Digestión de proteínas, ultrafiltración y cromatografía por exclusión de tamaño para optimizar el aislamiento de exosomas de suero y Plasma de sangre humana

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•

09:22 min

•

April 13th, 2018

DOI :

10.3791/57467-v

April 13th, 2018

•

Gustavo Diaz¹, Chandler Bridges¹, Megan Lucas¹, Yong Cheng², Jeff S. Schorey², Karen M. Dobos¹, Nicole A. Kruh-Garcia¹

¹Department of Microbiology, Immunology and Pathology, Colorado State University, ²Department of Biological Sciences, Eck Institute for Global Health, University of Notre Dame

Resumen

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tama o de nanopart culas de ultrafiltraci n

cromatograf a de exclusi n seguimiento an lisis

Capítulos en este video

0:04

Title

1:06

Preparation of Crude Sample (Either Plasma or Serum) by Pelleting Larger Vesicles and Cellular Debris

2:04

Digestion of Non-exosomal Blood Proteins and Removal of Small Proteins/Peptides by Centrifuge Ultrafiltration

4:21

Purification of Vesicles by Size Exclusion Chromatography (SEC)

5:45

Concentration of Purified Exosomes/Total Protein Quantification and Quantification/Sizing of Exosomes by Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)

7:09

Results: Increased Vesicle Yield and Exosome-specific Markers After Purification

8:15

Conclusion

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