يستخدم هذا البروتوكول التصوير فوق الصوتي عالي التردد لتقييم التغيرات في المثانة والمسالك البولية السفلية في الفئران. هذه التقنية تسمح بفحص طولي من المسالك البولية في الجسم الحي لقياسات التشريحية والفسيولوجية، وهي مكملة لتقنيات أخرى لقياس تدفق البول. القدرة على تقييم في vivo إبطال التغييرات في نماذج القوارض التي تُلخي جوانب أمراض المسالك البولية البشرية يمكن أن توفر نظرة ثاقبة لتطور المرض وفعالية العلاج.
تبدأ بتوصيل مسبار مع تردد مركز 30 ميغاهرتز إلى المنفذ النشط لنظام الموجات فوق الصوتية و الضبط المسبق للتطبيق على التصوير البطني. لتعزيز التباين الأمثل، اهز عامل تباين مناسب في خلاط دوامة لمدة 45 ثانية لتغليف الزبَل المصغّر في المحلّل. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم ، ضع 24 أسبوعًا من العمر C57 أسود 6 ماوس في وضعية supine على منصة ساخنة وحلق الشعر من البطن.
إزالة أي الشعر المتبقي مع كريم إزالة الشعر ووضع مسبار الموجات فوق الصوتية بالتوازي مع محور طويل من المثانة. ثم استخدام المتلاعب XY لتحريك الماوس حسب الضرورة، والحصول على صور محور طويلة وقصيرة من المثانة. قبل التصوير، قم بعمل شق في منتصف الطريق عبر الجلد وجدار البطن لفضح المثانة وملء قطعة من أنابيب البولي إيثيلين المرنة مع المالحة.
ثم توصيل حقنة مجهزة بإبرة قياس 27 إلى قطعة من الأنابيب وأدخل الإبرة في المثانة. لتأكيد الموضع الصحيح للإبرة، غرس 10 ميكرولترات من الملح في المثانة. استبدل الحقنة المالحة بحقنة تحتوي على عامل التباين المبدد وجمع صورة أخرى لوضع B للمثانة القسطرة.
لتسهيل قياس قطر مجرى البول ، تغرس 0.5 ملليلتر من الزببليات الصغيرة على مدى فترة ثلاث ثوان في المثانة حتى يحدث حدث التبول. لتسهيل قياس السرعة، تصحيح زاوية نافذة عينة دوبلر حتى يوازي تدفق البول وغرس بول ثانية من microbubbles في المثانة. ثم جمع صورة 3D من المثانة الكامل.
عندما يتم الحصول على جميع الصور، تتبع الخارج إلى حواف داخل جدار المثانة واستخدام أداة قياس المسافة الخطية لقياس المثانة. استخدام أداة الحجمي لتتبع داخل جدران المثانة لإنشاء كفاف. ويمكن بعد ذلك أن تنشأ ملامح متعددة من خلال سمك المثانة لحساب حجم المثانة في وضع الاكتساب 3D.
بالنسبة لحدث الإفراغ الأول، استخدم أداة المسافة الخطية لقياس حافة قطر مجرى البول إلى الحافة عند نقطة نافذة عينة السرعة في دوبلر. بالنسبة لحدث الإفراغ الأول، استخدم أداة السرعة المتكاملة لقياس سرعة مجرى البول. هنا، تظهر صور الموجات فوق الصوتية التمثيلية لمثانة الماوس المكتسبة دون عامل التباين.
جدار المثانة هو صدى ويمكن قياس سمك جدار المثانة باستخدام حزمة قياس البرمجيات. يمكن تقديم حجم المثانة وشكلها في 3D لتحديد حجم المثانة. هنا، تظهر صورة تمثيلية لمثانة الصدى المملوءة microbubble.
بعد انفجار الموجات فوق الصوتية منخفضة التردد، يتم تدمير الفقاعات وتصبح المثانة صدى عابرة قبل إصلاح فقاعات تؤكد الهيكل والمثانة. خلال حدث التبول ، يمكن الحصول على قطر تجويف مجرى البول أثناء التبول مع سرعة تدفق البول الذي يمر عبر تلك المنطقة من مجرى البول. باستخدام التصوير التباين، يمكن إجراء قياسات القطر في جميع أنحاء طول كامل مرئية من مجرى البول.
من هذه القياسات، يمكن إجراء المزيد من الحسابات لتقييم تدفق البول وامتثال المثانة. تنشيط عامل التباين بشكل صحيح ضروري لنجاح هذا البروتوكول. يمكننا إعادة بناء المسالك البولية القوارض مع التصوير بالرنين المغناطيسي والتصوير المقطعي microcomputed لتأكيد قياس تدفق الموجات فوق الصوتية، فضلا عن إدخال نماذج معقدة جديدة من ديناميات تدفق المسالك البولية وإعادة الإعمار 3D.
لقد بدأنا باستخدام هذه التقنية لفحص كميا نماذج من مرض المسالك البولية أقل، وآثار الشيخوخة، وفعالية العلاجات العلاجية على وظيفة البولية.