الكتاب يود أن ينوه دعم مالي من جامعة كاليفورنيا الجنوبية وقلب الوطنية والرئة، والدم معهد (NHLBI)، R00HL124279، وايلي واديت جائزة الابتكار واسعة ومؤسسة ويتير عدم-السرطان جائزة البحوث متعدية الجنسيات الممنوحة للمجموعة. يشكر المؤلفون المركز الميكروسكوب الإلكتروني وسليكيه، ومركز التميز في نانوبيوفيسيكس، ومركز التميز "التوصيف الجزيئي" ويشغل مركز تصوير في جامعة كاليفورنيا الجنوبية للمساعدة في الأجهزة مفيدة.

ملاحظة: قراءة العظمية الكاشفات واتبع جميع تدابير السلامة الكيميائية كما هو مطلوب من المؤسسات المحلية.
1-الإعداد للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs
<ol><li>
الإعداد للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 الببتيد
	<ol>
<li>تزن من 0.25 mmol من معتدلاً-L-ليز (بنك)-وانغ في سفينة رد فعل (RV). شطف في الجانب من RV مع 5 مل ديميثيلفوراميدي (DMF) في غطاء الأبخرة كيميائية.</li>
		<li>تحميل RV على المزج الآلي benchtop ببتيد. التحميل المسبق وتعبئتها من الأحماض الأمينية القنينات، ن '--سينفتينركيسفقرلاسيريتس--ج'، من C إلى N-المحطة. وتشمل قنينة فارغة في نهاية الخطوة النهائية deprotection. ملاحظة: ببتيد سارعت بالتسلسل، ن '--كنسييرسكقفلرستريفرساتيك--ج'، يمكن أيضا توليفها باستخدام البروتوكول نفسه.</li>
		<li>بمجرد الانتهاء من تجميع نقل الببتيدات راتنج من RV إلى القنينة التﻷلؤ مع الميثانول مل 2-3 حتى يتم نقل كافة الراتنجات. بعد الراتنج غرقت إلى الأسفل، إزالة الميثانول طافية وتتبخر المتبقية حتى الجاف. الفراغ الجافة ح 2 إضافية، أو بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة.</li>
		<li>جعل الحل انشقاق 12 مل تحتوي على حمض:ethanedithiol:water:triisopropylsilane (تفا) تريفلوراسيتيك في 94:2.5:2.5:1 المجلد % في غطاء الأبخرة كيميائية. دوامة الانقسام والحل للتأكد من أنها مختلطة بالتساوي. تنبيه: لأن ترييسوبروبيلسيلاني واثانيديثيول حساسة للهواء، الأرجون تطهير الأسهم قارورة ترييسوبروبيلسيلاني واثانيديثيول لمدة 1 دقيقة قبل وضعها مرة أخرى.</li>
		<li>وضع السفينة التوليف (SV) على شاكر ذراع واسطة لقط بالقرب من الأسفل نصف SV. نقل الراتنج الببتيد إلى SV مع 2 مل من محلول الانقسام حتى يتم نقل كافة الببتيد-الراتنجات.</li>
		<li>أغسل جانبي SV مع 3 مل حل الانقسام. قم بإغلاق غطاء SV وهزه في الدقيقة ذبذبات 300 ح 4.</li>
		<li>تزن بأنبوب الطرد مركزي فارغة 50 مل. السجل الشامل.</li>
		<li>بعد ح 4، استنزاف الحل الببتيد ملصوق من SV في أنبوب 50 مل أجهزة الطرد المركزي. شطف SV عدة مرات مع حل الانقسام المتبقية.</li>
		<li>تتبخر الحل الببتيد ملصوق مع النيتروجين حتى يكون هناك أقل من 4 مل المتبقية في الأنبوب الطرد المركزي.</li>
		<li>إضافة مل 36 المثلج خماسي البروم ثنائي الفينيل في حل المشقوق الببتيد.</li>
		<li>دوامة الحل حتى أنه تماما اللون الأبيض أو الأصفر. الطرد المركزي في 3,000 س ز لمدة 5 دقائق في 4 درجات مئوية، وصب المادة طافية.</li>
		<li>إضافة 40 مل الاثير المثلج للأنبوب. دوامة و sonicate مرة أخرى. كرر عملية الطرد المركزي. صب المادة طافية.</li>
		<li>جاف بيليه السلطة الفلسطينية النفط الخام مع تطهير غاز النيتروجين حتى تبخرت الاثير هو واضح.</li>
		<li>إضافة 20 مل المقطر مزدوجة والمياه، ودوامه، و sonicate حتى يذوب الببتيد تماما في الحل.</li>
		<li>تجميد الحل وليوفيليزي حتى الجاف.</li>
		<li>بمجرد الببتيد هو المجففة، تزن خارج كتلة أنبوب الطرد المركزي التي تتضمن الببتيد الخام. حل الببتيد الخام في المياه 5 ملغ/مل.</li>
		<li>حل 25 ملغ من النفط الخام الببتيد العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 في 5 مل من الماء المقطر مزدوجة لجعل مجموع تركيز 5 ملغ/مل. تنقية الببتيد العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 النفط الخام من كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ([هبلك]) باستخدام 0.1% تفا في الماء (المذيب A) و 0.1% تفا في الاسيتو الانيتريل (المذيب ب) كمراحل المتنقلة على عمود عكس مرحلة C8. حقن 5 مل الببتيد [هبلك]. ملاحظة: المرحلة الأولى متنقلة تتألف من المذيبات 100% ألف بمعدل تدفق 9.0 مل/دقيقة إنقاص المذيبات ببطء إلى 30 في المائة في 27 دقيقة وعقد في هذا التكوين للحد الأدنى 3 عودة المتدرجة للمذيبات 100% 3 دقيقة وعقد في هذا التشكيل لمدة 1 دقيقة لإعطاء أكثر إجمالي وقت تشغيل من 34 دقيقة تبقى عمود درجة حرارة 55 درجة مئوية. استخدام وضع مصدر أيون إيجابية للتحليل. يمكن استخدام حمض الفورميك بدلاً من تفا، إذا تفا حمضية جداً للعمود [هبلك]. من المستحسن لا تتجاوز سرعة المنحدر تشكيل المذيبات العضوية 2%/min لفصل أفضل.</li>
		<li>تحليل كل جزء باستخدام الليزر ساعد مصفوفة الامتزاز/التأين (استخدام) الكتلي للمنتج المتوقع m/z في 2,890. ملاحظة: حل حمض α-سينو-4-هيدروكسيسيناميك في 1 ملغ/مل في المياه الاسيتو الانيتريل (المجلد 50: 50 ٪) كحل المصفوفة. بقعة 0.75 ميليلتر من محلول مصفوفة على استخدام لوحة، تليها ميليلتر 0.75 لكل جزء. القيام التحليل باستخدام طريقة أيون انعكاسا إيجابيا في نطاق شامل من 500-5,000 دا.</li>
		<li>الجمع بين أجزاء المنتج، ضربة قبالة الاسيتو الانيتريل، تجميد، وليوفيليزي المنقي الببتيدات حتى الجافة.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
إعداد السلطة الفلسطينية العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1
	<ol>
<li>إعداد من فائض مولى 1.1 من 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-ن-[amino(polyethylene glycol)-2000 [دسب-شماعة (2000)-ماليميدي إلى الببتيد في قنينات التﻷلؤ منفصلة. يحل كل من المركبات في الماء المقطر مزدوجة لجعل ~ 15 ملغ/مل. Sonicate لمدة 15 دقيقة، أو حتى كل الحلول واضحة تماما. ملاحظة: دسب-شماعة (2000)-Cy5 يتم تصنيعه باستخدام البروتوكول نفسه مع دسب-شماعة (2000)--أمين و Cy5 إستر فونكتيوناليزيد ن-هيدروكسيسوكسينيميدي (NHS)، باستثناء الخطوة 1.2.3، حيث يتم ضبط الأس الهيدروجيني للحل إلى 8.5.</li>
		<li>إضافة دسب-شماعة (2000)-ماليميدي الحل إلى الحل الببتيد. دوامة و sonicate.</li>
		<li>إضافة 1 "م هيدروكسيد الصوديوم" dropwise (1 ميليلتر) في وقت واحد حتى الرقم الهيدروجيني للحل هو 7.</li>
		<li>الحل إزالة النيتروجين للحد الأدنى 5 إثارة الحل بين عشية وضحاها.</li>
		<li>تجميد الحل وليوفيليزي حتى الجاف.</li>
		<li>مرة واحدة هو المنتج الخام المجففة، حل الصلبة في الماء 5 ملغ/مل.</li>
		<li>تنقية مع [هبلك] كما هو موضح أعلاه. ملاحظة: الببتيد أونكونجوجاتيد و DSPE-PEG(2000) أن الوت بين 15 30 في المائة تركيز العضوية (المجلد %)، بينما دسب-شماعة المتقارن (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 ينبغي أن الوت بين 40-50% تركيز العضوية.</li>
		<li>تحليل كل جزء باستخدام استخدام الطيف الكتلي للمقابلة م/ز. دسب-شماعة (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 ينبغي أن يكون ذروة واسعة m/z في 5,760. ملاحظة: حمض 2، 5-ديهيدروكسيبينزويك أفضل المصفوفة لشماعة دسب (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 باستخدام.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
الجمعية العامة للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs
	<ol>
<li>حل 1.75 mg PAs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 مع 3 مل الميثانول في قنينة 1-أرميني. Sonicate حتى يذوب العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 "السلطة الفلسطينية" تماما. ملاحظة: يمكن إدراج أمفيفيليس Cy5 بنسبة مولى 10:90 "السلطة الفلسطينية" العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 للتطبيقات التصوير.</li>
		<li>يتبخر الميثانول تحت النيتروجين في حركة دائرية أثناء الشطف الميثانول المتبقية قبالة الجانب القنينة حتى يتم تشكيل فيلم موحدة في أسفل القنينة. الفراغ الجافة الفيلم بين عشية وضحاها.</li>
		<li>هيدرات الفيلم مع 3 مل من المخزن المؤقت للمياه أو الفوسفات المالحة (PBS) جعل حل 100 ميكرون من العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs. بلطف من دوامة و sonicate الحل حتى واضحة. احتضان عند 80 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ملاحظة: درجة حرارة مرتفعة قد ثبت للتعجيل بعملية التجميع الذاتي ويسمح المكون الببتيد لتشكيل هيكل الثانوية الأكثر استقرارا، بينما خفض تركيز (CMC) مذيل الحرجة42،43.</li>
		<li>بارد التشتت الناتج إلى درجة حرارة الغرفة.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2-وصف العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs
<ol><li>
تشتت الضوء الحيوي (DLS) وزيتا المحتملة
	<ol>
<li>المكان 100 ميكرومتر بالعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 "أم" أو أم سارعت في ومبومو وفقا لتعليمات الصك المحتمل DLS أو زيتا. ملاحظة: دائرة الأراضي والمساحة وزيتا الترعة المحتملة يمكن أن تختلف استناداً إلى الإرشادات في الصك.</li>
		<li>حجته الصك إلى درجة حرارة الغرفة. قياس حجم وتهمة السطحية بام.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
مجهر إلكتروني (TEM)
	<ol>
<li>إضافة ميليلتر 7 من 50 ميكرومتر علقت بالعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 أم أو أم سارعت إلى شبكة ال داخل الملاقط إغلاق الذاتي للحد الأدنى 5 الفتيل بعيداً الحبرية مع مسح مهمة حساسة.</li>
		<li>إضافة 7 ميليلتر من الماء لغسل الشبكة. فتيلة بعيداً الحبرية.</li>
		<li>إضافة ميليلتر 7 1 wt % حمض فوسفوتونجستيك للحد الأدنى 2 الفتيل بعيداً الحبرية. كرر الخطوة 2.2.2.</li>
		<li>الجاف للشبكة تيم قبل تحليل ال.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
مطيافية تلوانيه دائرية (CD)
	<ol>
<li>قم بتشغيل النيتروجين لمدة 5-10 دقائق قبل استخدامها للصك.</li>
		<li>ضع 300 ميليلتر من فارغة (الماء أو برنامج تلفزيوني) في ومبومو.</li>
		<li>قياس الأطياف في شمال البحر الأبيض المتوسط 190-265، 0.2 مم طول المسار مع وقت تكامل s 1، وشمال البحر الأبيض المتوسط 1 عرض النطاق ترددي في درجة حرارة الغرفة. جمع 3 وإنشاء نسخ متماثلة.</li>
		<li>قياس 100 ميكرومتر العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 الببتيد، "أم" العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1، سارعت الببتيد، وسارعت بام تحت نفس الظروف الموصوفة في الخطوة 2.3.3. استقطاع من الفراغ.</li>
		<li>تناسب البيانات باستخدام استيفاء خطي بوليليسيني أساس الأطياف.</li>
		<li>إيقاف تشغيل الأداة. انتظر 10 دقائق قبل إيقاف تشغيل النيتروجين.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3-تحليل في المختبر للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs
<ol><li>
توافق مع الحياة في المختبر
	<ol>
<li>الثقافة وتوسيع وحيدات موريني WEHI 274.1 في "تعديل النسر المتوسطة" دولبيكو وتستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين (FBS)، 1% البنسلين-ستربتوميسين، و 0.05 ملم 2-mercaptoethanol في 37 درجة مئوية تحت 5% CO2 إلى الممر 5. ملاحظة: WEHI 274.1 هي تعليق الخلايا. الإعلام عند استزراع، ينبغي أن تعاد كل 2-3 أيام.</li>
		<li>بيبيت وحيدات في وسائل الإعلام في أنبوب الطرد مركزي عقيمة 50 مل. أجهزة الطرد المركزي في 300 x ز لمدة 5 دقائق في 4 درجات مئوية.</li>
		<li>نضح وسائط الإعلام القديمة وريسوسبيند في 10 مل وسائط جديدة في أنبوب الطرد المركزي. المزيج ببطء حتى الخلايا وتوزع بالتساوي في وسائل الإعلام. عد الخلايا باستخدام التلوين تريبان الأزرق وهيموسيتوميتير.</li>
		<li>تمييع الخلايا مثل أن هناك وحيدات 4,000 كل ميليلتر 90 من وسائل الإعلام كل بئر. إضافة ميليلتر 90 من الخلايا في آبار صفيحة 96-جيدا. احتضانها ح 24. ملاحظة: تجنب استخدام الآبار على الحافة الخارجية اللوحة لتجنب الخلافات في التبخر والتغيرات الحرارية في اللوحة. سد الآبار الخارجي مع 100 ميليلتر PBS.</li>
		<li>حل µmol 0.15 الببتيد العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 أو بالعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 "أم"، سارعت الببتيد أو أم سارعت في 150 ميليلتر PBS في أنابيب ميكروسينتريفوجي منفصلة، والتعقيم. أداء تمييع المسلسل جعل ميليلتر 65 من 1 و 10 و 100 ميكرومتر لكل عينة.</li>
		<li>إضافة 10 ميليلتر PBS كل التركيز في الآبار التي تحتوي على WEHI 274.1 (الحجم الإجمالي: 100 ميليلتر الواحد جيدا، 6 خطوط الآبار الإجمالية 96). احتضانها ح 72.</li>
		<li>إضافة 10 ميليلتر (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium) (MTS) في كل بئر. احتضانها ح 1.</li>
		<li>تحليل امتصاص استخدام قارئ لوحة في 490 نيوتن متر أو استناداً إلى إرشادات الشركة المصنعة.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
في المختبر ملزمة مذيل
	<ol>
<li>البذور 500,000 وحيدات في كل بئر من لوحة 6-جيدا في 2 مل وسائط التي تحتوي على 100 ميكرومتر "أم" العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 المسمى Cy5 (نسبة 10:90 المولى دسب-شماعة (2000)-Cy5 و "السلطة الفلسطينية" العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1). احتضانها ح 1.</li>
		<li>جمع WEHI 274.1 بالطرد المركزي على 300 غرام x لمدة 5 دقائق في 4 درجات مئوية. نضح وسائط الإعلام.</li>
		<li>ريسوسبيند وغسل الخلايا في 2 مل برنامج تلفزيوني. أجهزة الطرد المركزي في 300 x ز لمدة 5 دقائق في 4 درجات مئوية. نضح في برنامج تلفزيوني. كرر عملية الغسيل مع 2 مل برنامج تلفزيوني. نضح في برنامج تلفزيوني.</li>
		<li>إضافة 2 مل من البرد بارافورمالدهيد 4% إصلاح الخلايا. احتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق.</li>
		<li>بيبيت الخلايا الثابتة على ساترة زجاجية معقمة داخل آبار لوحة 6-جيدا. الطرد المركزي في 400 غرام x لمدة 5 دقائق.</li>
		<li>قم بإزالة بارافورمالدهيد. غسل وشطف مع 2 مل برنامج تلفزيوني مرة واحدة. ريسوسبيند مع 1 مل PB ملاحظة: عند الشطف، تجنب تعطيل الخلايا على ساترة.</li>
		<li>وضع 10 ميليلتر من والغليسيرول 90% في برنامج تلفزيوني على شريحة. استخدام إبرة وملقط لالتقاط ساترة. جاف على حافة ساترة. بلطف ضع ساترة إلى شريحة facedown.</li>
		<li>ختم بلطف على حافة ساترة مع طلاء الأظافر واضحة. ضع في الثلاجة حتى جاهزة للتصوير.</li>
		<li>استخدام ليزر [كنفوكل] المسح مجهر (كلسم) المثبتة مع أشعة الليزر ل Cy5 في λالإثارة = 650 نانومتر.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 هي منصة تصوير جزيئي واعدة، تتألف من الببتيد استهداف ماء وذيل مسعور الذي يدفع بطبيعة نانوحبيبات تجميعها ذاتيا. يمكن إعداد هذا مذيل استهداف الوحيدات بتوليف بسيطة وخطوات تنقية العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 الببتيد ودسب-شماعة (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1. وقد PAMs العديد من الخصائص المفيدة في فيفو التصوير الجزيئي مثل على التجميع الذاتي تحت ظروف معتدلة وتحلل الأحيائي الجوهرية والتنوع الهيكلي والكيميائية مما يسمح لإدراج أخرى مويتيس التصوير أو استهداف الببتيدات الإدلاء بشكل انتقائي لموقع معين من الفائدة. يمكن ضبطها على حجم الجسيمات، والشكل، وتكوين بتغيير الببتيد، ذيل مسعور، أو تركيز مذيل، السماح للخواص الكيميائية والفيزيائية الأمثل لمجموعة متنوعة من التطبيقات22،33.
تجدر الإشارة إلى عدد قليل من القيود لهذا البروتوكول. أولاً، منذ PAMs تدفعها التفاعلات مسعور، من الضروري لتشييد الببتيدات الاستهداف التي ماء، مما يسمح لمجموعة استهداف ستعرض على سطح مذيل. إذا كان التسلسل الببتيد مسعور، يمكن أن تستوعب إضافة الأحماض الأمينية ماء واحد أو اثنين في المحطة ج، ولكن إضافة الأحماض الأمينية يمكن أن تؤثر على هيكل الببتيد الثانوي داخل مذيل التالي تغيير الخصائص الببتيد في حالته الأصلية في44،البروتين45. ثانيا، في تركيزات منخفضة، PAMs لها الاستقرار الفقراء في البيئات المائية كما أنها تعتمد اعتماداً كبيرا على اللجنة العسكرية المركزية، أن تركيز الحد الأدنى اللازمة لتقييم الأداء لتشكيل هيكل micellar من46. فيما يلي اللجنة العسكرية المركزية، مذيل يفكك للفرد السلطة الفلسطينية مونومرات، ويحد من مذيل بمثابة ناقل وتفريغ مخدرات في موقع معين47. للتخفيف من حدة هذا العيب، يمكن تقليل المركزية بزيادة طول سلسلة من ال48،ذيل مسعور49. وأخيراً، لا ينصح بتخزين طويل الأجل PAMs في حل كهيكل السلطة الفلسطينية الثانوية يمكن أن تتغير مع مرور الوقت، مما يؤثر على هيكل ميسيلار والاستقرار، فضلا عن الكفاءة في يجند ملزمة26.
وخلاصة القول، هذا البروتوكول يوضح استراتيجية تستند إلى مذيل لطب النانوي ببتيد قوية وتجميعها ذاتيا للتصوير تصلب الشرايين. PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 متوافق حيويا والقابلة للتحلل، وغير سام كمكونات مذيل مستوحاة من العناصر الذاتية للجسم. الأهم من ذلك، قد PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 ربط تفضيلية وحيدات، التي تزيد تناسبياً إلى تطور اللوحة، تيسير اتباع نهج غير الغازية للتفريق بين المراحل لويحات تصلب الشرايين. بسبب نمطية لهذا النظام الأساسي، يمكن إدراج PAMs المداواة، إضافية تستهدف الببتيدات والتصوير مويتيس، والأحماض النووية. ومن ثم، ونظرا لهذه القدرات الحيوية لهذه المذيلات متعددة الوظائف، نعتقد أن هذه الجسيمات تبشر كبيرة للترجمة السريرية في تصلب الشرايين وغيرها من الأمراض.

أمراض القلب والأوعية الدموية تبقى إلى أن الأسباب الرئيسية للوفاة على الصعيد العالمي مع حوالي1من 17.3 مليون حالة وفاة في جميع أنحاء العالم. أمراض القلب والأوعية الدموية هي أسهم بتصلب الشرايين، شرط فيها لويحات تتراكم في الشرايين، مما يمنع الدم وتدفق الأكسجين إلى خلايا الجسم2،3. ويشمل تطور تصلب الشرايين تصلب الشرايين وسماكة الاستجابة الالتهابية، والايض الدهني غير النظامية، وتراكم البلاك، مما يؤدي إلى اللوحة تمزق واحتشاء عضلة القلب4،5. خلايا بطانية التعبير عن جزيئات السيتوكينات والالتصاق، التي تشمل العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 التي تربط لمستقبلات تشيموكيني ج-C (CCR2) الموجودة على سطح وحيدات6،،من78. تحويل الكولسترول المؤكسد وحيدات إلى الضامة خلال المرحلة المبكرة من تشكيل اللوحة، مما يضاعف الاستجابة الالتهابية في المنطقة ويؤدي إلى إصابة الأنسجة وتشكيل لويحات غير مستقرة أو الضعيفة9، 10.
عادة، يتم تقييم تصلب الشرايين بتقييم لومينال تضيق التشريحية التصوير باستخدام الموجات فوق الصوتية أو تصوير الأوعية11،12. ومع ذلك، هذه الأساليب يمكن فقط تحديد تضييق شديد للجدار الشرياني وليس في مرحلة مبكرة من تصلب الشرايين، كما يؤدي النمو اللوحة الأولى يعيد البناء الشرياني الحفاظ على حجم الشريان والدم تدفق معدل12،13، 14. ولذلك، أونديريبريسينت أنجيوجرامس انتشار تصلب الشرايين. بالإضافة إلى ذلك، حسبت موسع تقنيات التصوير مثل انبعاث فوتون واحد التصوير المقطعي والتصوير المقطعي بالبوزيترون، والتصوير بالرنين المغناطيسي مؤخرا قد استخدمت لتوصيف مورفولوجيا اللوحة كما أنها يمكن أن توفر التفاصيل الأولية و توصيف لويحات. ومع ذلك، هذه الطرائق غالباً محدودة بسبب الافتقار إلى الحساسية، القرار المكانية، أو تتطلب استخدام الإشعاع المؤين، مما يجعل التصوير البلاك التقدم في مختلف مراحل أكثر تحديا1615،، 17. ويظل نظام تصوير للتسليم أن تحدد على وجه التحديد لويحات في مراحل مختلفة من تصلب الشرايين توضع.
جسيمات نانوية أظهرت أن تكون منصة ناشئة في فيفو البلاك الاستهداف والتشخيص18،19،،من2021. على وجه الخصوص، PAMs مفيدة نظراً لتنوع المواد الكيميائية والقدرة على استيعاب مجموعة متنوعة من مويتيس والتراكيب، والأحجام، والأشكال والسطحية الروغان22. أمفيفيليس الببتيد (PAs) تتكون من ماء، الببتيد "هيدجروب" يعلق على ذيل مسعور، التي عادة ما تكون الدهون؛ هذا الهيكل amphiphilic يضفي قدرات ذاتية التركيب ويسمح لعرض متعددي الببتيدات على سطح الجسيمات22،،من2324. هيادجروبس الببتيد يمكن أن تؤثر على شكل الجسيمات عن طريق الطي والربط بين الببتيدات25الهيدروجين. أظهرت الببتيدات أمثال من خلال التفاعل β-ورقة لتشكيل المذيلات ممدود، بينما يمكن أن تشكل تأكيد α-حلزونية كلا المذيلات كروية وطوله22،،من2324، 25،،من2627. يمكن وضع linkers البولي إثيلين غليكول (شماعة) أن الدرع بتهمة الببتيد السطحية بين الببتيد ماء وذيل مسعور PAMs، تعزيز توافر نانوحبيبات في الدوران الجهازي28، 29 , 30 , 31-PAMs أيضا مفيدة لأنها متوافق حيويا وقد ثبت أن لديها مجموعة واسعة من التطبيقات32،33. قابلية الذوبان في الماء من المذيلات يوفر ميزة على سائر الأنظمة المستندة إلى نانوحبيبات مثل بعض الجسيمات النانوية البوليمرية التي هي غير قابلة للذوبان في الماء، ويجب أن تكون قد علقت في سولوبيليزيرس لحقن34. بالإضافة إلى ذلك، يجعل القدرة على خلق PAMs أن تفكيك في الاستجابة لمحفزات محددة PAMs مرشح جذابة ل توصيل العقاقير الخاضعة للمراقبة داخل الخلايا35.
ملزمة لمستقبلات CCR2 وتتراكم في قوس الاورطي، وضعت PAMs سابقا الوحيدات تستهدف رصد المراحل المختلفة للآفات تصلب الشرايين في الشريان الاورطي9. في الفئران-/- الذين يزيد تراكم الوحيدات تناسبياً إلى اللوحة تقدم36. وعلاوة على ذلك، وجد أن المرضى الذين يعانون من لويحات المعرضة لتمزق، والمرحلة المتأخرة تحتوي على كميات أعلى من وحيدات37. ولذلك، بتعديل PAMs لإدماج العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 مفيد لأنه يسمح لقدر أكبر من الدقة الاستهداف والتفريق بين الآفات المبكرة والمتأخرة من مرحلة تصلب الشرايين. كما أن هذه الدراسات دليلاً على مفهوم التحقق من أن PAMs أمنا بما يكفي لاستخدامها بريكلينيكالي ويتم مسح رينالى38. وحيدات والتهاب مميزة للأمراض الأخرى، PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 يكون يمكن أن تستخدم للتطبيقات التشخيصية والعلاجية في أمراض أخرى وراء تصلب الشرايين8،،من3940 , 41.
هنا، نحن تقرير تلفيق PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 قابلة الغاية وتجميعها ذاتيا التي أظهرت الحجم الأمثل للجسيمات وتهمة السطحية، والاستهداف الانتقائي وحيدات لتطبيقات الصور المحسنة في تصلب الشرايين.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="834">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">1,2-ethanedithiol</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">E0032</td>
			<td style="width:259px;">for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10 mL disposable serological pipets</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89130-898</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">15 mL centrifuge tubes, polypropylene</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89401-566</td>
			<td>for various applications</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">2,5-dihydroxybenzoic acid, 99%</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>AC165200050</td>
			<td>for MALDI</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">25 mL disposable serological pipets</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89130-900</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">2-Mercaptoethanol, 50 mM</td>
			<td style="width:147px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">31350010</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">5 mL disposable serological pipets</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89130-896</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">50 mL centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-658</td>
			<td>for various applications</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">75 cm2 culture flask</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">13-680-65</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">75 mL reaction vessel</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>3000005</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">96-wells cell culture plate</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>40101-346</td>
			<td>for MTS assay</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Acetonitrile, HPLC grade</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>A998SK-4</td>
			<td>for HPLC purification</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Borosilicate glass, 1 dram</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>66011-041</td>
			<td>for PAM synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Borosillicate glass pipet, Long tips</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>14673-043</td>
			<td>for various applications</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Coverslip, 0.16-0.19 mm, 22 x 22 mm</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>12-542B</td>
			<td>for confocal microscopy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Cy5 amine</td>
			<td style="width:147px;">Abcam</td>
			<td style="width:119px;">ab146463</td>
			<td>for peptide conjugation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Diethyl ether, ACS grade</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">E138-1</td>
			<td>for peptide precipitation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Disposable syringes, 20 mL</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>14-817-54</td>
			<td>for HPLC purification</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Double neubauer ruled hemocytometer</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>63510-13</td>
			<td>for cell counting</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">DSPE-PEG(2000) amine</td>
			<td>Avanti</td>
			<td style="width:119px;">880128P</td>
			<td>for peptide conjugation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">DSPE-PEG(2000) maleimide</td>
			<td>Avanti</td>
			<td style="width:119px;">880126P</td>
			<td>for peptide conjugation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">DSPE-PEG(2000)-NHS ester&#160;</td>
			<td>Nanocs</td>
			<td>PG2-DSNS-10K</td>
			<td>for conjugation to Cy5</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">Dulbecco&#39;s modified eagle medium-high glucose</td>
			<td style="width:147px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D5796-500ML</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fetal bovine serum, qualified, heat inactivated</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>10438026</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Ala-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-A</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;">PS3-H5-RBF</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Asn(Trt)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;">PS3-H5-NT</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Cys(Trt)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;">PS3-H5-CT</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Gln(Trt)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-QT</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Ile-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;">PS3-H5-I</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Leu-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-L</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Lys(Boc)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-KBC</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Phe-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;">PS3-H5-F</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Ser(tBu)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;">PS3-H5-SB</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Thr(tBu)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-TB</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-YB</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fmoc-L-Val-OH /HBTU</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>PS3-H5-V</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Fmoc-Lys(Boc)-wang resin, 100-200 mesh</td>
			<td>Novabiochem</td>
			<td style="width:119px;">856013</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Formic acid, optima LC/MS grade</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>A117-50</td>
			<td>for HPLC purification</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Glycerol</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">M152-1L</td>
			<td>for confocal microscopy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hand tally counter</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>S90189</td>
			<td>for cell counting</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Magnetic stir bars, egg-shaped</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>58949-006</td>
			<td>for peptide conjugation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Methanol, ACS certified</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>A412-4</td>
			<td>for PAM synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">MTS cell proliferation colorimetric assay kit</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">10191-104</td>
			<td>for MTS assay</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">N,N-Dimethylformamide, sequencing grade</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>BP1160-4</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">N-Methylmorpholine</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td>S-1L-NMM</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AC416780250</td>
			<td>for fixing cells</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PBS, pH 7.4</td>
			<td style="width:147px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>10010049</td>
			<td>for various applications</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Penicillin/streptomycin, 10,000 U/mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Peptide synthesis vessel, 25 mL&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">CG186011</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Phosphotungstic acid&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">A248-25</td>
			<td>for TEM</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Piperidine</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td>P1146-2.5LTGL</td>
			<td>for peptide synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Plain glass microscope slide 75 x 25 mm</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>12-550-A3</td>
			<td>for confocal microscopy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reagent reservoirs, sterile&#160;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95128093</td>
			<td>for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Self-closing tweezer</td>
			<td style="width:147px;">TedPella</td>
			<td style="width:119px;">515</td>
			<td>for TEM</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TEM support film</td>
			<td style="width:147px;">TedPella</td>
			<td style="width:119px;">01814F</td>
			<td>for TEM</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Trifluoroacetic acid&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td>BP618-500</td>
			<td>for peptide cleavage and HPLC purification</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Triisopropylsilane</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>TCT1533-5ml</td>
			<td>for peptide cleavage</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypan blue solution, 0.4%</td>
			<td style="width:147px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">15250061</td>
			<td>for cell counting</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tweezer, general purpose-serrated</td>
			<td style="width:147px;">VWR</td>
			<td>231-SA-SE</td>
			<td>for confocal microscopy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">WEHI-274.1</td>
			<td>ATCC</td>
			<td style="width:119px;">ATCC&#160;CRL-1679</td>
			<td>murine monocyte</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">automated benchtop peptide synthesizer</td>
			<td>Protein Technologies</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:259px;">PS3 Benchtop Peptide Synthesizer</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">&#945;- cyano- 4- hydroxycinnamic acid, 99%</td>
			<td style="width:147px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>476870-2G</td>
			<td>for MALDI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of monocyte-targeting peptide amphiphile micelles for imaging of atherosclerosis

تصلب الشرايين هو مساهم رئيسي في أمراض القلب والشرايين، السبب الرئيسي للوفاة في العالم، الذي يدعى حياة 17.3 مليون سنوياً. تصلب الشرايين هو أيضا السبب الرئيسي للموت المفاجئ واحتشاء عضلة القلب، بتحريض من لويحات غير المستقرة التي تمزق وأوككلودي الأوعية الدموية دون سابق إنذار. التصوير الطرائق الحالية لا يمكن التفريق بين لويحات المستقرة وغير المستقرة التي تمزق. الببتيد أمفيفيليس المذيلات (PAMs) يمكن التغلب على هذا العيب كما أنها يمكن تعديلها مع مجموعة متنوعة من استهداف مويتيس التي تربط على وجه التحديد للأنسجة المريضة. أظهرت وحيدات لتكون علامات مبكرة لتصلّب الشرايين، بينما يرتبط تراكم كبير من وحيدات مع لويحات المعرضة للتمزق. ومن ثم، يمكن استخدام الجسيمات النانوية التي يمكن أن تستهدف وحيدات لتميز مراحل مختلفة من تصلب الشرايين. تحقيقا لهذه الغاية، هنا، يمكننا وصف بروتوكول لإعداد الوحيدات-استهداف PAMs (الوحيدات chemoattractant البروتين-1 (العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1) PAMs). PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 يتم تجميعها ذاتيا من خلال التوليف تحت ظروف معتدلة بشكل جسيمات نانوية من 15 نانومتر في قطر بالقرب من تهمة السطحية محايدة. في المختبر، PAMs تم العثور على أن يكون متوافق حيويا وكان تقارب ملزم عالية وحيدات. إظهار الأساليب الموصوفة هنا وعد لمجموعة واسعة من التطبيقات في تصلب الشرايين، فضلا عن الأمراض الالتهابية الأخرى.

الإعداد للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 بام عزر ملزمة CCR2 (بقايا 13-35) للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 البروتين [ينفتنركيسفقرلاسيريتسك] أو الببتيد المجمعة [ينسلففريرنستقركيراسيست] تعديل بإضافة بقايا سيستين على N-المحطة. الببتيد العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 تم تصنيعه بطريقة المرحلة الصلبة معتدلاً بوساطة استخدام المزج الآلي ببتيد. تمت تنقيته الببتيد الخام بعكس المرحلة [هبلك] في عمود C8 عند 50 درجة مئوية باستخدام 0.1% تفا في خلائط الاسيتو الانيتريل والمياه، وتتميز باستخدام الطيف الكتلي (الشكل 1). وكان مترافق المحتوية على سيستين الببتيد إلى دسبي-PEG2000-ماليميدي أن تسفر عن شماعة دسبي (2000)-الببتيد يصرف عن طريق ربط ثيويثير. بعد 24 ساعة في درجة حرارة الغرفة، تمت تنقية النفط الخام المنتج من [هبلك] (الشكل 2). دسب-شماعة (2000)-Cy5 تم تصنيعه باستخدام فعل إستر دائرة الصحة الوطنية. الوحيدات-استهداف PAMs تجميعها يشترك مع شماعة دسبي (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 دسبي-شماعة (2000)--Cy5 كانت ملفقة بتذويب في الميثانول وقد تبخرت ثم ن2، والفيلم الناتج كان المجفف تحت الفراغ بين عشية وضحاها وتجميعها ذاتيا في المياه أو برنامج تلفزيوني عن طريق التفاعلات مسعور "مجموعات الذيل" لنموذج العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs.
وصف للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 بام بيانات دائرة الأراضي والمساحة وصور تيم الوحيدات-استهداف PAMs أظهرت نانوحبيبات جيدا مشتتة، كروية من 15.3 ± 2.0 نانومتر في القطر (الشكل 3 و الجدول 1). PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 وسارعت PAMs أظهرت زيتا إيجابية طفيفة محتملة من 12.1 mV ± 3.1 و 13.7 ± 1.9 mV، على التوالي (الجدول 1). مؤتمر نزع السلاح قد أظهرت أن إدماج الببتيد العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 داخل مذيل تعزيز هيكل الثانوية (الجدول 2، PAMs العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1: 46.2 ± 0.9% β-ورقة و 53.1 ± 1.4% لفائف عشوائي MCP1 الحرة: 34.2 ± 3.5% β-ورقة، 65.8 ± 3.5% لفائف عشوائي).
في المختبر تحليل العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 بام ولوحظت في المختبر توافق مع الحياة والوحيدات الملزمة للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs بالفحص المجهري [كنفوكل]. كانت المحتضنة وحيدات الماوس مع التركيزات المتزايدة للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 والعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 بام، سارعت الببتيد وسارعت بام ح 72، وتم العثور على الخلايا لتكون قابلة للحياة ومتوافق حيويا حتى 100 ميكرومتر (الشكل 4). علاوة على ذلك، أظهر الفحص المجهري [كنفوكل] ملزمة محددة من وحيدات للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 PAMs عند مقارنتها بالمجمعة PAMs (الشكل 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56625/56625fig1.jpg"> الشكل 1 : [هبلك] chromatogram 220 نيوتن متر (الطول الموجي لسندات ببتيد) و 254 نانومتر (الطول الموجي تيروزين) العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 الببتيد (A) وسارعت الببتيد (ب) (مربع الذروة في دقيقة 7.4). TOF استخدام الطيف الشامل للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 الببتيد (ج) وسارعت الببتيد (د) في مجموعة من 500-5,000 دا عرض الذروة [M + H]+ في m/z 2,888 (2,890 المتوقعة). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56625/56625fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56625/56625fig2.jpg"> رقم 2: [هبلك] chromatogram 220 نيوتن متر (الطول الموجي لسندات ببتيد) و 254 نانومتر (الطول الموجي تيروزين) دسبي-شماعة (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 (A) ودسبي-شماعة (2000)-سارعت (ب). (الذروة محاصر في دقيقة 16.9). (ج) استخدام-TOF كتلة الطيف دسبي-شماعة (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 في مجموعة من 1,000-10,000 دا عرض القمم [M + H]+ في m/z 2,888 (2,890 المتوقعة) للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 و m/z 5,758 (5,760 المتوقعة) لربط دسبي (2000)-العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1. (د) استخدام-TOF كتلة الطيف دسب-شماعة (2000)-سارعت في طائفة من 1,000-10,000 دا عرض القمم [M + H]+ في m/z 2,887 (2,890 المتوقعة) لسارعت الببتيد و m/z 5,761 (5,760 المتوقعة) دسب-شماعة-تدافعت. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56625/56625fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56625/56625fig3.jpg"> الشكل 3 : صور تيم للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 "بام" (A)، وسارعت بام (ب). شريط المقياس = 100 نانومتر. توزيع عدد من المتوسط الحجم "بام" العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 (ج)، وسارعت بام عبر DLS (د). تكون البيانات يعني ± التنمية المستدامة (n = 3). (ﻫ) تحليل القرص المضغوط للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 وسارعت الببتيدات و PAMs (n = 3). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56625/56625fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56625/56625fig4.jpg"> الشكل 4 : في المختبر إمكانية وحيدات موريني WEHI 274.1 بعد التعرض ح 72 للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 الببتيد والعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 بام، سارعت الببتيد، وسارعت PAM. تكون البيانات يعني ± التنمية المستدامة (n = 6). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56625/56625fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56625/56625fig5.jpg"> 5 الرقم: صور كلسم للعملية التشاورية المتعددة الأطراف-1 "بام" (A)، وسارعت بام (ب) تدمج مع مول 10% Cy5 السلطة الفلسطينية (أحمر) المحتضنة مع 274.1 WEHI لشريط مقياس حاء – 1 = 20 ميكرومتر. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56625/56625fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>PAMs</td>
			<td>عدد أفي القطر (nm)</td>
			<td>حزب النضال الديمقراطي الإندونيسي</td>
			<td>إمكانات زيتا (mV)</td>
		</tr>
<tr>
<td>العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1</td>
			<td>15.3 ± 2.0</td>
			<td>0.119 ± 0.006</td>
			<td>12.1 ± 3.1</td>
		</tr>
<tr>
<td>سارعت</td>
			<td>16.9 ± 1.4</td>
			<td>0.232 ± 0,019</td>
			<td>13.7 ± 1.9</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="4">تقاس في المخزن المؤقت لبرنامج تلفزيوني. يتم التعبير عن البيانات يعني ± التنمية المستدامة.</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 1: الحجم، بوليديسبيرسيتي، وإمكانات زيتا PAMs.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>-اللولب (%)</td>
			<td>ب-ورقة (%)</td>
			<td>لفائف عشوائية (%)</td>
		</tr>
<tr>
<td>الببتيد العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1</td>
			<td>0.0 ± 0.0</td>
			<td>36.2 ± 2.2</td>
			<td>63.8 ± 1.8</td>
		</tr>
<tr>
<td>أم العملية التشاورية المتعددة الأطراف-1</td>
			<td>0.7 ± 0.6</td>
			<td>46.2 ± 0.9</td>
			<td>53.1 ± 1.4</td>
		</tr>
<tr>
<td>الببتيد المجمعة</td>
			<td>0.0 ± 0.0</td>
			<td>43.7 ± 2.1</td>
			<td>56.3 ± 3.5</td>
		</tr>
<tr>
<td>سارعت بام</td>
			<td>0.0 ± 0.0</td>
			<td>60.7 ± 0.2</td>
			<td>39.3 ± 0.2</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 2: تكوين بنية ثانوية من الببتيدات و PAMs-

Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis at JoVE.com

Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis

وتعرض هذه الورقة طريقة تنطوي على التوليف وتوصيف لاستهداف الوحيدات المذيلات أمفيفيلي الببتيد والمقابلة لها فحوصات لاختبار توافق مع الحياة وقدرة مذيل لربط وحيدات.

توليف لاستهداف الوحيدات في المذيلات أمفيفيلي الببتيد للتصوير من تصلب الشرايين

Atherosclerosis is a major contributor to cardiovascular disease, the leading cause of death worldwide, which claims 17.3 million lives annually. ...

synthesis-monocyte-targeting-peptide-amphiphile-micelles-for-imaging

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Bioengineering

7.2K Views.  University of Southern California. وتعرض هذه الورقة طريقة تنطوي على التوليف وتوصيف لاستهداف الوحيدات المذيلات أمفيفيلي الببتيد والمقابلة لها فحوصات لاختبار توافق مع الحياة وقدرة مذيل لربط وحيدات.

Video: Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis

Cultivation of Human Neural Progenitor Cells in a 3-dimensional Self-assembling Peptide Hydrogel

The influence of 3-dimensional (3D) scaffolds on growth, proliferation and finally neuronal differentiation is of great interest in order to find new methods for cell-based and standardised therapies in neurological disorders or neurodegenerative diseases. 3D structures are expected to provide an environment much closer to the in vivo situation than 2D cultures. In the context of regenerative medicine, the combination of biomaterial scaffolds with neural stem and progenitor cells holds great promise as a therapeutic tool.1-5 Culture systems emulating a three dimensional environment have been shown to influence proliferation and differentiation in different types of stem and progenitor cells. Herein, the formation and functionalisation of the 3D-microenviroment is important to determine the survival and fate of the embedded cells.6-8 Here we used PuraMatrix9,10 (RADA16, PM), a peptide based hydrogel scaffold, which is well described and used to study the influence of a 3D-environment on different cell types.7,11-14 PuraMatrix can be customised easily and the synthetic fabrication of the nano-fibers provides a 3D-culture system of high reliability, which is in addition xeno-free.
Recently we have studied the influence of the PM-concentration on the formation of the scaffold.13 In this study the used concentrations of PM had a direct impact on the formation of the 3D-structure, which was demonstrated by atomic force microscopy. A subsequent analysis of the survival and differentiation of the hNPCs revealed an influence of the used concentrations of PM on the fate of the embedded cells. However, the analysis of survival or neuronal differentiation by means of immunofluorescence techniques posses some hurdles. To gain reliable data, one has to determine the total number of cells within a matrix to obtain the relative number of e.g. neuronal cells marked by &beta;III-tubulin. This prerequisites a technique to analyse the scaffolds in all 3-dimensions by a confocal microscope or a comparable technique like fluorescence microscopes able to take z-stacks of the specimen. Furthermore this kind of analysis is extremely time consuming. 
Here we demonstrate a method to release cells from the 3D-scaffolds for the later analysis e.g. by flow cytometry. In this protocol human neural progenitor cells (hNPCs) of the ReNcell VM cell line (Millipore USA) were cultured and differentiated in 3D-scaffolds consisting of PuraMatrix (PM) or PuraMatrix supplemented with laminin (PML). In our hands a PM-concentration of 0.25% was optimal for the cultivation of the cells13, however the concentration might be adapted to other cell types.12 The released cells can be used for e.g. immunocytochemical studies and subsequently analysed by flow cytometry. This speeds up the analysis and more over, the obtained data rest upon a wider base, improving the reliability of the data.

Here we describe the use of a self-assembling 3-dimensional scaffold to culture human neural progenitor cells. We present a protocol to release the cells from the scaffolds to be analysed subsequently e.g. by flow cytometry. This protocol might be adapted to other cell types to perform detailed mechanistically studies.

زراعة خلايا العصبية السلف في هيدروجيل 3 الابعاد الذاتي تجميع الببتيد

The  influence of 3-dimensional (3D) scaffolds on growth, proliferation and finally  neuronal differentiation is of great interest in order to find new ...

Wideband Optical Detector of Ultrasound for Medical Imaging Applications

Optical sensors of ultrasound are a promising alternative to piezoelectric techniques, as has been recently demonstrated in the field of optoacoustic imaging. In medical applications, one of the major limitations of optical sensing technology is its susceptibility to environmental conditions, e.g. changes in pressure and temperature, which may saturate the detection. Additionally, the clinical environment often imposes stringent limits on the size and robustness of the sensor. In this work, the combination of pulse interferometry and fiber-based optical sensing is demonstrated for ultrasound detection. Pulse interferometry enables robust performance of the readout system in the presence of rapid variations in the environmental conditions, whereas the use of all-fiber technology leads to a mechanically flexible sensing element compatible with highly demanding medical applications such as intravascular imaging. In order to achieve a short sensor length, a pi-phase-shifted fiber Bragg grating is used, which acts as a resonator trapping light over an effective length of 350 &#181;m. To enable high bandwidth, the sensor is used for sideway detection of ultrasound, which is highly beneficial in circumferential imaging geometries such as intravascular imaging. An optoacoustic imaging setup is used to determine the response of the sensor for acoustic point sources at different positions.

Optical detection of ultrasound is impractical in many imaging scenarios because it often requires stable environmental conditions. We demonstrate an optical technique for ultrasound sensing in volatile environments with miniaturization and sensitivity levels appropriate for optoacoustic imaging in restrictive scenarios, e.g. intravascular applications.

النطاق العريض للكشف عن الموجات فوق الصوتية البصرية للتطبيقات التصوير الطبي

Optical sensors of ultrasound are a promising alternative to piezoelectric techniques, as has been recently demonstrated in the field of optoacoustic ...

Synthesis of Keratin-based Nanofiber for Biomedical Engineering

Electrospinning, due to its versatility and potential for applications in various fields, is being frequently used to fabricate nanofibers. Production of these porous nanofibers is of great interest due to their unique physiochemical properties. Here we elaborate on the fabrication of keratin containing poly (&#949;-caprolactone) (PCL) nanofibers (i.e., PCL/keratin composite fiber). Water soluble keratin was first extracted from human hair and mixed with PCL in different ratios. The blended solution of PCL/keratin was transformed into nanofibrous membranes using a laboratory designed electrospinning set up. Fiber morphology and mechanical properties of the obtained nanofiber were observed and measured using scanning electron microscopy and tensile tester. Furthermore, degradability and chemical properties of the nanofiber were studied by FTIR. SEM images showed uniform surface morphology for PCL/keratin fibers of different compositions. These PCL/keratin fibers also showed excellent mechanical properties such as Young&#39;s modulus and failure point. Fibroblast cells were able to attach and proliferate thus proving good cell viability. Based on the characteristics discussed above, we can strongly argue that the blended nanofibers of natural and synthetic polymers can represent an excellent development of composite materials that can be used for different biomedical applications.

Electrospun nanofibers have a high surface area to weight ratio, excellent mechanical integrity, and support cell growth and proliferation. These nanofibers have a wide range of biomedical applications. Here we fabricate keratin/ PCL nanofibers, using the electrospinning technique, and characterize the fibers for possible applications in tissue engineering.

التوليف من ألياف نانوية أساس كيراتين للهندسة الطبية الحيوية

Electrospinning, due to its versatility and potential for applications in various fields, is being frequently used to fabricate nanofibers. Production of ...

Microwave-driven Synthesis of Iron Oxide Nanoparticles for Fast Detection of Atherosclerosis

A fast and reproducible microwave-driven protocol has been developed for the synthesis of neridronate-functionalized nanoparticles. Starting from the synthesis of hydrophobic nanoparticles, our method is based on an adaptation from thermal decomposition method to microwave driven synthesis. The new methodology produces a decrease in the reaction times in comparison with traditional procedures. Moreover, the use of the microwave technology increases the reproducibility of the reactions, something important from the point of view of clinical applications. The novelty of this iron oxide nanoparticle is the attachment of Neridronate. The use of this molecule leads a bisphosphonate moiety towards the outside of the nanoparticle that provides Ca2+ binding properties in vitro and selective accumulation in vivo in the atheroma plaque. The protocol allows the synthesis and plaque detection in about 3 hr since the initial synthesis from organic precursors. Their accumulation in the atherosclerotic area in less than 1 hr provides a contrast agent particularly suitable for clinical applications.

Microwave technology enables extremely fast synthesis of iron oxide nanoparticles for atherosclerosis plaque characterization. The use of an aminobisphosphonate in the external side of the nanoparticle provides a fast accumulation in the atherosclerotic area.

توليف يحركها الميكروويف من أكسيد الحديد النانوية لكشف سريع من تصلب الشرايين

A fast and reproducible microwave-driven protocol has been developed for the synthesis of neridronate-functionalized nanoparticles. Starting from the ...

Preparation and Characterization of Lipophilic Doxorubicin Pro-drug Micelles

Micelles have been successfully used for the delivery of anticancer drugs. Amphiphilic polymers form core-shell structured micelles in an aqueous environment through self-assembly. The hydrophobic core of micelles functions as a drug reservoir and encapsulates hydrophobic drugs. The hydrophilic shell prevents the aggregation of micelles and also prolongs their systemic circulation in vivo. In this protocol, we describe a method to synthesize a doxorubicin lipophilic pro-drug, doxorubicin-palmitic acid (DOX-PA), which will enhance drug loading into micelles. A pH-sensitive hydrazone linker was used to conjugate doxorubicin with the lipid, which facilitates the release of free doxorubicin inside cancer cells. Synthesized DOX-PA was purified with a silica gel column using dichloromethane/methanol as the eluent. Purified DOX-PA was analyzed with thin layer chromatography (TLC) and 1H-Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (1H-NMR). A film dispersion method was used to prepare DOX-PA loaded DSPE-PEG micelles. In addition, several methods for characterizing micelle formulations are described, including determination of DOX-PA concentration and encapsulation efficiency, measurement of particle size and distribution, and assessment of in vitro anticancer activities. This protocol provides useful information regarding the preparation and characterization of drug-loaded micelles and thus will facilitate the research and development of novel micelle-based cancer nanomedicines.

A protocol for the preparation and characterization of lipophilic doxorubicin pro-drug loaded 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[amino(polyethylene glycol)-2000] (DSPE-PEG) micelles is described.

إعداد وتوصيف محبة للدهون دوكسوروبيسين المذيلات الموالية للعقار

Micelles have been successfully used for the delivery of anticancer drugs. Amphiphilic polymers form core-shell structured micelles in an aqueous ...

Synthesis of Cationized Magnetoferritin for Ultra-fast Magnetization of Cells

Many important biomedical applications, such as cell imaging and remote manipulation, can be achieved by labeling cells with superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONs). Achieving sufficient cellular uptake of SPIONs is a challenge that has traditionally been met by exposing cells to elevated concentrations of SPIONs or by prolonging exposure times (up to 72 hr). However, these strategies are likely to mediate toxicity. Here, we present the synthesis of the protein-based SPION magnetoferritin as well as a facile surface functionalization protocol that enables rapid cell magnetization using low exposure concentrations. The SPION core of magnetoferritin consists of cobalt-doped iron oxide with an average particle diameter of 8.2 nm mineralized inside the cavity of horse spleen apo-ferritin. Chemical cationization of magnetoferritin produced a novel, highly membrane-active SPION that magnetized human mesenchymal stem cells (hMSCs) using incubation times as short as one minute and iron concentrations as lows as 0.2 mM.

A protocol for the synthesis and cationization of cobalt-doped magnetoferritin is presented, as well as a method to rapidly magnetize stem cells with cationized magnetoferritin.

توليف Cationized Magnetoferritin للمغنطة فائقة السرعة من الخلايا

Many important biomedical applications, such as cell imaging and remote manipulation, can be achieved by labeling cells with superparamagnetic iron oxide ...

Synthesis of Hydrogels with Antifouling Properties As Membranes for Water Purification

Hydrogels have been widely utilized to enhance the surface hydrophilicity of membranes for water purification, increasing the antifouling properties and thus achieving stable water permeability through membranes over time. Here, we report a facile method to prepare hydrogels based on zwitterions for membrane applications. Freestanding films can be prepared from sulfobetaine methacrylate (SBMA) with a crosslinker of poly(ethylene glycol) diacrylate (PEGDA) via photopolymerization. The hydrogels can also be prepared by impregnation into hydrophobic porous supports to enhance the mechanical strength. These films can be characterized by attenuated total reflection Fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR) to determine the degree of conversion of the (meth)acrylate groups, using goniometers for hydrophilicity and differential scanning calorimetry (DSC) for polymer chain dynamics. We also report protocols to determine the water permeability in dead-end filtration systems and the effect of foulants (bovine serum albumin, BSA) on membrane performance.

This paper reports practical methods to prepare hydrogels in freestanding films and impregnated membranes and to characterize their physical properties, including water transport properties.

توليف الهلاميات المائية مع خصائص المضادة للحشف والأغشية لتنقية المياه

Hydrogels have been widely utilized to enhance the surface hydrophilicity of membranes for water purification, increasing the antifouling properties and ...

Design and Synthesis of a Reconfigurable DNA Accordion Rack

DNA nanostructure-based mechanical systems or DNA nanomachines, which produce complex nanoscale motion in 2D and 3D in the nanometer to &#229;ngstr&#246;m resolution, show great potential in various fields of nanotechnology such as the molecular reactors, drug delivery, and nanoplasmonic systems. The reconfigurable DNA accordion rack, which can collectively manipulate a 2D or 3D nanoscale network of elements, in multiple stages in response to the DNA inputs, is described. The platform has potential to increase the number of elements that DNA nanomachines can control from a few elements to a network scale with multiple stages of reconfiguration.
In this protocol, we describe the entire experimental process of the reconfigurable DNA accordion rack of 6 by 6 meshes. The protocol includes a design rule and simulation procedure of the structures and a wet-lab experiment for synthesis and reconfiguration. In addition, analysis of the structure using TEM (transmission electron microscopy) and FRET (fluorescence resonance energy transfer) is included in the protocol. The novel design and simulation methods covered in this protocol will assist researchers to use the DNA accordion rack for further applications.

We describe the detailed protocol for design, simulation, wet-lab experiments, and analysis for a reconfigurable DNA accordion rack of 6 by 6 meshes.

تصميم وتجميع رف الاكورديون الحمض النووي إعادة التشكيل

DNA nanostructure-based mechanical systems or DNA nanomachines, which produce complex nanoscale motion in 2D and 3D in the nanometer to &#229;ngstr&#246;m ...

In Vesiculo Synthesis of Peptide Membrane Precursors for Autonomous Vesicle Growth

Compartmentalization of biochemical reactions is a central aspect of synthetic cells. For this purpose, peptide-based reaction compartments serve as an attractive alternative to liposomes or fatty acid-based vesicles. Externally or within the vesicles, peptides can be easily expressed and simplify the synthesis of membrane precursors. Provided here is a protocol for the creation of vesicles with diameters of ~200 nm based on the amphiphilic elastin-like polypeptides (ELP) utilizing dehydration-rehydration from glass beads. Also presented are protocols for bacterial ELP expression and purification via inverse temperature cycling, as well as their covalent functionalization with fluorescent dyes. Furthermore, this report describes a protocol to enable the transcription of RNA aptamer dBroccoli inside ELP vesicles as a less complex example for a biochemical reaction. Finally, a protocol is provided, which allows in vesiculo expression of fluorescent proteins and the membrane peptide, whereas synthesis of the latter results in vesicle growth.

Presented here are protocols for the creation of peptide-based small unilamellar vesicles capable of growth. To facilitate in vesiculo production of the membrane peptide, these vesicles are equipped with a transcription-translation system and the peptide-encoding plasmid.

في فيسيكولو التوليف من السلائف غشاء الببتيد لنمو الحويصلة المستقلة

Compartmentalization of biochemical reactions is a central aspect of synthetic cells. For this purpose, peptide-based reaction compartments serve as an ...

Synthesis of Near-Infrared Emitting Gold Nanoclusters for Biological Applications

Over the past decade, fluorescent gold nanoclusters (AuNCs) have witnessed growing popularity in biological applications and enormous efforts have been devoted to their development. In this protocol, a recently developed, facile method for preparation of water soluble, biocompatible, and colloidally stable near-infrared emitting AuNCs have been described in detail. This room-temperature, bottom-up chemical synthesis provides easily functionalizable AuNCs capped with thioctic acid and thiol-modified polyethylene glycol in aqueous solution. The synthetic approach requires neither organic solvents or additional ligand exchange nor extensive knowledge of synthetic chemistry to reproduce. The resulting AuNCs offer free surface carboxylic acids, which can be functionalized with various biological molecules bearing a free amine group without adversely affecting the photoluminescent properties of the AuNCs. A quick, reliable procedure for flow cytometric quantification and confocal microscopic imaging of AuNC uptake by HeLa cells also been described. Due to the large Stokes shift, proper setting of filters in flow cytometry and confocal microscopy is necessary for efficient detection of near-infrared photoluminescence of AuNCs.

A reliable and easily reproducible method for preparation of functionalizable, near-infrared emitting photoluminescent gold nanoclusters and their direct detection inside HeLa cells by flow cytometry and confocal laser scanning microscopy is described.

تركيب مجموعات نانوية ذهبية قريبة من الأشعة تحت الحمراء للتطبيقات البيولوجية

Over the past decade, fluorescent gold nanoclusters (AuNCs) have witnessed growing popularity in biological applications and enormous efforts have been ...