تنقية تقارب بروتين 6X-his-tagged باستخدام نظام كروماتوغرافيا سائل سريع البروتين

في هذه الدراسة ، نهدف إلى تنقية flap endonuclease 1 أو FEN1 ، وهو بروتين تكرار الحمض النووي الحاسم باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. سيسمح لنا ذلك بالتحقيق في وظيفة FEN1 في تكرار الحمض النووي وإصلاحه في بيئة محكومة في المختبر ، مما يعزز فهمنا لوظائفه وأدواره البيولوجية. تستخدم أنواع مختلفة من الكروماتوغرافيا لتنقية البروتينات المرتبطة بالحمض النووي ، وأكثرها شيوعا هو كروماتوغرافيا التقارب.

ضمن كروماتوغرافيا التقارب ، يعد كروماتوغرافيا التقارب المعدني المجمدة أحد أقوى الأدوات لتنقية البروتينات الموسومة به. نظرا لأن التفاعل بين علامة His-tagged وأيون المعدن ، عادة ما يكون النيكل أو الكوبالت قويا جدا. عاملان حاسمان لعملية تنقية البروتين الناجحة هما إنتاجية البروتين ونقاء البروتين.

اعتمادا على الاستخدام المقصود للبروتين ، قد يفضل إما المحصول أو النقاء على الآخر. تظهر النتائج التي توصلنا إليها أن اختيار الراتنج المناسب لتنقية البروتينات الموسومة قد يؤدي إلى نتائج مرغوبة لتطبيقات البروتين النهائية.