هذا البروتوكول يحقق في الخصائص الميكانيكية biaxial للأعضاء التناسلية توضيح مساهمة من خلايا العضلات الملساء والمصفوفة السلبية. هذه التقنية تحافظ على هندسة الجهاز وخلية العضلات الملساء الأصلية إلى تفاعلات المصفوفة التي تسمح بإخضاع الجهاز لمجموعة فسيولوجية من الضغوط والتمدادات المحورية. قد يساعد التحقيق في وظيفة الجهاز ثنائي الاكسنجي تحت الأحمال ذات الصلة من الناحية الفسيولوجية في فهم أفضل لتحريات الأمراض التناسلية.
اختبار Biaxially عنق الرحم والمهبل يوفر نظرة ثاقبة في مجالات صحة المرأة والميكانيكا الحيوية. وتستخدم أساليب مماثلة لدراسة الأوعية الدموية والمريء والأمعاء الغليظة. عند العمل مع جهاز جديد، قد يستغرق وقتاً لوضع اللمسات الأخيرة على التفاصيل التقنية مثل كيفية خياطة الأنسجة على أفضل نحو أو كيفية تحديد طول التفريغ.
لجمع الجهاز التناسلي من الحيوان التجريبي، ضع الماوس على وسادة ماصة تحت مجهر تشريح واستخدام ملاقط ومقصات زاوية لرفع الجلد حول البطن. إجراء شق أولي في قاعدة البطن فوق عظم العانة الضحلة بما يكفي لعدم ثقب جدار العضلات البطن ومواصلة شق متفوقة نحو القفص الصدري وعميق من خلال عضلات البطن. بعد إزالة الدهون السطحية وقطع بعناية التكافل العانة، واستخدام ملاقط مستقيمة لفهم المثانة لخلق التوتر واستخدام تشريح حادة لفصل الأنسجة المحيطة من المهبل.
ثم قطع قاعدة الجهاز التناسلي لإزالة الأنسجة من تجويف الجسم. بعد تحديد حجم مناسب كانولا للنظام حصادها، جبل الجانب العنقي على جزء محول القوة من جهاز التكبل وجبل الطرف المقابل للجهاز على جزء ميكرومتر من الجهاز. ثم تشديد كلا طرفي مع الغرز.
للعثور على طول تفريغ الأنسجة التي شنت، تمتد أولا الجهاز بحيث الجدار ليس في التوتر. بالنسبة للمهبل، لاحظ الأخاديل على جدار المهبل. بالنسبة لعنق الرحم، يُقطَّع مباشرةً أسفل نقاط الحبر الموجودة فوق وتحت علامة عنق الرحم المركزية.
استخدام الفرجار لقياس طول النظام من الغرز إلى الغرز وزيادة ضغط نظام myograph من صفر إلى 10 ملليمترات من الزئبق في ملليمتر واحد من زيادات الزئبق. الضغط الذي لم يعد الجهاز ينهار يمكن تحديده كأكبر قفزة في القطر الخارجي عند ضغط معين. بعد تسجيل الضغط وقطره الخارجي، لاحظ هذه البيانات كنقطة أولى حيث لا ينهار الجهاز وصفر القوة.
للعثور على التجريبية في تمدد الجسم الحي، ضبط الجهاز إلى طول في الجسم الحي المقدر بينما في ضغط تفريغ وانقر فوق ابدأ لتقييم الضغط مقابل قيم القوة لقيم الضغط تتراوح من الضغط تفريغها إلى أقصى ضغط. ثم انقر فوق إيقاف وحفظ الملف. وبالنسبة للضغط القطر قبل التكييف، حدد الضغط على صفر ملليمتر من الزئبق، وطول إلى التجريبية في طول الجسم الحي، والتدرج إلى 1.5 ملليمتر من الزئبق في الثانية.
تشغيل تسلسل يأخذ الضغط من صفر ملليمتر من الزئبق إلى أقصى ضغط زائد الضغط المفرغ، وعقد لمدة 30 ثانية ويعود إلى صفر ملليمتر من الزئبق مع فترة إضافية 30 ثانية. بعد تكرار هذا التسلسل لما مجموعه خمس دورات، انقر فوق إيقاف وحفظ الملف. لطول القوة قبل تكييف، أدخل 1/3 من الضغط الأقصى بالإضافة إلى الضغط تفريغ لكلا الضغط مدخل ومنفذ وضبط الجهاز إلى ناقص 2٪ من طول في الجسم الحي.
انقر فوق بدء وضبط طول إلى زائد 2٪ في طول الجسم الحي والتراجع إلى ناقص 2٪ بمعدل 10 ميكرومتر في الثانية. كرر الملحق المحوري لمجموع خمس دورات قبل النقر فوق إيقاف وحفظ الملف. لاختبار قطر الضغط من طول في الجسم الحي، انقر فوق بدء وضبط الجهاز إلى طول في الجسم الحي، تعيين الضغط إلى صفر ملليمترات من الزئبق، وتعيين التدرج إلى 1.5 ملليمتر من الزئبق في الثانية.
زيادة الضغط من صفر ملليمترات من الزئبق إلى أقصى ضغط قبل خفض الضغط إلى أسفل إلى الصفر ملليمتر من الزئبق مع فترة عقد 20 ثانية. ثم كرر الاختبار لمدة خمس دورات قبل إيقاف النظام وحفظ البيانات. لاختبار طول القوة من 1/3 من الضغط الأقصى بالإضافة إلى الضغط المفرغ، تعيين الضغط إلى 1/3 من الضغط الأقصى بالإضافة إلى الضغط المفرغ وضبط الجهاز إلى ناقص 2٪ من طول في الجسم الحي.
بعد النقر على بداية، تمتد الجهاز إلى زائد 2٪ من طول في الجسم الحي والعودة إلى ناقص 2٪ من طول في الجسم الحي بمعدل 10 ميكرومتر في الثانية الواحدة. ثم كرر الاختبار لما مجموعه ثلاث دورات قبل إيقاف النظام وحفظ البيانات. بعد الاختبار الأخير، قم بإزالة وسيط اختبار KRB وغسل العضو بوسيلة KRB الخالية من الكالسيوم.
بعد الغسيل، احتضان الجهاز مع محلول KRB جديد خال من الكالسيوم مع اثنين من المليمولار EGTA لمدة 30 دقيقة قبل استبدال حل العلاج مع KRB خالية من الكالسيوم الطازجة. عند الانتهاء من اختبار نغمة القاعدية، للضغط القطر قبل تكييف، انقر فوق بدء وتعيين الضغط إلى صفر ملليمتر من الزئبق، وطول كما يقدر في طول الجسم الحي، والتدرج إلى 1.5 ملليمتر من الزئبق في الثانية. ابدأ تشغيل تسلسل يأخذ الضغط من صفر ملليمترات من الزئبق إلى أقصى ضغط والعودة إلى صفر ملليمتر من الزئبق.
كرر هذه العملية خلال خمس دورات مع فترة احتجاز 30 ثانية. لطول القوة قبل تكييف، وضبط الجهاز إلى طول في الجسم الحي وأدخل يدويا الضغط التفريغ لكلا الضغوط. انقر فوق بدء وتعيين التدرج إلى 1.5 ملليمتر من الزئبق والضغط على 1/3 من الحد الأقصى.
تمتد الجهاز تصل إلى زائد 2٪ والتراجع إلى ناقص 2٪ تمتد في 10 ميكرومتر في الثانية الواحدة وكرر الدورة لما مجموعه خمس مرات. لاختبار قطر الضغط ، مع الجهاز في ناقص 2 ٪ من 2 في المائة من تحديد تجريبي في طول الجسم الحي والضغط عند صفر ملليمتر من الزئبق ، انقر فوق بدء وزيادة الضغط من صفر ملليمترات من الزئبق إلى أقصى ضغط والعودة إلى صفر ملليمتر من الزئبق. عقد صفر ملليمتر من خطوة الزئبق لمدة 20 ثانية وتكرار الدورة خمس مرات.
لاختبار طول القوة، تعيين الضغط إلى ضغط الاسمية وضبط الجهاز إلى ناقص 2٪ من طول في الجسم الحي. تمتد الجهاز إلى زائد 2٪ من طول في الجسم الحي والعودة إلى ناقص 2٪ من طول في الجسم الحي بمعدل 10 ميكرومتر في الثانية. بعد ما مجموعه ثلاث دورات، حفظ البيانات وتكرار اختبار طول القوة ل 1/3 من أقصى ضغط، 2/3 من الضغط الأقصى، وعلى أقصى ضغط.
من أجل تحليل ناجح للخصائص الميكانيكية للأعضاء التناسلية الأنثوية ، لا بد من استئصال قرون الرحم إلى المهبل دون أي عيوب. اعتمادا على نوع الجهاز، وحجم قنية تختلف. يجب إجراء التكيب بحيث لا يمكن للجهاز التحرك أثناء التجربة ولكن دون إتلاف جدار العضو أثناء الإجراء.
يمكن استخدام نظام الضغط myograph لمراقبة الجوانب المختلفة للجهاز حيث يخضع للاختبار الميكانيكي ويمكن استخدام نظام الموجات فوق الصوتية لقياس سماكة الأعضاء في حالة التفريغ مع وبدون نغمة القاعدية. بعد الاختبار الميكانيكي، يمكن حساب معلّل المماس للاتجاهات الظرفية والمحورية. كل من اختبار لهجة القاعدية والاختبار السلبي تسفر عن الخصائص الميكانيكية الرئيسية من الجهاز التناسلي مع وبدون مساهمة منخلة من خلايا العضلات الملساء.
يتطلب التحجيم بين الأعضاء بعض التعديلات على البروتوكولات حيث أن عنق الرحم والمهبل يواجهان أحمالًا مختلفة في الجسم الحي. فمن الضروري أن تؤدي تشريح بسرعة للحفاظ على صلاحية خلايا العضلات الملساء ولكن بعناية لا ثقب الجهاز المطلوب. ويمكن إجراء تجارب زاوية الفتح التي تقيس السلالة المتبقية من الجهاز بعد إجراءات الاختبار الميكانيكية وكذلك مختلف التحاليل النسيجية والبيوكيميائية.
بعد تطورها والتحقيق في العضلات الملساء مساهمة القاعدية الخلية, هذه التقنية يسمح أيضا تقييم الجهاز التناسلي على نحو سلس العضلات أقصى استجابة انقبالي تحت الأحمال ذات الصلة من الناحية الفسيولوجية.
