نسخة واحدة من تنقية الكروماتين لموضع الجين في Saccharomyces cerevisiae

النواة الحقيقية النواة مزدحمة للغاية بالعديد من العمليات الحيوية التي تحدث في وقت واحد. يتمثل نطاق بحثنا في فهم كيفية تنسيق كل هذه العمليات على جينوماتنا دون وقوع حوادث كبيرة من شأنها أن تؤدي إلى عدم الاستقرار الجيني والأمراض البشرية. يسمح لنا هذا البروتوكول بتنقية موضع معين من الجينوم في حالته الأصلية ، مما يسمح بالتوصيف التركيبي والوظيفي للمادة المعزولة ، مثل قياسات تفاعلات الحمض النووي للبروتين.

يتيح هذا البروتوكول مستوى هائلا من إثراء الموضع المستهدف ، والذي يتغلب على العديد من القيود الحالية لعزل الكروماتين الخاص بالموضع. لم يتم ربط المواد بشكل متبادل. يسمح ذلك أيضا بالعديد من التحليلات الوظيفية النهائية ، مثل النسخ في المختبر أو النسخ المتماثل في المختبر.

مكننا هذا البروتوكول من استئصال وتنقية أصول النسخ المتماثل المميزة من كروموسومات الخميرة ، مما سمح لنا بإجراء تحليل بروتيني وتحديد عوامل الكروماتين المتفاعلة ذات الأصل الجديد ، وبالتالي تطوير مجال البحث في تكرار الحمض النووي. يتيح هذا البروتوكول دراسات النسخ المتماثل في المختبر باستخدام مادة الأصل المنقاة لفحص حالات الكروماتين ، وتعديلات الهستون ، وإجراء التحليل الهيكلي على القوالب النووية الأصلية من الكروموسومات الداخلية ، مما يؤدي إلى تقدم أبحاث الكروماتين.