Research reported in this publication was supported by The Johns Hopkins Applied Physics Laboratory&#8217;s Research and Exploratory Development Department, Office of Technology Transfer, and Stuart S. Janney Fellowship Program, in addition to the National Heart, Lung, and Blood Institute of the National Institutes of Health under Award Number R21HL127355.

1. تجهيز SLNs <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توليف SLNs ملاحظة: استخدام أسلوب PIT 1،17،20 لإعداد الفرعية 20 نانومتر SLNs 1. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام تقنية العقيم، bioreagents أو زراعة الخلايا الكواشف الصف، والمواد المعقمة (أي الماصات، ملاعق، قارورة، وما إلى ذلك). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الوزراء للسلامة الأحيائية لتركيب SLNs (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجمع بين 0.6 ملغ من صبغة الفلورسنت (النيل الأحمر (نير)، وتركيز نير ما يقرب من 0.3 ملغ / مل) و 0.10 غرام من Heneicosane (الدهن، 5 وزن / وزن٪ تركيز الدهون) في قارورة (15 مل)، وشارك في تذوب في 90 ° C، ويقلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 0،11 ز البولي أوكسي إتيلين (10) الأثير أوليل (السطحي، 5.5 وزن / وزن٪ تركيز بالسطح). شارك في إذابة الخليط الناتج على 90 ° C ويقلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 1.79 غرام من الماء المعقم إلى الخليط، والحرارة إلى 90 درجة مئوية، ويحرك حتى يتم تشكيل nanoemulsion شفافة. ملاحظة: في ظل استمرار التحريك والتبريد للرقابة، SLيتم إنشاء نانوثانية. هذه الشروط تتسبب في انقلاب من مستحلب الماء في الزيت إلى مستحلب النفط في المياه. جزيئات محبة للدهون مثل نير قسم إلى قطرات الدهون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد nanoemulsion بالتوازي دون إضافة صبغة الفلورسنت، وذلك لتكون بمثابة عينة السيطرة. الجمع بين 0.10 غرام من Heneicosane و 0.11 غرام البولي أوكسي إتيلين (10) الأثير أوليل إلى قارورة (15 مل) المشارك تذوب في 90 ° C، ويقلب. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 1.79 غرام من الماء المعقم إلى الخليط، والحرارة إلى 90 درجة مئوية، ويحرك حتى يتم تشكيل nanoemulsion شفافة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وعلاوة على ذلك تعقيم كل nanoemulsion باستخدام معقم 0.2 ميكرون التصفية. </li></ol><img alt="الرقم 2" src="/files/ftp_upload/53102/53102fig2.jpg" /> الشكل 2. تخطيطي لتركيب SLNs. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53102/53102fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حجم الجسيمات وبولydispersity <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام تشتت الضوء الحيوي (DLS) لقياس حجم الجسيمات والتشتت المتعدد من SLNs 1 باستخدام كوفيت الزجاج وأداة مصممة لقياس حجم الجسيمات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل قياسات للعينات، وقياس أحجام الجسيمات اثنين من المعايير المعروفة التالية بروتوكول الشركة المصنعة لإعداد وقياس معايير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملء كفيت الزجاج مع 1.5 مل من محلول قياسي وقياس الحل قياسي باستخدام شروط القياس نفس العينات. ملاحظة: وقد تكرر الخطوة السابقة لكل معيار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس العينات وإعدادها. لكل، استخدم المعلمات التجريبية التالية: وقت التشغيل 100 ثانية، ومعامل انكسار الماء (1.33)، واللزوجة من الماء عند 20 درجة مئوية (1.002 ميجا باسكال · ثانية). ملاحظة: يستخدم هذا الأسلوب تردد تحول من الضوء لقياس حجم الجسيمات النانوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الإبلاغ عن متوسط ​​قطرها الجسيمات والتشتت المتعدد للحزبشركة كلي حجم التوزيع. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ذوبان نقطة والكامنة للحرارة الانصهار <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام مسعر المسح التفاضلي (DSC) مجهزة لصناعة السيارات في أخذ العينات ومصدر تبريد النيتروجين السائل للتحقيق في السلوك الحراري للSLNs 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة كما أعدت-SLNs إلى الألومنيوم عموم 40 ميكرولتر مع كتلة من ما يقرب من 25 ملغ و بإحكام اغلاق المقلاة باستخدام الصحافة المكشكش العالمي للحد من فقدان الرطوبة أثناء الفحص DSC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس كل nanoemulsion 5-80 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الإبلاغ عن نقطة انصهار والحرارة الكامنة لانصهار من مؤامرة DSC، حيث يمثل وادي درجة انصهار وتكامل المنطقة تحت المنحنى في المؤامرة DSC مقسوما على كمية المواد تمثل الحرارة الكامنة لانصهار. </li></ol></li></ol> 2. SLNs التفاعل مع الخلايا الليفية والخلايا الجذعية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقافة الابتدائية الخلايا الليفية الإنسان <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقافة فاي البشري الأساسيbroblasts وفقا لتعليمات الشركة الصانعة في الوسط السائل لثقافة الخلايا الليفية الجلدية الإنسان (المتوسطة 106)، على أن تستكمل مع انخفاض ملحق النمو المصل (LSGS) عدة. الحفاظ على الخلايا في جو مرطب عند 37 درجة مئوية، و 5٪ CO 2 و ثقافة فرعية عند بلوغ 80٪ التقاء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لكل من MTT والتحليل والتصوير، وخلايا البذور في لوحة 96-جيدا، في مناطق ذات كثافة من 2 × 10 4 خلايا لكل بئر، والسماح للتوازن عند 37 درجة CO / N قبل التعرض SLN. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في وقت الصفر، وتمييع SLNs في المتوسط ​​كاملة كما هو مبين (الشكل 4)، فيما يتعلق تركيز الدهون، وإضافة 10 ميكرولتر لكل بئر لكل تتكاثر بشكل جيد في لوحة 96-جيدا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الخلايا عند 37 درجة مئوية، و 5٪ CO 2، خلال فترة الحضانة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> MTT سمية الفحص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 24 ساعة من الحضانة مع SLNs، وتحديد الجدوى الخلوية باستخدام فحص MTT، وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. &lt;/ لى&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل خلايا مرة واحدة وإضافة متوسطة جديدة إلى كل بئر (100 ميكرولتر / جيد). قتل آبار المراقبة التي يحتضنها في حل الميثانول 70٪ لمدة 10 دقيقة قبل استبدال مع المتوسط ​​الطازجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة كاشف MTT (10 ميكرولتر لكل بئر) إلى كل بئر من صفيحة ميكروسكوبية واحتضان O / N عند 37 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد O / N الحضانة، وإذابة البلورات formazin الخلايا مع محلول منظف المقدمة (100 ميكرولتر لكل بئر) وفقا لبروتوكول الشركة الصانعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 3 ساعات من الحضانة في RT، الحصول على قيم الامتصاصية في الطول الموجي قياس 570 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية. كاشف MTT المستخدمة يجب أن تكون أقل من 1٪ (وزن / حجم) 3- (4،5-dimethylthiazolyl-2) -2، بروميد 5-ثنائي-نتروبلو: مذكرة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مضان المجهر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في نقطة زمنية محددة بعد الجرعات من الخلايا الليفية مع SLN، وغسل الخلايا الليفية مرتين مع الفوسفات العقيمة مخزنة المالحة (PBS) وإصلاح لمدة 10 دقيقة مع بارد 70٪ الميثانول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 10 دقيقةاستبدال الميثانول مع برنامج تلفزيوني والتقاط الصور باستخدام مجهر مقلوب، وذلك باستخدام تمريرة الفرقة (BP) 690/50 نانومتر تصفية مجموعة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقافة خلايا الفأر نخاع العظم الجذعية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حمل الماوس العظام المستمدة من نخاع الخلايا الجذعية (BMDC) كما هو موضح سابقا 23،24. لفترة وجيزة، تعليق خلية لوحة واحدة من C57BL / 10 نخاع العظام في 100 ملم أطباق بتري في 2 × 10 6 / لوحة مع المؤتلف الفئران عامل تحفيز مستعمرة الكريات البيضاء بلعم (GM-CSF، 300 U / مل)، والفئران المؤتلف IL-4 (خلية B عامل تحفيز، 200 U / مل). تغيير وسائل الاعلام كل 3 أيام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في يوم 7، إضافة SLNs نير تحميلها على الأطباق في تركيز النهائي من 0.5 و 5.0 ميكروغرام / مل الدهون والحفاظ على خلايا في 37 درجة مئوية، و 5٪ CO 2 حاضنة للطول المطلوب من التعرض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الخلايا من الأطباق بواسطة الشفط جميع وسائل الإعلام في لوحة، وجمع ذلك في أنبوب 50 مل، تليها الغسل الكامل من لوحة (لطرد إعلان فضفاضةخلايا herent) مع 5 مل من الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) التي تحتوي على 4 ملم ثنائي أمين الإيثيلين رباعي حمض الخل (EDTA). جمع تعليق خلية تم الحصول عليها في نفس أنبوب 50 مل. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقييم SLNs التأسيس عن طريق التدفق الخلوي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد تركيز تعليق الخلية التي تم الحصول عليها في النقطة 2.4.3 وتوزيع 3x10 5 خلايا إلى 12 مم × 75 مم أسفل جولة FACS أنبوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني ومن ثم الطرد المركزي الأنابيب لمدة 5 دقائق في 400 x ج، عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجاهل طاف و resuspend بيليه مع 100 ميكرولتر من PBS / 2 ملي EDTA / 0.1٪ ألبومين المصل البقري (BSA) (العازلة تلطيخ) التي تحتوي على مكافحة CD11c و-FITC الأجسام المضادة وحيدة النسيلة (0.25 ميكروغرام / مل النهائي). احتضان لمدة 30 دقيقة على الجليد في الظلام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل الخلايا مع 1 مل من برنامج تلفزيوني ثم الطرد المركزي الأنابيب لمدة 5 دقائق في 400 x ج، عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجاهل وطاف resuspend كلبيليه مع 400 ميكرولتر من العازلة تلطيخ. الخلايا هي الآن جاهزة للشراء من العينات مع الكريات تدفق (ربما مجهزة ليزر زرقاء وحمراء). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام التدفق الخلوي برامج التحليل، وتقييم مستوى إدماج SLNs بواسطة DC بواسطة المعزولة على سكان CD11c و+ الخلايا (FITC إيجابي) والمقارنة بين شدة المرتبطة SLNs مضان (المقاسة في القنوات PerCP-Cy5.5 أو APC). </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Calderon-Colon, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+sub-10+nm+solid+lipid+nanoparticles+for+topical+and+biomarker+detection+applications.">Synthesis of sub-10 nm solid lipid nanoparticles for topical and biomarker detection applications.</a> J Nanopart Res. 16 (2252), 1-10 (2014).</li><li>Patwekar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+on+nanoparticles+used+in+cosmetics+and+dermal+products.">Review on nanoparticles used in cosmetics and dermal products.</a> World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 3 (8), 1407-1421 (2014).</li><li>Martins, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+lipid+nanoparticles+as+intracellular+drug+transporters:+An+investigation+of+the+uptake+mechanism+and+pathway.">Solid lipid nanoparticles as intracellular drug transporters: An investigation of the uptake mechanism and pathway.</a> International Journal of Pharmaceutics. 430, 216-227 (2012).</li><li>Yadav, N., Khatak, S., Sara, U. V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+Lipid+Nanoparticles+-+A+Review.">Solid Lipid Nanoparticles - A Review.</a> International Journal of Applied Pharmaceuticals. 5 (2), 8-18 (2013).</li><li>Weber, S., Zimmer, A., Solid Pardeike, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+Nanoparticles+(SLN)+and+Nanostructured+Lipid+Carriers+(NLC)+for+pulmonary+application:+a+review+of+the+state+of+the+art.">Lipid Nanoparticles (SLN) and Nanostructured Lipid Carriers (NLC) for pulmonary application: a review of the state of the art.</a> Eur J Pharm Biopharm. 86 (1), 7-22 (2014).</li><li>Mahajan, A., Kaur, S., Grewal, N. K., Kaur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+Lipd+Nanoparticles+(SLNs)+-+As+Novel+Lipd+based+Nanocarriers+for+Drugs.">Solid Lipd Nanoparticles (SLNs) - As Novel Lipd based Nanocarriers for Drugs.</a> International Journal of Advanced Research. 2 (1), 433-441 (2014).</li><li>Buse, J., El-Aneed, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties,+engineering+and+applications+of+lipid-based+nanoparticle+drug-delivery+systems:+current+research+and+advances.">Properties, engineering and applications of lipid-based nanoparticle drug-delivery systems: current research and advances.</a> Nanomedicine (Lond). 5, 1237-1260 (2010).</li><li>Malam, Y., Loizidou, M., Seifalian, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomes+and+nanoparticles:+nanosized+vehicles+for+drug+delivery+in+cancer.">Liposomes and nanoparticles: nanosized vehicles for drug delivery in cancer.</a> Trends Pharmacol Sci. 30 (11), 592-599 (2009).</li><li>Lim, S. B., Banerjee, A., Onyuksel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+drug+safety+by+the+use+of+lipid-based+nanocarriers.">Improvement of drug safety by the use of lipid-based nanocarriers.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 163, 34-45 (2012).</li><li>Ali Khan, A., Mudassir, J., Mohtar, N., Darwis, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+drug+delivery+to+the+lymphatic+system:+lipid-based+nanoformulations.">Advanced drug delivery to the lymphatic system: lipid-based nanoformulations.</a> International journal of nanomedicine. 8, 2733-2744 (2013).</li><li>Oussoren, C., Storm, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomes+to+target+the+lymphatics+by+subcutaneous+administration.">Liposomes to target the lymphatics by subcutaneous administration.</a> Advanced drug delivery reviews. 50, 143-156 (2001).</li><li>Shang, L., Nienhaus, K., Nienhaus, G. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+nanoparticles+interacting+with+cells:+size+matters.">Engineered nanoparticles interacting with cells: size matters.</a> J Nanobiotechnology. 12, 5 (2014).</li><li>Joshi, M. D., Muller, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+nanoparticles+for+parenteral+delivery+of+actives.">Lipid nanoparticles for parenteral delivery of actives.</a> European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics : official journal of Arbeitsgemeinschaft fur Pharmazeutische Verfahrenstechnik e.V. 71, 161-172 (2009).</li><li>Torchilin, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micellar+nanocarriers:+pharmaceutical+perspectives.">Micellar nanocarriers: pharmaceutical perspectives.</a> Pharmaceutical research. 24, 1-16 (2007).</li><li>Ashley, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+targeted+delivery+of+multicomponent+cargos+to+cancer+cells+by+nanoporous+particle-supported+lipid+bilayers.">The targeted delivery of multicomponent cargos to cancer cells by nanoporous particle-supported lipid bilayers.</a> Nature materials. 10, 389-397 (2011).</li><li>Patchan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotech;+Nanotechnology+2013:+Bio+Sensors+Instruments,+Medical,+Environment+and+Energy;+Chapter+3:+Materials+for+Dru.,+and+Gene+Delivery.">Nanotech; Nanotechnology 2013: Bio Sensors Instruments, Medical, Environment and Energy; Chapter 3: Materials for Dru., and Gene Delivery.</a> Nanobandage for controlled release of topical therapeutics. 3, 255-258 (2013).</li><li>Forgiarini, A., Esquena, J., Gonzalez, C., C, S., Koutsoukos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+and+stability+of+nano-emulsions+in+mixed+nonionic+surfactant+systems.+Trends+in+colloid+and+interface+science+XV.">Formation and stability of nano-emulsions in mixed nonionic surfactant systems. Trends in colloid and interface science XV.</a> Progress in Colloid and Polymer Science. 118, 184-189 (2001).</li><li>Nantarat, T., Chansakaow, S., Leelapornpisid, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization,+characterization+and+stability+of+essential+oils+blend+loaded+nanoemulsions+by+PIC+technique+for+anti-tyrosinase+activity.">Optimization, characterization and stability of essential oils blend loaded nanoemulsions by PIC technique for anti-tyrosinase activity.</a> International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 7, 308-312 (2015).</li><li>Sevcikova, P., Vltavska, P., Kasparkova, V., Formation Krejci, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+Stability+of+Nanoemulsions+Prepared+by+Phase+Inversion.">Characterization and Stability of Nanoemulsions Prepared by Phase Inversion.</a> , 132-137 (2011).</li><li>Forgiarini, A., Esquena, J., Gonzalez, C., Solans, C., Buckin, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+of+the+relation+between+phase+behavior+and+emulsification+methods+with+nanoemulsion+formation.+Trends+in+colloid+and+interface+science+XIV.">Studies of the relation between phase behavior and emulsification methods with nanoemulsion formation. Trends in colloid and interface science XIV.</a> Progress in Colloid and Polymer Science. 115, 36-39 (2000).</li><li>Forgiarini, A., Esquena, J., Gonzalez, C., Solans, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+nano-emulsions+by+low-energy+emulsification+methods+at+constant+temperature.">Formation of nano-emulsions by low-energy emulsification methods at constant temperature.</a> Langmuir. 17 (7), 2076-2083 (2001).</li><li>Cabone, C., Tomasello, B., Ruozi, B., Renis, M., Puglisi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+optimization+of+PIT+solid+lipid+nanoparticles+via+statistical+factorial+design.">Preparation and optimization of PIT solid lipid nanoparticles via statistical factorial design.</a> Eur J Med Chem. 49, 110-117 (2012).</li><li>Raimondi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+Target+of+Rapamycin+Inhibition+and+Alloantigen-Specific+Regulatory+T+Cells+Synergize+To+Promote+Long-Term+Graft+Survival+in+Immunocompetent+Recipients.">Mammalian Target of Rapamycin Inhibition and Alloantigen-Specific Regulatory T Cells Synergize To Promote Long-Term Graft Survival in Immunocompetent Recipients.</a> J Immunol. 184, 624-636 (2010).</li><li>Jhunjhunwala, S., Raimondi, G., Thomson, A. W., Little, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+of+rapamycin+to+dendritic+cells+using+degradable+microparticles.">Delivery of rapamycin to dendritic cells using degradable microparticles.</a> J Control Release. 133 (13), 191-197 (2009).</li><li>Kapse-Mistry, S., Govender, T., Srivastava, R., Yergeri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanodrug+delivery+in+reversing+multidrug+resistance+in+cancer+cells..">Nanodrug delivery in reversing multidrug resistance in cancer cells..</a> Front Pharmacol. 5 (159), 1-22 (2014).</li><li>Musacchio, T., Torchilin, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+developments+in+lipid-based+pharmaceutical+nanocarriers.">Recent developments in lipid-based pharmaceutical nanocarriers.</a> Front Biosci (Landmark Ed). 1 (16), 1388-1412 (2011).</li><li>Cerpnjak, K., Zvonar, A., Ga&#353;perlin, M., Vre&#269;er, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid-based+systems+as+a+promising+approach+for+enhancing+the+bioavailability+of+poorly+water-soluble+drugs).">Lipid-based systems as a promising approach for enhancing the bioavailability of poorly water-soluble drugs).</a> Acta Pharm. 63 (4), 27-445 (2013).</li><li>Rodr&#236;guez-Gasc&#242;n, A., Pozo-Rodr&#236;guez, A., Solin&#236;s, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+nucleic+acid+vaccines:+use+of+self-amplifying+RNA+in+lipid+nanoparticles.">Development of nucleic acid vaccines: use of self-amplifying RNA in lipid nanoparticles.</a> Int J Nanomedicine. 9, 1833-1843 (2014).</li><li>Almeida, A. J., Souto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+lipid+nanoparticles+as+a+drug+delivery+system+for+peptides+and+proteins.">Solid lipid nanoparticles as a drug delivery system for peptides and proteins.</a> Adv Drug Deliv Rev. 59, 478-490 (2007).</li><li>Pardeshi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+lipid+based+nanocarriers:+an+overview.">Solid lipid based nanocarriers: an overview.</a> Acta Pharm. 62, 433-472 (2012).</li><li>Attama, A. A., Momoh, M. A., Builders, P. F., Sezer, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+Nanoparticulate+Drug+Delivery+Systems:+A+Revolution+in+Dosage+Form+Design+and+Development.">Lipid Nanoparticulate Drug Delivery Systems: A Revolution in Dosage Form Design and Development.</a> Recent Advances in Novel Drug Carrier Systems. , 107-140 (2012).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

في هذه الدراسة، تم استكشاف توليف SLNs وتطبيقها للتطبيقات التي تستهدف الخلايا. وقد أظهرت هذه الجسيمات النانوية حيويا وعد بوصفها وسائل إيصال لتطبيقات متعددة بما في ذلك تسليم المخدرات، إسكات الجينات والتقنيات لقاح 25-30. تم توليفها SLNs الصغيرة جدا باستخدام عملية السطحية، واستكشفت تفاعلاتها مع خلايا الجلد الابتدائية والخلايا المناعية الأولية. وقد صممت SLNs لتشمل التغليف من صبغة الفلورسنت (نير)، الذي كان بمثابة البضائع العلاجية نموذجية. وتم استخدام المنهج PIT لتجميع SLN وخصائص الجسيمات الناتجة (حجم الجسيمات، والتشتت المتعدد، نقطة انصهار، والكامنة حرارة انصهار) تم تقييمها باستخدام ديناميكية تشتت الضوء والمسح التفاضلي قياس الكالوري. حجم الجسيمات وتحليل التشتت المتعدد كشف توليف SLNs الصغيرة جدا مع التشتت المتعدد ضيق، والمثل الأعلى للهدف داخل الخلاياجي التطبيقات. كما ذكرت سابقا، يمكن أن حجم الجسيمات تلعب دورا مهما في التفاعلات الخلوية 12. وقد تبين حجم الجسيمات النانوية أن يكون لها تأثير كبير، والتأثير على كفاءة امتصاص، واستيعاب اختيار المسار، وتوطين داخل الخلايا، وسمية الخلايا 12. بعض الاتجاهات العامة فيما يتعلق تفاعلات الخلايا جسيمات متناهية الصغر موثقة في الأدب تشمل: الحجم الحرج يمكن أن تختلف مع نوع من الخلايا وسطح خصائص الجسيمات النانوية، والجسيمات النانوية الصغيرة لديها أعلى احتمال أن يكون داخليا من قبل السلبي يصل تأخذ من الشركات الكبيرة 12 . وكشف التحليل الحراري للجسيمات في هذه الدراسة مستوى مختلف من التبلور (أي الحرارة الكامنة لانصهار) بين SLNs السيطرة وتلك محملة نير الصبغة. انخفض التبلور من SLNs يرجع ذلك إلى إضافة صبغة الفلورسنت، الذي يعمل بمثابة النجاسة. وقد تبين أن تبلور نظام تقديم العلاج إلى bالبريد أحد العوامل الهامة التي تؤثر على تسليم وجرعة 31. انخفاض في التبلور من السيارة SLN يمكن أن تؤثر المعلمات مثل قدرة التحميل العلاجية وحركية تحرر الدواء 31. طريقة PIT هو أسلوب تجميع أكثر لطيف بالمقارنة مع الطرق الأخرى، مع القيود التي يمكن إدراجها الأدوية فقط محبة للدهون في الجزيئات. وعلى الرغم من هذا القيد، SLNs تصنيعه باستخدام هذه الطريقة وحيويا للغاية، مما يجعل منصة تسليم ثم مناسبة للعديد من التطبيقات في مجال البحوث الطبية الحيوية. وقد تم تحليل آثار التفاعل SLN على الإنسان قابلية الجلد الخلايا الليفية باستخدام فحص MTT. ولوحظ وجود انخفاض تعتمد على الجرعة في البقاء مع زيادة تركيزات SLN. خلال التوليف SLN، واستقرت جزيئات الدهون مع طبقة السطحي. كما يقلل من حجم الجسيمات، ويزيد من مساحة السطح، وكذلك إمكانية التفاعلات سطح الخلية والخلوية التعرض رس طبقة السطحي، والذي قد يؤدي إلى تلف أغشية الخلايا. هذه التجارب سمحت تحديد تركيز الجرعات التي امتصاص الخلايا للجسيمات يمكن ملاحظة مع تجنب حدوث انخفاض كبير في بقاء الخلية بسبب اضطراب الغشاء. تحليل MTT هو أسلوب الكمية التي يمكن تطبيقها على نطاق واسع لفهم الصحة الخلوية. في موازاة ذلك، تم فحص الخلايا باستخدام المجهر مضان لتصور مضان من صبغة الفلورسنت البضائع، نير. باستخدام هذه التقنية، وقد لوحظ امتصاص الجسيمات إلا بعد 2 ساعة من الحضانة مع الخلايا الليفية الإنسان. يوفر مضان المجهر المعلومات النوعية المتعلقة مورفولوجيا والخصائص الخلوية. يجب توخي الحذر لتجنب تلطيخ الخلفية المفرط والتصوير من القطع الأثرية. بالإضافة إلى ذلك، كنماذج الماوس عادة ما تكون الخيار الأول للفي عمق الخلوية والجزيئية التحقيقات، قمنا بتحليل التفاعل بين SLNs وخلايا الفئران. على وجه الخصوص، عظيمالمصلحة تكمن في استخدام الجسيمات النانوية من أجل إطلاق سراح انتقائي وتسيطر المخدرات التي من شأنها أن تعديل سلوك النظام المناعي. ونتيجة لذلك، التدفق الخلوي كان يعمل لقياس امتصاص الجزيئات التي خلايا فأر شجيري. وأكدت هذه البيانات أن الخلايا البلعمية مثل الخلايا الجذعية يمكن أن يتسامح مع مجموعة مماثلة من تركيز SLNs (مع انخفاض قابلية رصدت في 50 ميكروغرام / مل الدهون كما هو الحال مع الخلايا الليفية الجلدية الإنسان) ومستوى التأسيس يرتبط بشكل مباشر مع تركيز التعرض SLN. وعلاوة على ذلك، كشفت DC التأسيس السريع جدا من SLNs، مما يوحي بأن هذه الفئة من السكان قد تمثل هدفا ثمينا عبر SLN بوساطة تسليم المخدرات. وتشمل هذه الدراسة وصفا للطريقة لتركيب السكان الصغيرة جدا من الجسيمات النانوية حيويا، فضلا عن العديد من في المختبر الطرق التي يمكن من خلالها تقييم التفاعلات الخلوية. في الدراسات المستقبلية، فحوصات إضافيةيمكن استخدامها لزيادة توصيف التفاعلات خلية الجسيمات وفي نهاية المطاف توجيه التنمية الناجحة للnanocarriers العلاجية. ويمكن أن تشمل هذه الدراسات من حركية الافراج عن المخدرات، وتحليل tropism الخلوي، وقياس مستويات خلوى الموالية للالتهابات، وتحليل التغيرات transcriptomic الخلوية مع مرور الوقت.

وقد أظهرت وسائل إيصالها القائم على جسيمات متناهية الصغر وعودا كبيرة للتطبيقات التي تستهدف الخلايا، وتوفير آلية لتغيير وجه التحديد الإشارات الخلوية والتعبير الجيني. هذه المركبات يمكن تحميلها مع المخدرات، والبروتينات، والأحماض النووية مصممة للتأثير الاستجابات الخلوية وتحقيق التأثير المطلوب في الأنسجة المستهدفة. تم استكشاف العديد من أنواع nanocarriers لفائدة علاجية وتشخيصية بما في ذلك الدهون، والبوليمرات، والسيليكون، والمواد المغناطيسية. هذه النظم هي جذابة نظرا لقدرتها على العقاقير الموضعية، وزيادة التركيز العلاجي في الأنسجة المستهدفة، والحد من سمية جهازية. النانوية الدهون الصلبة (SLNs) هي مثال مدروسة لنظام تسليم جسيمات متناهية الصغر التي برزت باعتبارها واعدة المركبات تسليم المخدرات في السنوات الأخيرة. SLNs يمكن أن تصاغ بسهولة لتطبيقات متعددة بما في ذلك 1 الاستشعار البيولوجية، ومستحضرات التجميل 2، ورتسليم herapeutic 3-7. تنبع فائدتها من حقيقة أنها تتألف بالكامل من resorbable، والدهون غير سامة، مما أدى إلى تعزيز توافق مع الحياة. خلال التوليف، ويمكن إدراج الأدوية محبة للدهون في المركبات SLN، وبالتالي زيادة القابلية للذوبان في المخدرات وصلاحيتها للبالحقن. سيارات SLN يساعد أيضا على تحقيق الاستقرار العلاجات مغلفة، والحد من تدهورها وإزالة الألغام، وتعظيم العمل العلاجي. هذه المركبات بشكل خاص مناسبة تماما لطويل المفعول، والأعمال التحضيرية تسيطر عليها الافراج عن نظرا لاستقرارها في درجة حرارة الجسم 3،4،8،9. الأهم من ذلك، تغليف الأدوية النانوية في الدهون يغير ملامح الدوائية الجوهرية للجزيئات الدواء. وهذا يوفر ميزة محتملة من خلال السماح بإطلاق سراح تسيطر المخدرات مع مؤشر العلاجي الضيق. معدل الإفراج عن العلاجات-أدرجت SLN يمكن ضبطها على أساس معدل التحلل الدهني أو معدل انتشار المخدرات فيمصفوفة الدهون. وغالبا ما المهندسة SLNs تتراكم في الأنسجة المستهدفة المحددة. على سبيل المثال، حجمها (عادة أكبر من 10 نانومتر) يقوي الاحتفاظ في الدورة الدموية، حيث الأوعية الدموية المتسرب من نسيج الورم يسهل ترسب. وبالإضافة إلى ذلك، فقد تبين أن طريقة التعاطي الجسيمات لتغيير biodistribution مع القدرة على استهداف البنى فسيولوجية معينة مثل الغدد الليمفاوية 10،11. على ترسب في الأنسجة المستهدفة، وتحقيق التفاعلات الخلوية المناسبة واستيعاب نهاية المطاف النانوية يشكل تحديا نظرا لقدرة أغشية الخلايا للسيطرة بشكل انتقائي تدفق الأيونات والجزيئات داخل وخارج الخلية 12. لتسهيل امتصاص الخلوية، فمن الممكن تعديل nanocarriers مع بروابط معينة بما في ذلك الببتيدات، جزيئات صغيرة، والاجسام المضادة 13،14. العديد من الآليات بما في ذلك اختراق السلبي والنقل النشط النانويةعبر غشاء الخلية قد تم وصفها سابقا 3،12،15. بشكل عام، وقد ثبت أن تفاعلات الخلايا جسيمات متناهية الصغر تتأثر الخصائص الفيزيائية للجسيمات النانو بما في ذلك الحجم والشكل، وتهمة السطحية والكيمياء السطحية، بالإضافة إلى المعلمات خلية محددة مثل نوع من الخلايا أو الخلية مرحلة دورة 12. أظهر تحقيق سابق توليف الفرعية 10 SLNs نانومتر للالموضعية 16 و العلامات البيولوجية التطبيقات كشف 1 باستخدام طريقة درجة الحرارة مرحلة انقلاب (PIT) 17. هذه هي طريقة تركيب لطيف حيث 2 يبقى التكوين المستمر بينما يتم تغيير درجة الحرارة تدريجيا. التقليب المستمر من الحل ساخنة، لأنه يبرد إلى نتائج RT في nanoemulsion. ينتج عن هذه العملية في تركيب SLNs مع حجم أصغر الجسيمات 1 من ذلك ذكرت سابقا باستخدام أساليب مختلفة لتركيب الدهون نانoparticles 17-22. مقياس حجم الناتج أقل من 20 نانومتر، ويوفر ميزة لتطبيقات استهداف الخلايا نتيجة لزيادة مساحة السطح والإمكانات لتعزيز التفاعلات الخلوية. A التخطيطي SLNs، وتهدف إلى تقديم صبغة الفلورسنت أو العلاجية، ويظهر في الشكل 1. تتكون SLNs من الدهون الداخلية (على سبيل المثال، ألكان الخطية) السماح بإدماج المركبات محبة للدهون (على سبيل المثال، والأصباغ أو المداواة) والخارجي السطحي (السطحي غير أيوني على سبيل المثال، وخطي) تحيط بها المياه. في هذه الدراسة، تم تحميلها SLNs مع صبغة الفلورسنت وتستخدم كنموذج للتحقيق في التفاعلات خلية الجسيمات. تعرضت الخلايا الليفية الجلدية الإنسان الأساسية والخلايا الجذعية الماوس لتحميل صبغ SLN على مر الزمن من أجل توصيف التفاعلات فيما يتعلق سمية وامتصاص الجسيمات. وكان 3- (4،5-dimethylthiazol-2-يل) -2،5-diphenylphenyltetrazolium بروميد (MTT) فحص utiliزد من أجل تحديد مستويات الجرعات المناسبة. كانت المجهري مضان والتدفق الخلوي اثنين من الأساليب المستخدمة لفحص امتصاص الجسيمات في المختبر. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/53102/53102fig1.jpg" /> الشكل 1. رسم تخطيطي للSLN تبين المكونات الرئيسية. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53102/53102fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Nile Red (NiR)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>19123</td>
			<td>BioReagent, suitable for fluorescence, &#8805;98.0%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heneicosane</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>286052</td>
			<td>98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brij O10</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6136</td>
			<td>Brij 97, C18-1E10, Polyoxyethylene (10) oleyl ether</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>W3500</td>
			<td>Sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Filter 0.2 &#181;m Supor Membrane Low Protein Binding</td>
			<td>Life Sciences</td>
			<td>PN4612</td>
			<td>Non-Pyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanotrac Ultra&#160;</td>
			<td>Microtrac</td>
			<td>serial number U1985IS</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Differential Scanning Calorimeter</td>
			<td>Mettlet-Toledo</td>
			<td>----</td>
			<td>Instument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary human fibroblasts&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>C-004-5C</td>
			<td>Neonatal (HDFn)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium 106</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>M-106-500</td>
			<td>A sterile, liquid medium for the culture of human dermal fibroblasts.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Serum Growth Supplement Kit (LSGS Kit)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>S-003-K</td>
			<td>All the components of complete LSGS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT Cell Proliferation Assay Kit</td>
			<td>Trevigen</td>
			<td>4890-025-K</td>
			<td>Sensitive kit for the measurement of cell proliferation based upon the reduction of the tetrazolium salt, 3,[4,5-dimethylthiazol-2- yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safire2 microplate reader</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>----</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5493</td>
			<td>For molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant murine GM-CSF&#160;</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>415</td>
			<td>&#62;97%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by silver stain.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant murine IL-4&#160;</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>404</td>
			<td>&#62;97%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by silver stain.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

solid lipid nanoparticles (slns) for intracellular targeting applications

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter cellular signaling and gene expression. In a previous investigation, the synthesis of ultra-small solid lipid nanoparticles (SLNs) for topical drug delivery and biomarker detection applications was demonstrated. SLNs are a well-studied example of a nanoparticle delivery system that has emerged as a promising drug delivery vehicle. In this study, SLNs were loaded with a fluorescent dye and used as a model to investigate particle-cell interactions. The phase inversion temperature (PIT) method was used for the synthesis of ultra-small populations of biocompatible nanoparticles. A 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenylphenyltetrazolium bromide (MTT) assay was utilized in order to establish appropriate dosing levels prior to the nanoparticle-cell interaction studies. Furthermore, primary human dermal fibroblasts and mouse dendritic cells were exposed to dye-loaded SLN over time and the interactions with respect to toxicity and particle uptake were characterized using fluorescence microscopy and flow cytometry. This study demonstrated that ultra-small SLNs, as a nanoparticle delivery system, are suitable for intracellular targeting of different cell types.

تم استخدام أسلوب PIT لتجميع SLNs وتم تحديد درجة الحرارة مرحلة انعكاس باستخدام حمام مائي. كانت النماذج تسخن ببطء وتحريكها بلطف حتى ظهر حل واضح. درجة الحرارة المرحلة انعكاس لSLNs التي تستخدم فيها الدهون heneicosane 45 ° C. ويلخص الجدول 1 حجم الجسيمات، والتشتت المتعدد، نقطة انصهار والحرارة الكامنة لانصهار لSLNs. أدى SLNs تصنيعه باستخدام ظروف التصنيع المذكورة أعلاه في SLNs السيطرة وSLNs نير محملة متوسط ​​قطرها الجسيمات من 18.59 و16.87 نانومتر ومع التشتت المتعدد من 5.83 و 4.47 على التوالي (الشكل 3). تم رصد استقرار تشتت SLNs من قبل قياس حجم الجسيمات على مدى 6 أيام في درجتي حرارة التخزين المختلفة (4 و 23 ° C). وقال إن حجم الجسيمات لم تتغير على مدى 6 أيام (لا تظهر البيانات). السلوك الحراري للSLNs كان investigATED باستخدام المسح التفاضلي قياس الكالوري. وSLNs توليفها لديهم درجة انصهار 38.0 (± 0.4) و 36.8 (± 0.2) درجة مئوية لSLNs السيطرة وSLNs نير تحميلها، على التوالي. في المقابل، فإن نقطة انصهار للدهون الجزء الأكبر هو 40.0 درجة مئوية، مما يدل على قمع درجة انصهار SLNs المتعلقة الدهون بكميات كبيرة. كما هو متوقع، والحبس لأبعاد صغيرة وارتفاع سطح نسبة المساحة إلى حجم كساد نقطة جسيمات متناهية الصغر ذوبان 1. وعلاوة على ذلك، والحرارة الكامنة لانصهار لSLNs السيطرة وSLNs نير محملة هي 5.1 (± 0.2)، و 4.0 (± 0.1) J / ز، على التوالي. وتشير هذه النتائج إلى أن مستوى التبلور من SLNs يتأثر الحمولة، حيث أظهر SLNs نير تحميلها على التبلور أقل بالمقارنة مع SLNs السيطرة. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/53102/53102fig3highres.jpg" width="600" /> الشكل 3. الجسيمات توزيع حجمnanoemulsions نموذجية. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53102/53102fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> عينة </td><td> حجم الجسيمات (نانومتر) </td><td> التشتت المتعدد </td><td> ذوبان نقطة (° C) </td><td> الحرارة الكامنة للذوبان (J / ز) </td></tr><tr><td> SLNs (التحكم) </td><td> 18.59 </td><td> 5.83 </td><td> 38.0 ± 0.4 </td><td> 5.1 ± 0.2 </td></tr><tr><td> نير-SLNs </td><td> 16.87 </td><td> 4.47 </td><td> 36.8 ± 0.2 </td><td> 4.0 ± 0.1 </td></tr></tbody></table> الجدول 1. ملخص من الخصائص الفيزيائية والسلوك الحراري للSLNs السيطرة وSLNs نير محملة بما في ذلك حجم الجسيمات، والتشتت المتعدد، نقطة انصهار والحرارة الكامنة ل<html> ذوبان. من أجل استكشاف التفاعلات بين الجزيئات ونماذج الخلوية، والقيود جرعة من SLN تطبق بشكل مباشر على الخلايا الأولية في الثقافة، لأول مرة. باستخدام فحص MTT، وقد تم قياس تأثير الجرعة والاستجابة على الأيض الخلوي، حيث أدت زيادة تركيز الجسيمات إلى انخفاض في قابلية الخلوية (مع الاحترام للخلايا السيطرة غير المعالجة). لم يكن هناك اختلاف الملحوظ في سمية بين الخلايا المعرضة لSLN وحده مقابل SLN نير محملة على هذه الجرعات المحددة مسبقا. في موازاة ذلك، كانت خلايا فحص البصر للانضمام إلى ثقافة البوليسترين الأنسجة وأخذت الصور لإظهار كل من التشكل الخلوي التمثيلي وامتصاص الجزيئات الفلورسنت على مر الزمن (الشكل 5). باستخدام جرعة تساوي 5 ميكروغرام / مل الدهون لوحظ (حوالي 80٪ الخلوي الجدوى) امتصاص الجسيمات من قبل 2 ساعة بعد التعرض. يس &quot;&gt; <img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/53102/53102fig4.jpg" /> الرقم 4. قابلية الخلايا الليفية الجلدية الإنسان الابتدائية بعد 24 ساعة الحضانة مع النانوية. وقد تم قياس الجدوى باستخدام فحص MTT، وتمثل البيانات خلايا قابلة للحياة في المئة فيما يتعلق ضوابط غير المعالجة. تركيزات تمثل وزن / حجم الدهون. وتعكس البيانات لا يقل عن ثلاث تجارب مستقلة، أجريت في ثلاث نسخ. أشرطة الخطأ تشير إلى الخطأ المعياري للمتوسط. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53102/53102fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/53102/53102fig5.jpg" /> الرقم 5. الأولية الخلايا الليفية الجلد البشري بعد (A) 2 و (B) 24 ساعة الحضانة مع النانوية نير تحميلها. تركيز الجسيمات النانوية يساوي 5 ميكروغرام / مل الدهون.الصور هي تمثيلية لا تقل عن ثلاثة تجارب مستقلة، أجريت في مكررة. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53102/53102fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> واستنادا إلى نتائج الدراسات الحد الجرعة، تم التحقيق العلاقة بين جرعة من SLNs ومستوى التأسيس في الفئران BMDC. وتعتبر هذه الخلايا على نطاق واسع أفضل لاعب في نموذج المختبر من عدة مجموعات فرعية DC الموجودة في الجسم الحي، والسماح للتحقيقات الأساسية المستوى البحثي بين كل من المؤثرات الخلوية والجزيئية من التلاعب المقصود. تركت BMDC غير المعالجة أو يتعرض O / N إما 0.5 أو 5.0 ميكروغرام / الدهون مل من SLNs نير تحميل (على غرار الخلايا الليفية الإنسان، أدى استخدام 50 ميكروغرام / الدهون مل في خلايا قابلة للحياة أقل من 10٪) ومستوى جسيمات متناهية الصغر التأسيس يحدد عن طريق قياس كثافة من نير مضان في BMDCs عبر التدفق الخلوي. A كور المباشرlation بين تركيز SLNs المستخدم وكمية من مضان المقررة في BMDCs لوحظ (الشكل 6A). وكشف تحليل الحركية من نير محملة SLNs التأسيس لامتصاص السريع جدا BMDC. كانت إشارة الفلورسنت SLN بالفعل واضحة بعد 1 ساعة من التعرض، في حين plateauing في جميع أنحاء 5H التعرض (الشكل 6B). <img alt="الشكل (6)" src="/files/ftp_upload/53102/53102fig6.jpg" /> تعرضت الرقم 6. SLN التأسيس من قبل الخلايا الجذعية يرتبط مع تركيز التعرض. (A) عظام الفئران المستمدة من نخاع الخلايا الجذعية (BMDC) O / N لنير-SLNs، في تركيز الدهون المشار إليها، ومستوى التأسيس تقييم عبر التدفق الخلوي. هي بوابات تراكب الرسم البياني جميع على CD11c و+ السكان. (B) الحركية التأسيس SLN التي كتبها BMDC. تعرض الخلايا لنير-SLNs (5ميكروغرام / مل) للمرة المحدد ومستوى مضان (على CD11c وبوابات + الخلايا) والمقررة من قبل التدفق الخلوي. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53102/53102fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications at JoVE.com

Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

In this study, a method for synthesizing ultra-small populations of biocompatible nanoparticles was described, as well as several in vitro methods by which to assess their cellular interactions.

الصلبة الدهون النانوية (SLNs) لاستهداف التطبيقات بين الخلايا

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter ...

solid-lipid-nanoparticles-slns-for-intracellular-targeting

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Solid Lipid Nanoparticles (SLNs) for Intracellular Targeting Applications

16.8K Views.  The Johns Hopkins Applied Physics Laboratory. In this study, a method for synthesizing ultra-small populations of biocompatible nanoparticles was described, as well as several in vitro methods by which to assess their cellular interactions. 

Video: Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being investigated for applications in imaging and therapy. Viral nanoparticles (VNPs) derived from plants can be regarded as self-assembled bionanomaterials with defined sizes and shapes. Plant viruses under investigation in the Steinmetz lab include icosahedral particles formed by Cowpea mosaic virus (CPMV) and Brome mosaic virus (BMV), both of which are 30 nm in diameter. We are also developing rod-shaped and filamentous structures derived from the following plant viruses: Tobacco mosaic virus (TMV), which forms rigid rods with dimensions of 300 nm by 18 nm, and Potato virus X (PVX), which form filamentous particles 515 nm in length and 13 nm in width (the reader is referred to refs. 1 and 2 for further information on VNPs).
From a materials scientist's point of view, VNPs are attractive building blocks for several reasons: the particles are monodisperse, can be produced with ease on large scale in planta, are exceptionally stable, and biocompatible. Also, VNPs are "programmable" units, which can be specifically engineered using genetic modification or chemical bioconjugation methods 3. The structure of VNPs is known to atomic resolution, and modifications can be carried out with spatial precision at the atomic level4, a level of control that cannot be achieved using synthetic nanomaterials with current state-of-the-art technologies.
In this paper, we describe the propagation of CPMV, PVX, TMV, and BMV in Vigna ungiuculata and Nicotiana benthamiana plants. Extraction and purification protocols for each VNP are given. Methods for characterization of purified and chemically-labeled VNPs are described. In this study, we focus on chemical labeling of VNPs with fluorophores (e.g. Alexa Fluor 647) and polyethylene glycol (PEG). The dyes facilitate tracking and detection of the VNPs 5-10, and PEG reduces immunogenicity of the proteinaceous nanoparticles while enhancing their pharmacokinetics 8,11. We demonstrate tumor homing of PEGylated VNPs using a mouse xenograft tumor model. A combination of fluorescence imaging of tissues ex vivo using Maestro Imaging System, fluorescence quantification in homogenized tissues, and confocal microscopy is used to study biodistribution. VNPs are cleared via the reticuloendothelial system (RES); tumor homing is achieved passively via the enhanced permeability and retention (EPR) effect12. The VNP nanotechnology is a powerful plug-and-play technology to image and treat sites of disease in vivo. We are further developing VNPs to carry drug cargos and clinically-relevant imaging moieties, as well as tissue-specific ligands to target molecular receptors overexpressed in cancer and cardiovascular disease.

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Plant viral nanoparticles (VNPs) are promising platforms for applications in biomedicine. Here, we describe the procedures for plant VNP propagation, purification, characterization, and bioconjugation. Finally, we show the application of VNPs for tumor homing and imaging using a mouse xenograft model and fluorescence imaging.

الفيروسية النانوية ل<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير ورم

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Harmonic Nanoparticles for Regenerative Research

In this visualized experiment, protocol details are provided for in vitro labeling of human embryonic stem cells (hESC) with second harmonic generation nanoparticles (HNPs). The latter are a new family of probes recently introduced for labeling biological samples for multi-photon imaging. HNPs are capable of doubling the frequency of excitation light by the nonlinear optical process of second harmonic generation with no restriction on the excitation wavelength.
Multi-photon based methodologies for hESC differentiation into cardiac clusters (maintained as long term air-liquid cultures) are presented in detail. In particular, evidence on how to maximize the intense second harmonic (SH) emission of isolated HNPs during 3D monitoring of beating cardiac tissue in 3D is shown. The analysis of the resulting images to retrieve 3D displacement patterns is also detailed.

Protocol details are provided for in vitro labeling human embryonic stem cells with second harmonic generating nanoparticles. Methodologies for hESC investigation by multi-photon microscopy and their differentiation into cardiac clusters are also presented.

التوافقي النانوية للبحوث التجديدي

In this visualized experiment, protocol details are provided for in vitro labeling of human embryonic stem cells (hESC) with second harmonic generation ...

Production and Targeting of Monovalent Quantum Dots

The multivalent nature of commercial quantum dots (QDs) and the difficulties associated with producing monovalent dots have limited their applications in biology, where clustering and the spatial organization of biomolecules is often the object of study. We describe here a protocol to produce monovalent quantum dots (mQDs) that can be accomplished in most biological research laboratories via a simple mixing of CdSe/ZnS core/shell QDs with phosphorothioate DNA (ptDNA) of defined length. After a single ptDNA strand has wrapped the QD, additional strands are excluded from the surface. Production of mQDs in this manner can be accomplished at small and large scale, with commercial reagents, and in minimal steps. These mQDs can be specifically directed to biological targets by hybridization to a complementary single stranded targeting DNA. We demonstrate the use of these mQDs as imaging probes by labeling SNAP-tagged Notch receptors on live mammalian cells, targeted by mQDs bearing a benzylguanine moiety.

We provide detailed instructions for the preparation of monovalent targeted quantum dots (mQDs) from phosphorothioate DNA of defined length. DNA wrapping occurs in high yield, and therefore, products do not require purification. We demonstrate the use of the SNAP tag to target mQDs to cell-surface receptors for live-cell imaging applications.

الإنتاج واستهداف الأحادي التكافؤ الكم النقاط

The multivalent nature of commercial quantum dots (QDs) and the difficulties associated with producing monovalent dots have limited their applications in ...

Biofunctionalized Prussian Blue Nanoparticles for Multimodal Molecular Imaging Applications

Multimodal, molecular imaging allows the visualization of biological processes at cellular, subcellular, and molecular-level resolutions using multiple, complementary imaging techniques. These imaging agents facilitate the real-time assessment of pathways and mechanisms in vivo, which enhance both diagnostic and therapeutic efficacy. This article presents the protocol for the synthesis of biofunctionalized Prussian blue nanoparticles (PB NPs) - a novel class of agents for use in multimodal, molecular imaging applications. The imaging modalities incorporated in the nanoparticles, fluorescence imaging and magnetic resonance imaging (MRI), have complementary features. The PB NPs possess a core-shell design where gadolinium and manganese ions incorporated within the interstitial spaces of the PB lattice generate MRI contrast, both in T1 and T2-weighted sequences. The PB NPs are coated with fluorescent avidin using electrostatic self-assembly, which enables fluorescence imaging. The avidin-coated nanoparticles are modified with biotinylated ligands that confer molecular targeting capabilities to the nanoparticles. The stability and toxicity of the nanoparticles are measured, as well as their MRI relaxivities. The multimodal, molecular imaging capabilities of these biofunctionalized PB NPs are then demonstrated by using them for fluorescence imaging and molecular MRI in vitro.

This protocol describes the synthesis of biofunctionalized Prussian blue nanoparticles and their use as multimodal, molecular imaging agents. The nanoparticles have a core-shell design where gadolinium or manganese ions within the nanoparticle core generate MRI contrast. The biofunctional shell contains fluorophores for fluorescence imaging and targeting ligands for molecular targeting.

Biofunctionalized البروسية الأزرق النانوية الجزيئية لالمتعدد الوسائط تطبيقات التصوير

Multimodal, molecular imaging allows the visualization of biological processes at cellular, subcellular, and molecular-level resolutions using multiple, ...

Cell Labeling and Targeting with Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles

Targeted delivery of cells and therapeutic agents would benefit a wide range of biomedical applications by concentrating the therapeutic effect at the target site while minimizing deleterious effects to off-target sites. Magnetic cell targeting is an efficient, safe, and straightforward delivery technique. Superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPION) are biodegradable, biocompatible, and can be endocytosed into cells to render them responsive to magnetic fields. The synthesis process involves creating magnetite (Fe3O4) nanoparticles followed by high-speed emulsification to form a poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) coating. The PLGA-magnetite SPIONs are approximately 120 nm in diameter including the approximately 10 nm diameter magnetite core. When placed in culture medium, SPIONs are naturally endocytosed by cells and stored as small clusters within cytoplasmic endosomes. These particles impart sufficient magnetic mass to the cells to allow for targeting within magnetic fields. Numerous cell sorting and targeting applications are enabled by rendering various cell types responsive to magnetic fields. SPIONs have a variety of other biomedical applications as well including use as a medical imaging contrast agent, targeted drug or gene delivery, diagnostic assays, and generation of local hyperthermia for tumor therapy or tissue soldering.

Targeted cell delivery is useful in a variety of biomedical applications. The goal of this protocol is to use superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPION) to label cells and thereby enable magnetic cell targeting approaches for a high degree of control over cell delivery and localization.

وسم الخلية واستهداف مع مغنطيسية مسايرة فائقة superparamagnetic أوكسيد الحديد النانوية

Targeted delivery of cells and therapeutic agents would benefit a wide range of biomedical applications by concentrating the therapeutic effect at the ...

Fabricating Superhydrophobic Polymeric Materials for Biomedical Applications

Superhydrophobic materials, with surfaces possessing permanent or metastable non-wetted states, are of interest for a number of biomedical and industrial applications. Here we describe how electrospinning or electrospraying a polymer mixture containing a biodegradable, biocompatible aliphatic polyester (e.g., polycaprolactone and poly(lactide-co-glycolide)), as the major component, doped with a hydrophobic copolymer composed of the polyester and a stearate-modified poly(glycerol carbonate) affords a superhydrophobic biomaterial. The fabrication techniques of electrospinning or electrospraying provide the enhanced surface roughness and porosity on and within the fibers or the particles, respectively. The use of a low surface energy copolymer dopant that blends with the polyester and can be stably electrospun or electrosprayed affords these superhydrophobic materials. Important parameters such as fiber size, copolymer dopant composition and/or concentration, and their effects on wettability are discussed. This combination of polymer chemistry and process engineering affords a versatile approach to develop application-specific materials using scalable techniques, which are likely generalizable to a wider class of polymers for a variety of applications.

Two- and three-dimensional superhydrophobic polymeric materials are prepared by electrospinning or electrospraying biodegradable polymers blended with a lower surface energy polymer of similar composition.

افتعال فائقة الكره المواد البوليمرية للتطبيقات الطبية الحيوية

Superhydrophobic materials, with surfaces possessing permanent or metastable non-wetted states, are of interest for a number of biomedical and industrial ...

Manufacture and Drug Delivery Applications of Silk Nanoparticles

Silk is a promising biopolymer for biomedical and pharmaceutical applications due to its outstanding mechanical properties, biocompatibility and biodegradability, as well its ability to protect and subsequently release its payload in response to a trigger. While silk can be formulated into various material formats, silk nanoparticles are emerging as promising drug delivery systems. Therefore, this article covers the procedures for reverse engineering silk cocoons to yield a regenerated silk solution that can be used to generate stable silk nanoparticles. These nanoparticles are subsequently characterized, drug loaded and explored as a potential anticancer drug delivery system. Briefly, silk cocoons are reverse engineered first by degumming the cocoons, followed by silk dissolution and clean up, to yield an aqueous silk solution. Next, the regenerated silk solution is subjected to nanoprecipitation to yield silk nanoparticles &#8211; a simple but powerful method that generates uniform nanoparticles. The silk nanoparticles are characterized according to their size, zeta potential, morphology and stability in aqueous media, as well as their ability to entrap a chemotherapeutic payload and kill human breast cancer cells. Overall, the described methodology yields uniform silk nanoparticles that can be readily explored for a myriad of applications, including their use as a potential nanomedicine.

Nanoparticles are emerging as promising drug delivery systems for a broad range of indications. Here, we describe a simple yet powerful method to manufacture silk nanoparticles using reverse engineered Bombyx mori silk. These silk nanoparticles can be readily loaded with a therapeutic payload and subsequently explored for drug delivery applications.

تطبيقات تصنيع وتسليم المخدرات من النانوية الحرير

Silk is a promising biopolymer for biomedical and pharmaceutical applications due to its outstanding mechanical properties, biocompatibility and ...

Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications

The development of new advanced materials with enhanced properties is becoming more and more important in a wide range of bioengineering applications. Thus, many novel biomaterials are being designed to mimic specific environments required for biomedical applications such as tissue engineering and controlled drug delivery. The development of materials with improved properties for the immobilization of cells or enzymes is also a current research topic in bioprocess engineering. However, one of the most desirable properties of a material in these applications is the antimicrobial capacity to avoid any undesirable infections. For this, we present easy-to-follow protocols for the antimicrobial characterization of materials based on (i) the agar disk diffusion test (diffusion method) and (ii) the ISO 22196:2007 norm to measure the antimicrobial activity on material surfaces (contact method). This protocol must be performed using Gram-positive and Gram-negative bacteria and yeast to cover a broad range of microorganisms. As an example, 4 materials with different chemical natures are tested following this protocol against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Candida albicans.The results of these tests exhibit non-antimicrobial activity for the first material and increasing antibacterial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria for the other 3 materials. However, none of the 4 materials are able to inhibit the growth of Candida albicans.

We present a protocol for the antimicrobial characterization of advanced materials. Here, the antimicrobial activity on material surfaces is measured by two methods that complement each other: one is based on the agar disk diffusion test, and the other is a standard procedure based on the ISO 22196:2007 norm.

مضادات الميكروبات توصيف المواد المتقدمة لتطبيقات الهندسة الحيوية

The development of new advanced materials with enhanced properties is becoming more and more important in a wide range of bioengineering applications. ...

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and size by low-density lipoproteins (LDLs) because cancer cells have an increased need for cholesterol to proliferate, and this has been exploited as a mechanism for delivering anticancer drugs to cancer cells. Moreover, depending on drug chemistry, encapsulating the drug can be advantageous to avoid degradation of the drug during circulation in vivo. Therefore, in this&#160;study, this design is used to fabricate lipid-coated nanoparticles of the anticancer drug falcarindiol, providing a potential new delivery system of falcarindiol in order to stabilize its chemical structure against degradation and improve its uptake by tumors. Falcarindiol nanoparticles, with a phospholipid and cholesterol monolayer encapsulating the purified drug core of the particle, were designed. The lipid monolayer coating consists of 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC), cholesterol (Chol), and 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (DSPE PEG 2000) along with the fluorescent label DiI (molar ratios of 43:50:5:2). The nanoparticles are fabricated using the rapid injection method, which is a fast and simple technique to precipitate nanoparticles by good-solvent for anti-solvent exchange. It consists of a rapid injection of an ethanol solution containing the nanoparticle components into an aqueous phase. The size of the fluorescent nanoparticles is measured using dynamic light scattering (DLS) at 74.1 &#177; 6.7 nm. The uptake of the nanoparticles is tested in human mesenchymal stem cells (hMSCs) and imaged using fluorescence and confocal microscopy. The uptake of the nanoparticles is observed in hMSCs, suggesting the potential for such a stable drug delivery system for falcarindiol.

This article describes the encapsulation of falcarindiol in lipid-coated 74 nm nanoparticles. The cellular uptake of the nanoparticles&#160;by human stem cells into lipid droplets is monitored by fluorescent and confocal imaging. Nanoparticles are fabricated by the rapid injection method of solvent shifting, and their size is measured with the dynamic light scattering technique.

الامتصاص من جديد جسيمات نانوية المغلفة بالدهون التي تحتوي على فالكارينديول بالخلايا الجذعية البشرية الوسيطة

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

Applications for Open Source Microplate-Compatible Illumination Panels

Microplates are commonly used in the modern laboratory environment for a wide variety of tasks both in small-scale laboratory benchtop operations as well as large-scale high-throughput screening (HTS) campaigns. Though laboratory automation has greatly increased the utility of microplates there remain instances where automation-based instrumentation is not feasible, cost-effective or compatible with microplate formatting needs. In these cases, microplates must be manually prepared. Problematic to manual microplate manipulations is that a number of difficulties can arise pertaining to the accurate tracking of sample operations, data record keeping and quality control (QC) inspection for well artifacts or formatting errors. As microplate well densities increase (i.e., 96-well, 384-well, 1536-well) the potential for introducing errors also drastically increases.&#160; Moreover, for small bench-top laboratory operations there exists a need to improve the ease and accuracy of sample handling in a cost-effective fashion. Herein, we describe a system that acts as a semi-automated pipetting guide referred to as the Microplate Assistive Pipetting Light Emitter (M.A.P.L.E.). &#160;M.A.P.L.E. has multiple uses for supporting compound hit-picking and microplate preparation for assay development in high-throughput screening or laboratory benchtop operations, as well as QC/quality assurance (QA) diagnostic evaluation of microplate quality or visualizing well formatting errors.

Microplate Assistive Pipetting Light Emitter (M.A.P.L.E.) is a computer-driven device that systematically illuminates microtiter wells to provide guidance for the manual preparation of microplates.&#160; M.A.P.L.E. improves the accuracy of microplate preparation while automating data recordkeeping. &#160;In addition, it can assist with examining microplate quality or aid in the detection of errors.&#160; &#160;

تطبيقات للواح الاضاءه المتوافقة مع اللوحة المفتوحة المصدر

Microplates are commonly used in the modern laboratory environment for a wide variety of tasks both in small-scale laboratory benchtop operations as well ...