建模年龄相关的神经退行性疾病在 卡诺哈布迪蒂斯埃利根

在过去的几十年里，由于生活水平的提高和医学科学的进步，人类的寿命延长了。年龄是许多威胁生命的疾病的最大危险因素，包括神经退行性疾病，如阿尔茨海默氏症、帕金森氏症和亨廷顿舞蹈症。在这里，我们演示了利用一些通用新方法模型的方法，包括高活性离子通道诱发坏死和蛋白质聚合诱导神经毒性，以监测和解剖神经退化的细胞分子机制。

峰值健康幼虫的制作四个，使三个牛顿线虫到线虫生长介质板，与E.Coli使用解剖立体显微镜。放置10和4个线虫，寄生酶板，并在20摄氏度的标准温度下生长。五天后，用1 mL和9缓冲液清洗盘子，用1.5mL管收集动物。

在30，000g下离心30秒，取出上一代。添加 0.5 mL 电镀溶液。电镀溶液储存在室温下。

漩涡和定期监测，直到它们都溶解。避免电镀时间超过五分钟。在10，000g下离心30秒，取出上一代。

用 1 mL 和 9 个缓冲器清洗调色板的两倍。在 10000 g 下离心 30 秒，然后取出上一液。洗涤后，将鸡蛋重新用200微升M9缓冲液中重新冷冻，并在34摄氏度的水浴中孵育25分钟。

在20摄氏度下保持一组单独的鸡蛋。移液 100 微升含有控制或热冲击处理鸡蛋，并把它们放在非种子 10 GN 板。每个盘子至少包含100到200个鸡蛋。

在20摄氏度下孵育卵子，直到孵化。使用和M9缓冲液清洗板，收集L1寿命和线虫在1.5毫升管。在10，000g下离心30秒。

卸下上一点并保留调色板。加入100微升20毫摩尔M9利文缓冲液，麻醉线虫。带10微升的M9悬浮液缓冲器，包含L1表，并安装在2%agar-ls点轻轻地放在样品顶部的盖玻片上。

使用 DIC 显微镜观察手表。通过计算具有线虫特征虚拟辅助外观的细胞，扫描630个受体神经元的退化。通过选择并转移15至20个L4幼虫，首先在细菌C和GM板上转移线虫。

孵育，让线虫在20摄氏度的标准温度下生长。在34摄氏度的培养箱中移动板，每天进行30分钟的预置。然后在20摄氏度的标准温度下返回预置线虫。

在 agar-ls 点的中心添加 10 微升 20 毫摩尔 M9 利文格维缓冲液滴。挑选各自的转基因线虫，并在M9利方滴中转移。每滴放置 20 到 30 个线虫。

轻轻地将盖板滑放在样品顶部。用指甲油密封盖滑，在整个成像过程中保持湿度。使用荧光显微镜与相机相结合，以 20 倍的放大率检测和捕获头部区域的研究图像。

监测七天的转基因线虫多巴胺神经细胞死亡。测量四天大转基因动物头部区域的神经元政治聚集体，表达与活人融合的240种。坏死细胞死亡诱发超活性离子通道是线虫中最主要的，以前有热休克预体蛋。

热休克预置，促进对7天大成人耳塞细胞死亡的预测，减少4天大成人头部区域Q40蛋白质聚集量。衰老是细胞和组织平衡的逐渐退化造成的损害的结果。因此，理解与年龄相关的神经元分解是重中之重。

提出的技术与遗传学和药理学屏幕相结合，可能导致正常细胞死亡调节剂与潜在的治疗兴趣的通知。