نموذج سرطان الجلد المستحث بالمواد الكيميائية باستخدام ثنائي ميثيل بنز [a] انثراسين و 12-O-Tetradecanoyl Phorbol-13-خلات (دمبا-طن سنويا)

هذا النموذج من سرطان الجلد خطوتين تمكن من دراسة دور الالتهاب في سرطان الجلد ويسمح لدراسة بدء الورم كعملية منفصلة عن تطور الورم. يتم حث تكوين الورم في هذا النموذج كيميائيًا ويسمح باستخدام سلالات خروج المغلوب لدراسة آثار العوامل البيئية أو المرشحين العلاجيين. النموذج مناسب تماما لدراسة دور الجهاز المناعي و الأوعية الدموية في السرطان.

وهو يدل على أمراض مماثلة لمرض سرطان الخلايا الحرشفية في المرضى البشر. على الرغم من أن هذا الأسلوب من السهل نسبيا على السلوك، توقيت دقيق أمر ضروري. من المهم أيضًا اتخاذ تدابير السلامة المناسبة عند التعامل مع DMBA ، وهو مادة مسرطنة.

قبل البدء في التجربة ، منزل أي فئران عدوانية يبلغ عمرها سبعة إلى تسعة أسابيع في أقفاص منفصلة لتجنب القتال والآفات الجلدية. بالنسبة لتحريض الورم الحليمي الجلدي، حلق أولاً الجلود الخلفية للحيوانات التجريبية ووزن الفئران بشكل فردي. بعد 48 ساعة من الحلاقة، استخدم ماصة لتطبيق 50 ميكروغرام من DMBA في 200 ميكرولتر من الأسيتون على المنطقة الحليقة لكل فأر مُلقن.

لتعزيز الجلد الحبتة، بعد سبعة أيام من تطبيق DMBA علاج الجلد مع خمسة ميكروغرام من TPA في 200 ميكرولتر من الأسيتون مرتين في الأسبوع حتى نهاية التجربة. فحص الحيوانات عن الحليمة وتصوير وتسجيل حجم كل الورم الحليمي الفردي على الخريطة كل أسبوع. وتعتبر كتلة واضحة أكبر من ملليمتر واحد في القطر الورم الحليمي إذا كان لا يزال أطول من أسبوع واحد.

عندما تصل استجابة الورم إلى الهضبة ، حصد عينة مناسبة من المواد من الحيوانات بعد 24 ساعة من تطبيق TPA الأخير وجمع قطع كاملة من الجلد من أجل التحليل المناعي. استخدم لكمة خزعة لجمع قطع الجلد من عينات الجلد من الورم الحليمي وعينات الجلد غير الحليمية للتعبير الجيني أو أنعيلة البروتين واستخدام مشرط لجمع قطع من الورم الحليمي والجلد غير الحليمي للتحليل الكيميائي المناعي. ثم جمع الجلد استنزاف العقد الليمفاوية وقطعة من الطحال لتحليل تدفق cytometric على النحو المرغوب فيه.

لوحظ اختلاف مهم إحصائيًا في وقت الفراغ من الورم الحليمي وفي عدد الورم الحليمي بين المجموعات التجريبية في نموذج ورم DMBA TPA. التحليلات النسيجية مناسبة لدراسة بنية الورم الحليمي، مورفولوجيا الجلد، أو تسلل الخلايا المناعية ذات الاهتمام. من الضروري تطبيق DMBA و TPA بالتساوي على الجلد وتطبيق TPA في فترات متسقة.

من المهم أيضا أن عد الحليم بانتظام. يمكن دراسة الآليات التي تؤثر على عدد ووقت تكوين الورم باستخدام طرق مختلفة، بما في ذلك الكيمياء المناعية، وقياس التدفق، وال PCR الكمي، وتحليل البروتين. هذه التقنية التقليدية يمكن تكييفها بسهولة وتطبيقها لدراسة آثار الجينات المختلفة، والعوامل البيئية، أو العلاجات ذات الاهتمام على بدء الورم والتقدم.

الحذر مطلوب عند تنفيذ هذه التقنية منذ DMBA مسرطنة والأسيتون يتبخر بسرعة. ويوصى قناع التنفس مناسبة واستخدام مجلس الوزراء تدفق.