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Radiomarkierung und Quantifizierung von Cellular Ebenen Phosphoinositide von High Performance Liquid Chromatography-gekoppelten Durchflussscintilla

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•

10:52 min

•

January 6th, 2016

DOI :

10.3791/53529-v

January 6th, 2016

•

Cheuk Y. Ho*¹, Christopher H. Choy*¹, Roberto J. Botelho¹

¹Department of Chemistry and Biology, Program in Molecular Science, Ryerson University

Zusammenfassung

Phosphoinositiden signalisieren Lipide, deren relative Häufigkeit schnell ändert als Reaktion auf verschiedene Reize. Dieser Artikel beschreibt eine Methode, um die Fülle der Phosphoinositiden Messung durch metabolisch Markierung von Zellen mit ³ H-myo-Inositol, gefolgt von Extraktion und Deacylierung. Extrahiert glycero-inositides werden dann durch Hochleistungs-Flüssigkeits-Chromatographie getrennt und durch Strömungs Szintillations quantifiziert.

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Phosphoinositide

Membrantransport

Fluss Szintillation

Signaltransduktion

radioaktive Markierung

Fl ssigkeitschromatographie

Kapitel in diesem Video

0:05

Title

0:58

Yeast Cell Culture and Radiolabeling of Phosphoinositides

2:58

Deacylation and Extraction of the Radiolabeled Phosphoinositides

5:14

Separation of Tritium-labeled Glycero-inositides by High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)

7:15

Data Analysis

8:55

Results: HPLC Analysis of Radiolabeled Phosphoinositides

9:55

Conclusion

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