting their use in the treatment of cardiogenic shock.

Percutaneous ventricular assist devices are increasingly being utilized in patients with acute myocardial infarction and cardiogenic shock. Herein, we discuss the mechanism of action and hemodynamic effects of such devices. We also review algorithms and best practices for the implantation, management and weaning of these complex devices.

Utilización de dispositivos de asistencia ventricular percutánea en el infarto agudo de miocardio complicado por shock cardiogénico

Cardiogenic shock is defined as persistent hypotension, accompanied by evidence of end organ hypo-perfusion. Percutaneous ventricular assist devices ...